翟少欽,付文貴,鄭 華,付利芝
(重慶市畜牧科學(xué)院,重慶 榮昌402460)
豬弓形體病又稱弓形蟲病、弓漿蟲病和毒漿蟲病,是由艾美耳科龔地弓形體引起的一種嚴(yán)重人畜共患原蟲病。臨床常稱為"無名高熱"病,常以突然發(fā)病、高熱稽留、呼吸及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。皮膚發(fā)紺、妊娠母豬流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形等為其特征。剖檢時(shí)肺、肝、淋巴結(jié)等臟器腫脹,有出血點(diǎn)和壞死灶,主要通過呼吸道、消化道、皮膚、胎盤等途徑感染。1908年法國(guó)人Nicolleh和Manceaux在北非的一種龔地梳趾鼠(Ctendactylusgondii)的肝、脾的單核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)弓形體。之后,許多國(guó)家如美國(guó)、日本等都有人和動(dòng)物感染的調(diào)查報(bào)告。1955年國(guó)內(nèi)在野兔體內(nèi)首次發(fā)現(xiàn),以后又在貓?bào)w內(nèi)發(fā)現(xiàn),到1977年上海發(fā)現(xiàn)以往所謂豬無名高熱病是由弓形體引起的,以后相繼在江西、北京、遼寧、黑龍江、廣州、安徽、湖北、寧夏和吉林等地的豬發(fā)生了弓形體?。?-2,4-5]。特別是近年來,該病在全國(guó)呈一定的流行趨勢(shì),感染率達(dá)30%~50%,致死率高達(dá)30%~40%,有的甚至達(dá)到50%以上。為了了解弓形體病在川渝兩地規(guī)?;i場(chǎng)種豬的感染情況,我們對(duì)10個(gè)規(guī)?;i場(chǎng)的保育豬、母豬及后備母豬進(jìn)行了弓形體的血清流行病學(xué)調(diào)查,并進(jìn)行了親和力的檢查,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 待檢血清 樣品來源于川渝兩地12個(gè)規(guī)?;i場(chǎng),常規(guī)方法采血、分離血清,-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩9搏@得351份豬血清。
1.2 檢測(cè)試劑 豬弓形體IgG抗體診斷試劑盒(ELISA),購自深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司(批號(hào):100801)。
1.3 儀器 318-MC酶標(biāo)儀:上海科儀儀器有限公司;高速離心機(jī)(型號(hào)TG-16):四川蜀科儀器有限公司;離心管、微量加樣器。
1.4 豬血清弓形體ELlSA檢測(cè)方法 嚴(yán)格按照使用說明書操作,酶標(biāo)儀630nm處測(cè)定其OD值,OD630值>0.4為陽性,OD630值<0.2為陰性,0.2<OD630值<0.4為可疑。
1.5 采用尿素變性試驗(yàn)[3]檢測(cè)弓形體感染IgG抗體親和力指數(shù)(avidity index,AI) 依據(jù)Stagno和Blackburn測(cè)定抗體親和力的方法操作。AI=尿素變性后吸光度數(shù)/沒加尿素變性吸光度數(shù)×100%。AI<30%為低親和力抗體,表示為原發(fā)性感染;介于30%至50%為中等親和力抗體,>50%為高親和力抗體,表示為過去感染(包括病毒活化或再感染)。
2.1 本次檢測(cè)從川渝兩地規(guī)?;i場(chǎng)共采集血清樣品351份,檢查弓形體抗體陽性333份,陽性率為94.87%,這充分表明了川渝地區(qū)豬弓形體感染非常普遍,而且每個(gè)豬場(chǎng)感染率都很高,達(dá)80%以上,甚至高達(dá)100%(見表1)。
2.2 從不同類型的豬只感染情況來看,在351份血清中,種母豬血清197份,弓形體抗體陽性率達(dá)98.98%;后備豬血清20份,弓形體抗體陽性率達(dá)95.00%;保育豬血清83份,弓形體抗體陽性率達(dá)85.54%;不確定組豬只血清51份,弓形體抗體陽性率達(dá)98.04%(見表2)。
表1 不同豬場(chǎng)豬弓形體感染狀況
表2 不同類型豬只弓形體感染狀況
2.3 不同豬場(chǎng)豬血清弓形體IgG抗體親和力檢測(cè)結(jié)果:對(duì)采集樣品中的344份血清進(jìn)行了弓形體IgG抗體親和力測(cè)定,其中AI<30%的有44份,占12.79%;30%<AI<50%的有116份,占33.72%;AI>50%的有184份,占53.49%(見表3)。
表3 豬弓形體IgG抗體親和力檢測(cè)結(jié)果
3.1 ELISA廣泛用于醫(yī)學(xué)弓形體病血清流行病學(xué)調(diào)查和診斷。Gamble(2005)比較了ELISA和改良的凝集試驗(yàn)(MAT)檢測(cè)弓形體病的特異性和敏感性后認(rèn)為ELISA是豬場(chǎng)弓形體病血清學(xué)調(diào)查最好的方法。次年Hill等(2006)通過實(shí)驗(yàn)室感染和自然感染弓形體病例評(píng)價(jià)各種診斷檢測(cè)方法,也認(rèn)為ELISA是診斷和調(diào)查本病的最佳方法。所以本試驗(yàn)采用ELISA方法,而且我們比較的市面上存在的兩種試劑盒,最后選擇用深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑盒。
3.2 川渝兩地豬弓形體感染嚴(yán)重而且各生產(chǎn)階段的豬都感染嚴(yán)重。本次檢測(cè)從川渝兩地規(guī)?;i場(chǎng)共采集血清樣品351份,檢查弓形體抗體陽性333份,陽性率為94.87%,而且種豬的感染率很高,達(dá)98.98%。這比2009年李小蘭[1]報(bào)道的四川地區(qū)產(chǎn)仔豬陽性率95%還要高,充分表明了川渝地區(qū)豬弓形體感染非常嚴(yán)重,每個(gè)豬場(chǎng)感染率都很高,種豬感染率基本在95%以上,有的甚至高達(dá)100%,保育豬的感染率是85.54%。
3.3 川渝兩地豬弓形體感染以復(fù)發(fā)性感染為主,僅少數(shù)病例是第一次感染弓形體,先天性弓形體病是豬場(chǎng)弓形體病主要特點(diǎn)。通過表3可以看出,344份血清樣品中,AI<30%占44份(12.79%),30%<AI<50%占116份(33.72%),AI>50%占184份(53.79%),表明這些豬只弓形體感染是以復(fù)發(fā)性感染為主,根據(jù)AI定義即川渝兩地豬先天性弓形體是主要流行病學(xué)特征。
3.4 豬弓形體病流行率與年齡、豬群大小、養(yǎng)豬體制、管理方式、生物安全如鼠害、貓和犬等動(dòng)物與豬的接觸等很相關(guān)[2],所以建議禁止在養(yǎng)豬場(chǎng)飼養(yǎng)貓科動(dòng)物并做好滅鼠工作,同時(shí)不要從近期發(fā)生過弓形體病的豬場(chǎng)引種,由于被污染的豬肉是人弓形體病的傳染來源,因此,獸醫(yī)檢疫部門應(yīng)加強(qiáng)生豬的宰前、宰后檢疫,防止被弓形體污染的肉品上市,保障廣大群眾的食品安全。
[1] 李小蘭,卜雨明,謝平,等.四川部分豬場(chǎng)豬弓形體病的血清學(xué)調(diào)查[J].養(yǎng)豬科學(xué),2009,26(3):95-97.
[2] 馬利青,王戈平,閻高峰.青海省西寧地區(qū)豬弓形體病的血清學(xué)調(diào)查[J].家畜生態(tài),2003,24(4):34-35.
[3] 李牧,楊永民,吳金萍,等.弓形體IgG抗體親和力指數(shù)在胎兒宮內(nèi)感染中的臨床意義[J].中國(guó)兒童保健雜志,2006,14(5):489-491.
[4] 冼瓊珍,蔡明福,王淑敏,等.豬弓形體病的血清學(xué)調(diào)查[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2006,33(11):103-104.
[5] 吳宇,周小兵,王順林,等.豬場(chǎng)弓形體感染的血清學(xué)調(diào)查與分析[J].今日養(yǎng)豬業(yè),2011(6):16-20,28.