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廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心功能的影響

2013-07-01 23:54:04李雙軍
中國醫(yī)藥指南 2013年13期
關(guān)鍵詞:原兒茶酸離體灌流

李雙軍

(內(nèi)蒙古赤峰市林西縣醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 025250)

廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心功能的影響

李雙軍

(內(nèi)蒙古赤峰市林西縣醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 025250)

目的主要研究廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心功能有何影響。方法取SD大鼠,開胸取出心臟后,置于Langendorff灌流裝置上用k-H液持續(xù)灌流,觀察心肌收縮力和心電圖,待穩(wěn)定后給藥,繼續(xù)觀察心電圖和心肌收縮力的變化,從而判斷是否該藥有效。結(jié)果發(fā)現(xiàn)原兒茶酸在不同濃度的情況下對心臟的心電及心肌收縮力有不同的影響。結(jié)論原兒茶酸對心臟有減慢心率和心肌收縮力的作用。

廣棗提取物原兒茶酸;離體心臟灌流;Langendorff法;大鼠;動(dòng)物

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物

廣棗葉提取物原兒茶酸,天然藥化教研室提供;戊巴比妥鈉(化學(xué)純),佛山市化工實(shí)驗(yàn)廠進(jìn)口分裝,批號:860901;Krebs-Henseleit (K-H)灌流液,由實(shí)驗(yàn)學(xué)生自行按比例配制。

1.1.2 動(dòng)物

SD大鼠40只,包頭醫(yī)學(xué)院動(dòng)物室提供,體質(zhì)量350~450g雌雄兼有。隨機(jī)分成5組,每組8只,雌雄各半,分別為空白組、陽性對照組(原兒茶酸:濃度為10-9~10-5)。

1.1.3 主要儀器

BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司);超級恒溫水?。ㄉ虾J性囼?yàn)儀器廠);離體灌流裝置;自動(dòng)抽注機(jī)ZCZ-50(浙江醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)儀器實(shí)驗(yàn)廠)。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

取SD大鼠隨機(jī)分為8組,每組雌雄各半,5只為一組,該組動(dòng)物則分別給不同濃度的廣棗葉提取物原兒茶酸。以心率及心肌收縮力為評價(jià)指標(biāo),觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。

1.2.2 langendorff離體心臟灌流模型的建立

取SD大鼠用3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉,仰臥固定于手術(shù)臺。獲取SD大鼠離體心臟后,將其連接于灌注裝置并通過逆行灌注的方法對離體心臟進(jìn)行灌注;進(jìn)行灌注時(shí),用用95%O2與5%CO2飽和的K-H液開始進(jìn)行灌流,灌流壓70cmH2O,溫度為(37.0±0.5)℃,pH(7.4±0.5)。灌流過程中要對灌注液成分進(jìn)行調(diào)整并保持灌注壓力、溫度和pH值的穩(wěn)定[1]。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測定

一直用飽和的K-H液進(jìn)行灌流,待穩(wěn)定后用容積導(dǎo)電法,觀察和記錄心率的變化。待心率穩(wěn)定后,從側(cè)管注入不同濃度的原兒茶酸,觀察心電圖的變化,直至出現(xiàn)心室纖顫停止給藥,記錄心電圖和心肌收縮力的變化。其中每種濃度的原兒茶酸要用8只鼠進(jìn)行驗(yàn)證,重復(fù)試驗(yàn)操作,觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用方差分析和t檢驗(yàn)(Excel表格計(jì)算)對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ—±s)表示,以單因素方差分析,各組與空白組間比較t檢驗(yàn)顯示差異性,P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 一般情況

藥物有使其心肌收縮力減小和心率減慢的作用,就認(rèn)為它具有抗心律失常說的作用。

2.2 廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心肌收縮力的影響(表1)

表1 廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心肌收縮力的影響(χ—±s,n=8)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,廣棗葉中提取物原兒茶酸各濃度均能夠降低心肌收縮力(P<0.01或P<0.05)。圖1。

圖1 廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心肌收縮力的影響

2.3 廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠離體正常心臟心率的影響(表2)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,廣棗葉中提取物原兒茶酸各濃度均能夠減慢心率(P<0.01或P<0.05)。

3 討 論

原兒茶酸在體內(nèi)的作用機(jī)制[1]:(1,2為原兒茶酸( protocatechui c acid,PAC),在兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶((COMT))的催化下原兒茶酸甲基化生成香草酸( vanillic acid,,VAC)[2]與兒茶酚胺類物質(zhì)的同為COMT底物[3],在代謝過程中可產(chǎn)生競爭性相互作用,所產(chǎn)生的影響可能隨機(jī)體狀態(tài)改變而不同。②在前期的藥效研究中發(fā)現(xiàn),據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[4,5],原兒茶酸在心臟中的甲基化代謝物香草酸可通過與輔酶A結(jié)合,部分隔離線粒體的輔酶A,一定程度上抑制脂肪酸氧化,從而優(yōu)化心肌能量代謝,保護(hù)心臟,該抑制作用與甲基化代謝密切相關(guān)[6]。

表2 廣棗葉提取物原兒茶酸對大鼠正常離體心臟心率的影響(χ—±s,n=8)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,乙醇提取乙酸乙酪萃取的廣棗提取物原兒茶酸有降低心率和減慢心肌收縮力的作用。心率(HeartRate)是用來描述心動(dòng)周期的專業(yè)術(shù)語,是指心臟每分鐘跳動(dòng)的次數(shù),以第一聲音為準(zhǔn),是速度指標(biāo),是評價(jià)心臟跳動(dòng)快慢的基本指標(biāo)。心肌收縮力是在一定程度上反映了心室肌張力的強(qiáng)度及心肌纖維收縮速率,受負(fù)荷影響較小,對收縮能力變化較敏感。綜上所述,廣棗葉提取物原兒茶酸主要通過降低心率,抑制心肌收縮力從而降低心肌耗氧量。

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R-33

B

1671-8194(2013)13-0075-02

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