樊昕 韓悅 郄金鵬 姚美華 岳丹霞 孫衛(wèi)新 楊蓉婭

（北京軍區(qū)總醫(yī)院全軍皮膚損傷修復(fù)研究所，北京 100125）

重 組 類 人 膠 原 蛋 白 （recombinant human－like collagen）是一種應(yīng)用基因工程技術(shù)將膠原蛋白的mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后經(jīng)酶切修飾后重組，再經(jīng)過高密度發(fā)酵、分離、純化等工藝生產(chǎn)得到的新型膠原蛋白［1］。本研究旨在觀察健康人應(yīng)用重組類人膠原蛋白面膜后皮膚的改善情況，并應(yīng)用VISIA皮膚圖像分析儀和SOFT5．5皮膚性質(zhì)測(cè)試儀對(duì)治療前、后皮膚性質(zhì)進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 隨機(jī)選取2011年1月—2011年6月到我院激光美容中心進(jìn)行美容咨詢的女性40例，年齡18～49歲，平均31．8歲；Fitzpatrick皮膚分型為III～I(xiàn)V型；均簽署患者知情同意書。

1．2 研究方法

1．2．1 儀器和材料 VISIA皮膚圖像分析儀由美國Canfield科技公司生產(chǎn)；SOFT 5．5皮膚性質(zhì)測(cè)試儀由意大利Callegari科技公司生產(chǎn)。重組類人膠原蛋白面膜由西安巨子生物基因技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。

1．2．2 方法 用重組類人膠原蛋白面膜敷臉，1次／d，連續(xù)應(yīng)用1周后改為2次／周，共3周。分別于應(yīng)用即刻、1周和1個(gè)月后對(duì)入選者皮膚性質(zhì)進(jìn)行定量分析和評(píng)價(jià)。每次治療前均由同一醫(yī)師用同一相機(jī)、在同一光源、以同一角度對(duì)面部區(qū)域進(jìn)行攝影并存檔，同時(shí)采用VISIA皮膚圖像分析儀和SOFT5．5皮膚性質(zhì)測(cè)試儀檢測(cè)。

1．2．3 測(cè)試條件 室溫24℃，濕度40%～50%。測(cè)試者在測(cè)試前30min進(jìn)入測(cè)試環(huán)境中安靜待測(cè)。SOFT5．5皮膚性質(zhì)檢測(cè)儀主要檢測(cè)皮膚pH、水分、彈性和油脂。將檢測(cè)儀的探頭垂直地置于皮膚上，5～10s待測(cè)定值穩(wěn)定后讀取數(shù)值，取5次測(cè)定的平均值。VISIA皮膚圖像分析儀主要檢測(cè)皮膚色素斑、皺紋、紋理、毛孔和紫質(zhì)。首先清潔面部，15min后用VISIA皮膚圖像分析儀拍攝測(cè)試者面部圖像，分析區(qū)域盡量避免反光區(qū)域和頭發(fā)干擾。所有皮膚檢測(cè)均由同一醫(yī)師操作。

1．2．4 絕對(duì)分值（absolute scores）VISIA 皮膚圖像分析儀針對(duì)每名待測(cè)者自動(dòng)生成絕對(duì)分值。絕對(duì)分值代表出現(xiàn)在選定區(qū)域的皮膚特征檢測(cè)值的面積和強(qiáng)度，用于觀察皮膚性質(zhì)。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2．1 臨床評(píng)價(jià) 所有入組者均完成本次研究，應(yīng)用重組類人膠原蛋白面膜后，其面部皮膚狀態(tài)得到明顯改善，表現(xiàn)為細(xì)膩度及光澤度明顯增加，主觀感受皮膚滋潤并有飽滿感等，上述變化在應(yīng)用1周后更加明顯。

2．2 VISIA檢測(cè)結(jié)果 見表1。

2．3 SOFT5．5檢測(cè)結(jié)果 見表1。

表1 重組類人膠原蛋白作用前后VISIA數(shù)值與SOFT5．5數(shù)值結(jié)果（±s）

表1 重組類人膠原蛋白作用前后VISIA數(shù)值與SOFT5．5數(shù)值結(jié)果（±s）

注：1）與治療前比較P＜0．05；2）與治療前比較P＜0．01

項(xiàng)目 應(yīng)用前 應(yīng)用后即刻 應(yīng)用后1周 應(yīng)用后1個(gè)月VISIA 數(shù)值色素斑 42．76±16．47 36．31±13．27 38．01±18．13 43．18±15．36皺紋 49．01±18．27 26．12±11．401） 41．89±17．63 45．44±13．61紋理 58．24±17．08 40．38±13．821） 45．86±11．311） 54．73±13．78毛孔 65．32±14．37 66．25±15．98 62．04±13．76 60．11±18．23紫質(zhì) 48．27±16．61 16．65±7．162） 25．47±8．251） 30．19±11．301）SOFT5．5數(shù)值PH 5．42±0．83 4．78±0．51 5．01±0．19 5．8±0．64水分 48．59±15．92 88．15±10．622） 66．12±12．531） 57．72±16．73彈性 10．21±5．78 11．26±6．23 10．77±6．15 10．28±4．84油脂 42．17±18．61 19．14±10．582） 30．27±14．411）38．09±16．53

3 討 論

膠原蛋白是由甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸等19種氨基酸所組成的天然蛋白，其氨基酸組成和組織結(jié)構(gòu)與皮膚組織相同，因而其與皮膚的相容性和親和力好，并有很好的保濕和深層潔膚的功能，還可以補(bǔ)充皮膚中損失的膠原蛋白。目前，國內(nèi)外均已廣泛地將膠原蛋白應(yīng)用于燒傷、創(chuàng)傷修復(fù)、美容護(hù)理等諸多方面。但是其制備方法多為從動(dòng)物組織提取或人胎盤中提取，這種方法提取的膠原蛋白具有非水溶性、病毒傳染性、異體免疫排斥性及結(jié)構(gòu)弱加工賦型性等缺點(diǎn)，這極大地限制了其的開發(fā)利用［2］。近年來，國內(nèi)已有學(xué)者應(yīng)用基因工程技術(shù)合成了人源性膠原蛋白，并對(duì)其水溶性、免疫排異性、穩(wěn)定性、成膠性和吸收性等特性進(jìn)行了改進(jìn)［3－5］。但是對(duì)于重組類人膠原蛋白是否有助于改善女性的健康皮膚，目前尚無相關(guān)定量分析的報(bào)道。

本研究中，我們應(yīng)用的VISIA皮膚圖像分析儀通過1200萬像素的攝像頭，以白光、紫外光和橫截面偏振光3次3個(gè)角度成像，對(duì)皮膚進(jìn)行了精確的定量分析。我們的數(shù)據(jù)顯示，應(yīng)用重組類人膠原蛋白后，皮膚改變?cè)趹?yīng)用后即刻和應(yīng)用后1周最明顯，主要表現(xiàn)為皮膚紋理、質(zhì)地的改善，但是治療后1個(gè)月皮膚的改善以紫質(zhì)為主，這主要是因?yàn)轭惾四z原蛋白可以在短期內(nèi)明顯減少皮膚油脂的分泌，脂質(zhì)中的脂類和脂肪酸等物質(zhì)的減少使得偏振光下的光反應(yīng)明顯降低，其具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用類人膠原蛋白面膜的女性健康者皮膚性質(zhì)改變主要在應(yīng)用即刻和應(yīng)用后1周，表現(xiàn)為皮膚水分明顯增加、油脂降低和皺紋、紋理和紫質(zhì)的改善，說明類人膠原蛋白具有補(bǔ)充水分和調(diào)節(jié)油脂代謝的功能，并且可以維持較長時(shí)間。

總之，將重組類人膠原蛋白面膜應(yīng)用于女性健康者皮膚后，補(bǔ)充水分和調(diào)節(jié)油脂分泌的效果明顯。重組類人膠原蛋白面膜是較為安全有效的護(hù)膚產(chǎn)品。

［1］ Xue W，F(xiàn)an D，Shang L，et al．Effects of acetic acid and its assimilation in fed－batch cultures of recombinant Escherichia coli containing human－like collagen cDNA［J］．J Biosci Bioeng，2010，109（3）：257－261．

［2］ Zhang Z，Garron TM，Li XJ，et al．Recombinant human decorin inhibits TGF－beta1－induced contraction of collagen lattice by hypertrophic scar fibroblasts［J］．Burns，2009，35（4）：527－537．

［3］ Guo J，Luo Y，F(xiàn)an D，et al．Medium optimization based on the metabolic－flux spectrum of recombinant Escherichia coli for high expression of human－like collagen II［J］．Biotechnol Appl Biochem，2010，57（2）：55－62．

［4］ Ma X，F(xiàn)an D，Shang LA，et al．Oxygen transfer rate control in the production of human－like collagen by recombinant Escherichia coli［J］．Biotechnol Appl Biochem，2010，55（4）：169－174．

［5］ Liu W，Merrett K，Griffith M，et al．Recombinant human collagen for tissue engineered corneal substitutes［J］．Biomaterials，2008，29（9）：1147－1158．