林明哲 (青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，青海 西寧 810001)

結(jié)直腸癌生物學(xué)行為發(fā)展涉及機(jī)體基因和蛋白的變化，且與腫瘤的發(fā)展有關(guān)。橋粒芯糖蛋白2(DSG2)是橋粒的主要跨膜蛋白，其正常表達(dá)對(duì)維持上皮的形態(tài)有一定價(jià)值〔1〕。核孔蛋白復(fù)合體蛋白88(nup88)是核孔蛋白家族中的一個(gè)成員，通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期影響細(xì)胞的生長(zhǎng)及演變，并且參與多種物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，目前研究發(fā)現(xiàn)其與腫瘤的進(jìn)展有一定作用〔2〕。本文探討DSG2和nup88在結(jié)直腸癌中的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年1～12月在我院確診為結(jié)直腸癌的患者86例作為觀察組，均行根治手術(shù)，術(shù)后標(biāo)本均應(yīng)用甲醛溶液固定。均符合WHO中結(jié)直腸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)。年齡51～76歲，平均62.7歲，其中男性46例，女性40例。高分化39例，中分化20例，低分化27例。選取距離腫瘤邊緣＞5 cm切端的正常結(jié)腸黏膜組織60例作為對(duì)照組，其中男30例，女30例，年齡53～74歲，平均61.2歲。

1.2 DSG2和nup88蛋白檢測(cè) DSG2和nup88蛋白均購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz公司。應(yīng)用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司的免疫組化試劑盒。蛋白的檢測(cè)采用SP法，均由病理科主管技師完成，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) DSG2和nup88陽(yáng)性部位均位于細(xì)胞質(zhì)中，以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，選擇有代表性且染色較為集中的上皮細(xì)胞區(qū)域，計(jì)算5個(gè)400倍視野的細(xì)胞數(shù)，取平均值。以陽(yáng)性細(xì)胞≥25%為陽(yáng)性，以＜25%為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組DSG2和nup88表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組中DSG2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組，nup88表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(均P＜0.001)。見表1。

2.2 觀察組中DSG2和nup88的表達(dá)在不同臨床病理特征中的關(guān)系 觀察組中DSG2和nup88表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的浸潤(rùn)深度、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)密切相關(guān)(P均 ＜0.05)，而與Ki67表達(dá)增殖指數(shù)無(wú)關(guān)(P＞0.05)。見表2。

2.3 觀察組中DSG2和nup88表達(dá)的相關(guān)性分析 觀察組中DSG2和nup88之間的表達(dá)均未見明顯的相關(guān)性(P=0.214 5)。

表1 兩組中DSG2和nup88表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組中DSG2和nup88的陽(yáng)性表達(dá)在不同臨床病理特征中的關(guān)系〔n(%)〕

3 討論

結(jié)直腸癌發(fā)生過(guò)程中涉及多種原癌基因的激活和抑癌基因的失活。DSG是構(gòu)成細(xì)胞間橋粒的主要糖蛋白，正常情況下表達(dá)于上皮細(xì)胞〔3〕，DSG2作為家族的重要成員具有代表性。近年研究認(rèn)為DSG2表達(dá)障礙可能是造成橋粒破壞的原因，因此DSG2表達(dá)丟失或下降與腫瘤的分化和侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)〔4〕。還有觀點(diǎn)認(rèn)為DSG2可以引起細(xì)胞骨架和細(xì)胞凋亡等途徑的改變而改變腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移作用〔5〕。Nup88作為Nups的一種，其基因突變時(shí)可能影響了原癌基因或抑癌基因產(chǎn)物以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子等穿梭蛋白的核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，這也是引起上皮細(xì)胞癌變的重要因素〔6〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為Nup88的過(guò)度表達(dá)增強(qiáng)了多核細(xì)胞的形成，引起非整倍性、強(qiáng)化的基因組不穩(wěn)定性和癌細(xì)胞株的腫瘤發(fā)生〔7〕。Schneider等〔8〕研究子宮內(nèi)膜癌中 Nup88的表達(dá)，認(rèn)為Nup88是腫瘤侵襲性生長(zhǎng)的標(biāo)志性蛋白。

本實(shí)驗(yàn)提示DSG2和nup88異常表達(dá)在結(jié)直腸癌的形成和進(jìn)展中具有重要作用。在此過(guò)程中DSG2使上皮成分發(fā)生改變，此時(shí)可能與上皮黏附蛋白協(xié)同作用，引起腫瘤的黏附性下降，為轉(zhuǎn)移提供最初的條件〔9〕。而nup88可以調(diào)解細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和連接蛋白，調(diào)節(jié)生長(zhǎng)因子的生物利用度，誘導(dǎo)細(xì)胞遷移，使腫瘤細(xì)胞具有侵襲性〔10〕。本實(shí)驗(yàn)還顯示提示DSG2和nup88參與腫瘤的進(jìn)展，即DSG2和nup88參與腫瘤的周圍組織浸潤(rùn)、脈管侵犯和淋巴累犯，即DSG2低表達(dá)、nup88高表達(dá)患者的預(yù)后可能不良。本實(shí)驗(yàn)提示DSG2和nup88是腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的獨(dú)立影響因子，同時(shí)DSG2和nup88無(wú)明顯通路和協(xié)同作用。本實(shí)驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)DSG2和nup88在腫瘤中對(duì)Ki67表達(dá)的細(xì)胞增殖有明顯影響，因此DSG2和nup88的作用途徑是“非增殖”誘導(dǎo)途徑，可能是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、凋亡等相關(guān)的過(guò)程引起腫瘤的進(jìn)展〔9〕。綜上，結(jié)直腸癌中DSG2表達(dá)下降、nup88的表達(dá)升高，二者對(duì)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展均有重要的促進(jìn)作用，但未發(fā)現(xiàn)二者存在明顯相關(guān)性。

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