徐 荔 彭 霞 王 娟 卯明霞

(云南省西雙版納州食品藥品檢驗所，云南 景洪 666100))

傣藥黑面神為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L．)Hook．f．的干燥根，《西雙版納傣藥志》(第一集)及文獻［1～2］記載為傣族地區(qū)傣族醫(yī)習用藥材，西雙版納傣醫(yī)將黑面神藥材稱為“哈帕彎藤”。黑面神性涼，味苦，入水、土、風塔。有調(diào)補水血，清火解熱，消腫止痛之功。用于產(chǎn)后腹痛，水血不足;月經(jīng)不調(diào)，痛經(jīng)，閉經(jīng);感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，咳嗽，痄鰓;腹痛下利，痢疾;風濕痹痛，斑疹;跌打損傷，淤血腫痛。目前對其質(zhì)量評價方法的研究未見文獻報道，為了有效控制其藥材質(zhì)量，作者對3批不同產(chǎn)地藥材的性狀、成分系統(tǒng)預試驗、顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等方面對黑面神藥材進行了研究，為黑面神藥材的質(zhì)量評價提供了科學依據(jù)。

1 材料與儀器

1．1 材料:樣品采自景洪市嘎灑鎮(zhèn)(1號樣)、景洪市景訥鄉(xiāng)(2號樣)、勐臘縣勐臘鎮(zhèn)(3號樣)，植物標本經(jīng)中國科學院西雙版納熱帶植物園鑒定為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L．)Hook．f．。硅膠 G(青島海洋化工廠)，所用其它試劑均為分析純。

1．2 儀器 LEICA RM－2016生物組織切片機(上海徠卡儀器有限公司)、SA3300PL生物顯微鏡(北京泰克儀器有限公司)、計算機顯微分析系統(tǒng)(北京泰克儀器有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2．1 性狀:本品為短柱狀，長0．5～3cm。表面灰褐色至淺紅棕色，具須根及須根痕，有的外皮脫落。質(zhì)硬，斷面皮部薄，木部黃白色。殘留莖斷面可見同心環(huán)。髓部小，色稍深。氣微，味淡、微澀。

2．2 成分系統(tǒng)預試驗:試驗顯示含有還原糖、多糖類、酚類、鞣質(zhì)、內(nèi)酯類、香豆素、強心苷、有機酸、蒽醌類等成分。

2．3 顯微鑒別:橫切面:木栓細胞5～8列，外被落皮層，有時形成2個木栓層帶。皮層細胞形狀不規(guī)則，內(nèi)側(cè)有乳汁細胞散在，內(nèi)含顆粒狀物。韌皮部細胞較小，排列緊密。形成層環(huán)明顯。木質(zhì)部寬廣，導管多為單個徑向排列，射線多為3～5列細胞，薄壁細胞中含有淀粉粒及少量草酸鈣簇晶(見圖1)。

粉末:粉末棕色。木栓細胞類方形、長方形、多角形，壁略厚，有的細胞內(nèi)含黃棕色物質(zhì)。具緣紋孔導管碎片直徑20～40μm。韌皮纖維長條形、長梭形，壁厚，孔溝明顯，胞腔內(nèi)含黃棕色物質(zhì);木纖維多成束，細長、破碎，壁略增厚，可見壁孔。木薄壁細胞類方形、菱形，壁呈連珠狀增厚，壁孔明顯。乳汁細胞不規(guī)則條狀、片塊狀，內(nèi)含黃棕色顆粒狀物。淀粉粒多復粒，由2～4分粒組成，少單粒，類圓形、橢圓形，臍點點狀、短縫狀，層紋不明顯，直徑5～10μm。草酸鈣簇晶多見，直徑10～20μm?？梢婞S棕色色素塊(見圖2)。

圖2 黑面神藥材粉末顯微圖

2．4 薄層色譜鑒別:取本品粉末1g，加乙醇15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黑面神對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄)試驗，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－丙酮－甲酸(6∶6∶1)為展開劑，預平衡15分鐘，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(見圖3)。

圖3 黑面神藥材薄層色譜圖(T:29℃ ，RH:35%)

2．5 水分:取1、2、3號樣粉末約2g，精密稱定，照水分測定法(《中國藥典》2010年版一部附錄第一法)測定，結(jié)果分別為．48%、9．84%、10．20%，平均值為．84%。

2．6 總灰分:取、2、3 號樣粉末約g，精密稱定，照(《中國藥典》2010年版一部附錄)，結(jié)果分別為2．52%、2．37%、2．57%，平均值為．49%。

2．7 酸不溶性灰分:取總灰分結(jié)果按(《中國藥典》2010年版一部附錄)，結(jié)果分別為．32%、0．27%、0．33%，平均值為．31%。

2．8 重金屬:取1、2、3 號樣粉末約2g，精密稱定，照(《中國藥典》2010年版一部附錄)，結(jié)果均未超過百萬分之一。

2．9 浸出物:取1、2、3號樣粉末約4g，精密稱定，照水溶性浸出物測定法項下的熱浸法(《中國藥典》2010年版一部附錄)測定，結(jié)果分別為．58%、12．88%、12．54%，平均值為．67%。

2．10 急性毒性試驗:對黑面神藥材的水煎濃縮液(13．34g生藥/ml)進行了小鼠急性毒性試驗。取18～22gSPF級ICR小鼠，雌雄各半，每組10只，共6組，以5．34g生藥/ml為最大給藥濃度，其余按1∶0．70等比稀釋，各組按40ml/kg灌胃給藥1次，觀察14天。根據(jù)小鼠中毒和死亡表現(xiàn)，按改進Bliss法程序計算，小鼠灌胃給予黑面神的LD50為123．87g生藥/kg，95%可信區(qū)間為．41 ～147．75g生藥/kg。中毒表現(xiàn)主要為活動減少、呼吸急促及死亡，死亡時間集中在給藥后48小時至72小時內(nèi)。死亡動物和觀察結(jié)束后處死的小鼠，肉眼觀察除肺部瘀血外，心、肝、脾、腎等各主要臟器色澤、形狀、大小等未見異常。

3 討論

3．1 水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物是評價藥材質(zhì)量的重要參數(shù)，因此制定相應(yīng)的限度是十分必要的。根據(jù)試驗結(jié)果，規(guī)定其水分不得過12．0%，總灰分不得過3．5%，酸不溶性灰分不得過1．0%，浸出物不得少于8．0%。重金屬結(jié)果均未超過百萬分之十，暫不在質(zhì)量標準中設(shè)置此項目。

3．2 試驗分別以水、乙醇、稀乙醇為溶劑，采用冷浸法及熱浸法測定本品浸出物的含量。結(jié)果表明，水浸出量高于乙醇和稀乙醇的浸出量，熱浸法浸出量高于冷浸法浸出量。因此，確定以水為溶劑，熱浸法測定本品浸出物的含量。

3．3 在急性毒性試驗中測出LD50為123．87g生藥/kg，顯示黑面神藥材在處方用藥范圍內(nèi)仍是安全的。

3．4 上述研究項目內(nèi)容全面，方法簡便快速，能有效控制傣藥材黑面神的質(zhì)量。

［1］林艷芳，依專，趙應(yīng)紅．中國傣醫(yī)藥彩色圖譜［M］．昆明:云南民族出版社，2003．643～646

［2］國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會．中華本草(傣藥卷)［M］．上海:上?？萍汲霭嫔?，2005．244 ～245