欒金倩 張 玲 浙江省臺州市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 臺州 318000

液基細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合HPV-DNA檢測篩查宮頸病變的臨床價值

欒金倩 張 玲 浙江省臺州市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 臺州 318000

宮頸癌 LCT HPV-DNA CIN 臨床價值

宮頸癌在婦女惡性腫瘤的發(fā)病率中僅次于乳腺癌，對宮頸癌發(fā)病機(jī)制的深入研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌的發(fā)生發(fā)展需要經(jīng)歷一個相對緩慢的過程，即癌前病變到宮頸癌這一過程，如何早期發(fā)現(xiàn)癌前病變及宮頸癌已成為降低發(fā)病率和提高治愈率的關(guān)鍵。人乳頭狀病毒（human papillomavirus，HPV）感染被認(rèn)為是宮頸病變及宮頸癌發(fā)生的必要因素[1]。HPV檢測已成為宮頸癌及癌前病變一種重要的篩查手段。宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測（liquid-based cylologic test，LCT）與傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢測相比，提高了細(xì)胞學(xué)篩查的靈敏度。本研究以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察LCT聯(lián)合HPV-DNA檢測對宮頸癌及癌前病變篩查的應(yīng)用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月—2012年5月我院婦科門診就診需進(jìn)行宮頸病變篩查的患者2 290例，排除無性生活史、妊娠期、月經(jīng)期，24h內(nèi)有性生活及3天內(nèi)有陰道上藥或陰道沖洗者。隨機(jī)選取2 290例患者，按照既往所行各檢查方法實際人數(shù)比例分組，其中LCT組1 200例，年齡20～55歲，平均33.6歲；HPV-DNA檢測組700例，年齡22～56歲，平均32.0歲；LCT+HPV-DNA檢測組390例，年齡20～51歲，平均30.9歲；三組年齡分布組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 研究方法

1.2.1 宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測（LCT） 充分暴露宮頸，用棉簽輕拭分泌物后，將Rovers毛刷中央部分深插入子宮頸管，使其充分接觸宮頸，按同一方向轉(zhuǎn)動毛刷5周以上，取下刷頭放入保存瓶內(nèi)，擰緊送檢。采用美國liquid-protest系統(tǒng)進(jìn)行檢測，按照TBS分類系統(tǒng)對宮頸病變診斷，以意義未明的不典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells of undermined significance，ASCUS）及以上病變?yōu)殛栃灾笜?biāo)。

1.2.2 HPV-DNA檢測 充分暴露宮頸，采用HPV檢測專用毛刷深入宮頸內(nèi)按同一時針方向轉(zhuǎn)動毛刷5周以上，停留10s后連毛刷全部浸入樣本管中，蓋好瓶蓋送檢。采用第二代基因雜交捕獲法（Hybrid CaptureII，HCⅡ），HCⅡ≥1.0pg/mL 為陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 陰道鏡下宮頸組織活檢 在陰道鏡下觀察宮頸移行上皮及血管，在醋酸白實驗、碘試驗陽性部位取宮頸組織活檢，1%甲醛溶液固定，采用Olympus公司陰道鏡數(shù)字成像系統(tǒng)進(jìn)行病理學(xué)檢查。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

LCT組1 200例中宮頸病變陽性196例，經(jīng)陰道鏡下活檢病理學(xué)診斷證實為CIN及宮頸癌145例，敏感度為74.0%，特異度為95.2%；HPV-DNA組700例中HPV-DNA陽性204例，經(jīng)陰道鏡下活檢病理學(xué)診斷證實為CIN及宮頸癌171例，敏感度為89.1%，特異度為93.5%；HPV-DNA檢測對宮頸病變篩查的敏感性高于LCT（P＜0.05）；但兩組特異度差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。LCT+HPV-DNA 檢測組 390例中HPV-DNA陽性156例，經(jīng)陰道鏡下活檢病理學(xué)診斷證實為CIN及宮頸癌140例，敏感度為99.29%，特異度93.57%，顯著高于LCT組和HPVDNA 組（P 均＜0.05），見表 1。

表1 三種方法篩查宮頸病變病理學(xué)結(jié)果比較 例

3 討論

1974年Zur首次提出HPV感染與宮頸腫瘤的密切關(guān)系。近20年學(xué)者們對HPV感染與宮頸病變關(guān)系的認(rèn)識逐漸一致：HPV感染是宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）及宮頸癌發(fā)生的必要因素[2-3]。HPV分為低危型和高危型，低危型HPV（如 HPV6、11、42、43、44）一般不誘發(fā)癌變，其主要引起肛門皮膚及男性外生殖器、女性陰唇及陰道下段外生性疣和低級別宮頸上皮內(nèi)瘤變。而高危型HPV（如 HPV16、18、33、39 等）除能引起上述外生性疣外，更可導(dǎo)致高級宮頸上皮內(nèi)瘤變，甚至宮頸癌或外生殖器癌。因此，HPV-DNA的檢測對宮頸病變的預(yù)測具有十分重要的意義。

目前臨床上已使用第二代基因雜交捕獲HCII技術(shù)檢測HPV，具有高度敏感性和特異性，陰性預(yù)測值更高達(dá)99%。但HPV-DNA技術(shù)對于低級別宮頸病變存在一定的假陰性率。Mark等[4]通過對病理診斷為宮頸病變者進(jìn)行HPV-DNA檢測，有33.8%的HPV-DNA陰性患者存在低級別或顯微鏡下病變。因此在篩查低級別宮頸病變方面，單獨HPV-DNA檢測可能導(dǎo)致診斷的遺漏。

LCT是基于巴氏涂片法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項宮頸病變篩查技術(shù)。與傳統(tǒng)巴氏涂片法比較，LCT不僅改善了樣本的收集率，而且使細(xì)胞均勻分布在玻片上，提高標(biāo)本質(zhì)量，縮短檢查時間，更減少了細(xì)胞病理學(xué)專家因視力疲勞等人為因素所造成的閱片誤差，提高陽性診斷率，其敏感性及特異性達(dá)89.4%及96.91%[5]。因此，LCT在宮頸癌及癌前病變篩查中突顯出的高效性，使其成為CIN及早期宮頸癌的重要篩查手段，近年來這一技術(shù)正在被廣泛推廣和應(yīng)用。但國內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)，LCT與病理組織學(xué)在低度宮頸病變中符合率低，存在的一定的假陰性率[6]。

本研究將LCT與HPV-DNA檢測方法結(jié)合在一起，以兩項中有一項異常發(fā)現(xiàn)，即定為陽性標(biāo)準(zhǔn)，再以陰道鏡檢測為金標(biāo)準(zhǔn)，以檢驗該方法在敏感性及特異性的方面是否優(yōu)于單獨某項檢測方法。結(jié)果表明，將LCT與HPV-DNA檢測方法結(jié)合在宮頸病變檢出的敏感性方面均優(yōu)于單獨應(yīng)用其中一項方法。此結(jié)果也與李穎等[7]研究結(jié)果相似。臨床上將LCT及HPV-DNA技術(shù)相互結(jié)合，能夠提高篩查的特異性，對預(yù)測宮頸病變的發(fā)展趨勢，積極有效預(yù)防宮頸癌的發(fā)生，以及早期及時治療宮頸癌均有積極作用。

［1］Snijders PJ，Heideman DA，Meijer CJ.Methods for HPV detection in exfoliated cell and tissue specimens［J］.APMIS，2010，118（6-7）：520-528.

［2］Schiffman MH，Bauer HM，Hoover RN，et al.Epidemilolgic evidence showing that Human Papillomavirus infection causes most cervical intraepithelial neoplasia［J］.Natl Cancer Inst，1993，85（6）：958-964.

［3］郎景和.接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2002，37（2）：129-131.

［4］Mark S，Rolando H，Allan H，et al.HPV DNA Testing in Cervical Cancer Screening-Results From Women in a High-Risk Province of Costa Rica［J］.JAMA，2000，283（1）：87-93.

［5］Li LY，Qiao ZQ，Zhang MF，et al.Study on the value assessment of various screening programs regarding cervical cancer screening strategy in the rural areas of China［J］.Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi，2007，28（10）：964-967.

［6］楊怡卓，李亞里，徐濱，等.TCT在宮頸病變篩查中的臨床價值及不足［J］.中華婦產(chǎn)科臨床雜志，2008，9（2）：87-89.

［7］李穎，王樹玉.TCT聯(lián)合液態(tài)基因芯片法HPV檢測對宮頸病變的篩查效果評價［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2011，19（10）：33-34.

浙江省臺州市科技項目（No.111KY07-8）

2013-06-23