程 鵬 何先元,▲ 明拂曉 馮 婧
1.重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)管理中心,重慶 401331;2.重慶醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院,重慶 401331
人參、黨參、黃芪和枸杞子均為常用補(bǔ)益中藥,四者在心血管系統(tǒng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗應(yīng)激等方面有共同的藥理作用,臨床應(yīng)用廣泛,甚至在日常生活中人們也常用這些藥物進(jìn)行自我保健補(bǔ)益,而獲得了很好的療效,但關(guān)于四者抗應(yīng)激作用的比較卻未見文獻(xiàn)報(bào)道。為了更好的了解人參[1-2]、黨參[3-5]、黃芪[6-12]和枸杞子[13-14]等常用補(bǔ)虛中藥在抗應(yīng)激作用方面的區(qū)別,以期探討常用補(bǔ)虛中藥在臨床應(yīng)用過程中的差別運(yùn)用,為進(jìn)一步補(bǔ)虛中藥的抗應(yīng)激機(jī)制奠定基礎(chǔ),本實(shí)驗(yàn)采用低溫游泳實(shí)驗(yàn)和常壓缺氧實(shí)驗(yàn)比較了人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠抗應(yīng)激作用的影響。
昆明種健康小鼠由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(渝)2002-0001,雌性,體重(20±2)g,重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
人參、黨參、黃芪、枸杞子水煎液(按一般水煎液方法制備),每毫升相當(dāng)于原生藥2g。
小鼠游泳裝置:圓柱型不銹鋼盆(50cm×50cm,內(nèi)裝冰水混合物,水深40cm,水溫0℃);秒表;300mL磨口廣口瓶(凡士林密封)。
小鼠50只,體重(20±2)g,隨機(jī)分成5組,每組10只,劑量按0.4mL/10g灌胃給藥。見表1。
表1 實(shí)驗(yàn)分組例數(shù)及水煎液劑量
本方法是根據(jù)低溫實(shí)驗(yàn)和小鼠游泳實(shí)驗(yàn)兩種方法綜合得出的實(shí)驗(yàn)方法。各組給藥后第1小時(shí),在小鼠尾根部束體重5%的鉛絲,然后將小鼠放入不銹鋼盆(50cm×50cm,內(nèi)裝冰水混合物,水深40cm,水溫0℃),木棒敲打不銹鋼盆邊緣,刺激小鼠快速游動(dòng);記錄小鼠游泳開始至嗆水的時(shí)間。
將上述開始嗆水的小鼠轉(zhuǎn)移到300mL磨口廣口瓶中(每瓶一只),用凡士林密封瓶口后開始計(jì)時(shí),記錄小鼠從瓶口密封到小鼠死亡的時(shí)間。數(shù)據(jù)收集后用EXCEL計(jì)算具體時(shí)間。
所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0進(jìn)行方差分析,同時(shí)作F測(cè)驗(yàn)和采用字母標(biāo)記的新復(fù)極測(cè)驗(yàn)(SSR測(cè)驗(yàn))。
常用補(bǔ)虛藥人參、黨參、黃芪及枸杞子水煎液組與生理鹽水組經(jīng)方差分析,見表2,區(qū)組間F值<F0.05及F0.01值,說明實(shí)驗(yàn)個(gè)體之間的差異小于不同處理間的差異,本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果可信;處理間F值>F0.05及F0.01值,說明不同水煎液處理之間差異大于個(gè)體之間的差異,不同水煎液對(duì)小鼠低溫游泳時(shí)間具有不同的效應(yīng)。
表2 方差分析
對(duì)本實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,采用新復(fù)極差分析法,結(jié)果見表3,人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠低溫游泳與生理鹽水比較差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,人參水煎液與黃芪和枸杞子水煎液差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參、黃芪和枸杞子水煎液處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和人參水煎液處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參與枸杞子水煎液差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和人參水煎液與生理鹽水處理差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參、黃芪和枸杞子水煎液差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表3 新復(fù)極差分析
常用補(bǔ)虛藥人參、黨參、黃芪及枸杞子水煎液組與生理鹽水組經(jīng)方差分析,結(jié)果見表4,區(qū)組間F值<F0.05及F0.01值,說明實(shí)驗(yàn)個(gè)體之間的差異小于不同處理間的差異,本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果可信;處理間F值>F0.05及F0.01值,說明不同水煎液處理之間差異大于個(gè)體之間的差異,不同水煎液對(duì)小鼠耐缺氧時(shí)間具有不同的效應(yīng)。
表4 方差分析
對(duì)本實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較,采用新復(fù)極差分析法,結(jié)果見表5,人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠耐缺氧與生理鹽水比較差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,人參與黨參、黃芪和枸杞子水煎液處理,黨參與黃芪水煎液處理差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參和枸杞子、枸杞子和黃芪水煎液處理之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參與黨參、黃芪及枸杞子水煎液,黨參與黃芪水煎液處理差異存在極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,黨參與枸杞子、枸杞子與黃芪水煎液、黃芪水煎液與生理鹽水處理差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
表5 新復(fù)極差分析
中藥最常用是水煎劑,本研究通過常用補(bǔ)虛中藥人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液對(duì)小鼠在低溫下抗疲勞和耐缺氧實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明這幾味補(bǔ)虛中藥都能提高小鼠抗疲勞和耐缺氧能力,但是不同藥物之間存在明顯差異,人參對(duì)于提高小鼠耐缺氧能力作用顯著強(qiáng)于其他三味藥物,人參在抗疲勞方面也明顯強(qiáng)于黃芪和枸杞子,但是人參和黨參在抗疲勞方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;人參、黨參和黃芪屬于補(bǔ)氣類中藥,它們對(duì)心血管系統(tǒng)具有強(qiáng)心、調(diào)節(jié)血壓、抗休克、擴(kuò)張冠脈血流量、改善心肌血氧供應(yīng)、提高心肌抗缺氧能力,具有抗心肌缺血等藥理作用,這些藥理作用在小鼠受到很大的刺激時(shí),都能起到保護(hù)小鼠身體各個(gè)器官的作用,這些作用對(duì)于小鼠抗應(yīng)激能力的提高都有促進(jìn)作用,所以,能顯著提高小鼠抗疲勞和耐缺氧的能力;枸杞屬于補(bǔ)陰類藥物,盡管在抗疲勞和抗缺氧方面與人參差異存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是枸杞子水煎劑對(duì)小鼠具有顯著的抗缺氧抗疲勞的作用。
本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明人參、黨參、黃芪和枸杞子水煎液中含有豐富的生物活性物質(zhì),這些物質(zhì)能顯著提高小鼠的抗缺氧及抗疲勞作用,各個(gè)藥物之間其作用效果差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,對(duì)于臨床處方的指導(dǎo)意義在于藥物之間替代時(shí)配伍時(shí)需要通過劑量的調(diào)整達(dá)到預(yù)期的目的。
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