郭曉麗
摘要:通過水培及15 g/L NaCl脅迫處理,分別對不同高粱材料ZJK2、河農(nóng)16和BT×623的發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù)以及苗期過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性進(jìn)行測定,探討鹽脅迫下不同高粱材料生理指標(biāo)的變化,進(jìn)而篩選出耐鹽能力較強(qiáng)的品種。結(jié)果表明,鹽脅迫條件下,不同高粱材料的發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù)均受到不同程度影響;苗期的過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶活性均出現(xiàn)不同程度的升高。綜合各項(xiàng)指標(biāo)分析得出3個材料中ZJK2耐鹽性最好,河農(nóng)16次之,BT×623最弱。
關(guān)鍵詞:高粱;鹽脅迫;生理指標(biāo)
中圖分類號:Q945.78 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)06-1260-03
土壤鹽堿化已經(jīng)成為一個全球性的問題,到目前為止,世界上約20%的耕地和約50%的灌溉地已經(jīng)受到鹽堿化的嚴(yán)重影響,并且每年鹽堿化和次鹽堿化的程度和廣度都在不斷加重,對作物的產(chǎn)量和質(zhì)量已經(jīng)造成嚴(yán)重的威脅[1]。為彌補(bǔ)傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的不足,解除鹽堿土壤對糧食生產(chǎn)的限制,國內(nèi)外農(nóng)業(yè)科技工作者進(jìn)行了深入的研究,形成了一種全新研究領(lǐng)域,并使得一種新型農(nóng)業(yè)——鹽堿農(nóng)業(yè)興起[2]。 這一領(lǐng)域包括農(nóng)作物耐鹽種質(zhì)資源的篩選、評價與創(chuàng)新[3]。在我國人口不斷增加、耕地面積日趨減少和淡水資源儲備不足的情況下,開發(fā)利用耐鹽植物資源、培育耐鹽作物、有效控制和利用鹽堿土,對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、糧食生產(chǎn)、生態(tài)環(huán)境等有重要意義。高粱在我國栽培歷史悠久,在國民經(jīng)濟(jì)中占有極其重要的地位,研究不同高粱材料對鹽脅迫的生理反應(yīng),有助于揭示植物適應(yīng)鹽堿生境的生理機(jī)制,同時選取耐鹽的高粱材料,對鹽堿化土地的開發(fā)和利用具有深遠(yuǎn)的社會意義。
目前對不同作物耐鹽品種的選取,在小麥、水稻等作物上研究較多,對高粱而言,采用萌發(fā)期和苗期相結(jié)合并通過測定抗氧化酶的方法來判定其耐鹽性研究相對較少。因此,通過水培及15 g/L NaCl溶液脅迫處理,在萌發(fā)期測定不同高粱材料發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù),在幼苗期測定過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性等綜合生理指標(biāo),探討鹽脅迫下高粱生理狀態(tài)的變化,進(jìn)而分析不同高粱材料抗鹽能力的強(qiáng)弱,以期為今后高粱品種的選育及利用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
3個供試高粱材料ZJK2、BT×623和河農(nóng)16種子由中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育研究所提供。
1.2 方法
挑選飽滿的高粱種子,每個品種為200粒。0.1%氯化汞消毒10 min。其中的100粒放于去離子水中作為對照,另外的100粒放于鋪有3層濾紙的培養(yǎng)皿中加15 g/L NaCl溶液處理。將高粱置于25 ℃的溫箱中并及時補(bǔ)充溶液,每處理3次重復(fù)。記錄每個材料對照組和試驗(yàn)組每天的發(fā)芽情況,直到不再新增發(fā)芽數(shù)。最后剪其幼葉稱其鮮重。根據(jù)以上數(shù)據(jù)計(jì)算其發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù)[4]。
發(fā)芽指數(shù)=∑Gt/Dt(Gt為相應(yīng)時間內(nèi)的發(fā)芽種子數(shù),Dt為相應(yīng)的的發(fā)芽時間)
種子活力指數(shù)=S×∑Gt/Dt(S為幼苗的平均鮮重,Gt為相應(yīng)時間內(nèi)的發(fā)芽種子數(shù),Dt為相應(yīng)的發(fā)芽時間)
發(fā)芽勢=(規(guī)定時間內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%
另取各個材料高粱種子100粒(30粒作為對照),水洗,浸種催芽,將長勢一致的種子移栽于紗網(wǎng)上并置于25 ℃的恒溫光照培養(yǎng)箱中,定期補(bǔ)充所蒸發(fā)的水分,光照時間14 h/d,光照度3 000 lx。待長到三葉一心時,用15 g/L NaCl溶液處理5 h,每處理3次重復(fù),分別取不同材料對照和處理的葉片,進(jìn)行過氧化物酶、過氧化氫酶和超氧化物歧化酶活性的測定[5]。
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
采用Excel 2003對測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 鹽脅迫下不同高粱材料的發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和種子活力指數(shù)
種子萌發(fā)是植物生活史中的一個關(guān)鍵階段,也是進(jìn)行抗鹽生理研究的重要時期[6]。3個不同高粱材料在15 g/L NaCl溶液脅迫下其發(fā)芽狀態(tài)呈現(xiàn)不同的特征。由表1可知,發(fā)芽勢BT×623最高,且NaCl溶液培養(yǎng)的種子發(fā)芽勢可達(dá)97%,高出水培1個百分點(diǎn),這可能是由于種子本身?xiàng)l件或者處理在某種程度上對種子有一定的促進(jìn)作用引起的;其次是河農(nóng)16;ZJK2的發(fā)芽勢最低,NaCl脅迫條件下僅為86%;從發(fā)芽指數(shù)來看,河農(nóng)16最高,脅迫條件下比BT×623高23.3;而從種子活力來看,雖然水培條件下ZJK2最低,但脅迫條件下卻比BT×623高0.26,說明ZJK2在高鹽條件下有較強(qiáng)的耐受能力。綜合以上分析可看出,3個不同高粱材料在萌發(fā)期表現(xiàn)出不同的特征,初步判斷其耐鹽性ZJK2最強(qiáng),河農(nóng)16居中,BT×623最弱。
2.2 鹽脅迫下不同高粱材料的過氧化物酶活性
過氧化物酶是植物細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的酶促防御系統(tǒng)的保護(hù)酶之一,它能催化過氧化氫及某些酚類的分解,有助于緩解因鹽漬而造成的超氧自由基和過氧化物對細(xì)胞膜的傷害。由圖1可知,在對照組中過氧化物酶活性ZJK2最低,河農(nóng)16居中,BT×623最高。經(jīng)鹽處理后3個高粱材料過氧化物酶的活性都有所提高,說明脅迫條件下高粱受到了不同程度的傷害,其中ZJK2的過氧化物酶活性增加最多,其他兩個材料的過氧化物酶活性增加相近。由此推測,3個高粱材料的耐鹽性ZJK2最強(qiáng),河農(nóng)16和BT×623較弱。
2.3 鹽脅迫下不同高粱材料的過氧化氫酶活性
過氧化氫酶大量分布于動植物細(xì)胞內(nèi),屬于活性氧清除劑,可分解機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的活性氧如過氧化氫、超氧自由基等。由圖2可看出,3個高粱材料與其對照組相比過氧化氫酶活性均有所上升,由各個材料對照組與處理組過氧化物酶活性的增加量可看出,ZJK2的過氧化氫酶活性在脅迫下增加幅度最為明顯,河農(nóng)16次之,BT×623增加相對較少,說明3個高粱材料對高鹽均有一定的耐受能力,其中ZJK2適應(yīng)能力最強(qiáng),河農(nóng)16次之,BT×623耐鹽性較弱。
2.4 鹽脅迫下不同高粱材料超氧化物歧化酶活性
超氧化物歧化酶是需氧生物細(xì)胞中普遍存在的一種酶,其與過氧化氫酶、過氧化物酶等酶類共同作用以防御活性氧以及其他自由基對細(xì)胞膜系統(tǒng)的傷害,從而減輕逆境對植物細(xì)胞的傷害。由圖3可知,3個高粱材料在鹽脅迫后SOD活性均有不同幅度的升高,其中河農(nóng)16增加的幅度最大,ZJK2和BT×623升高幅度相差不大,由SOD活性可推測河農(nóng)16的耐鹽性較強(qiáng),ZJK2和BT×623較弱。
3 討論
高粱為中度耐鹽作物,在我國具有豐富的種質(zhì)資源。對高梁種質(zhì)資源進(jìn)行耐鹽性評價,從中選出耐鹽種質(zhì)以供利用,對開發(fā)我國鹽堿地、擴(kuò)大高粱種植面積具有積極意義。高粱抗性主要表現(xiàn)為形態(tài)抗性、水分脅迫下的滲透調(diào)節(jié)和光合作用[7]。通過測定3種不同狀態(tài)下的單一指標(biāo)均無法全面判定高粱的抗逆性。因此,采用不同時期不同指標(biāo)的綜合測定,可全面把握不同高粱材料抗性的強(qiáng)弱,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供服務(wù)。
在眾多測定指標(biāo)中,通過萌發(fā)期鑒定耐鹽性可在相對短的時間內(nèi)對大量品種進(jìn)行評價,具有效率高、周期短、可操作性強(qiáng)等特點(diǎn),可用于多個高粱材料的耐鹽性初步鑒定[8]。同時結(jié)合苗期不同抗氧化酶類的測定,可綜合準(zhǔn)確地判斷高粱的耐鹽性強(qiáng)弱。研究通過鹽脅迫下不同高粱品種萌發(fā)期的發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、種子活力指數(shù)的測定及在幼苗期鹽脅迫下植物體內(nèi)過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶活性的綜合測定,判斷3個高粱材料的耐鹽性ZJK2最高,河農(nóng)16次之,BT×623最弱。
秦嶺等[9]在研究不同高粱品種萌發(fā)期耐鹽能力時的耐鹽半致死濃度為20.8 g/L。張華文等[10]研究甜高粱種子萌發(fā)耐鹽濃度約為5.0 g/L,耐鹽半致死濃度約為10.7 g/L。此次試驗(yàn)采用15 g/L NaCl溶液脅迫時高粱的發(fā)芽勢普遍較高,由此可見不同高粱材料對鹽脅迫有很大的差異。如何對多個高粱材料作出綜合準(zhǔn)確的抗逆性判斷,仍需要進(jìn)行深入探討。
參考文獻(xiàn):
[1] ZHU J K. Salt and drought stress signal transduetion in plants[J]. Ann Rev Plant Bio1, 2002,53:247-273.
[2] 郝軍武. 鹽堿環(huán)境與鹽堿農(nóng)業(yè)[J]. 地球科學(xué)進(jìn)展,2001,16(2):257-267.
[3] 遲春明,王志春,李 彬.混合鹽堿脅迫對帚用高粱萌發(fā)及苗期生長的影響[J].干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究,2008,26(4):148-151.
[4] 王征宏,楊 起,張亞冰.鹽脅迫下紫花苜蓿種子的萌發(fā)特性[J].河南科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2006,27(1):67-69.
[5] 王學(xué)奎.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].第二版,北京:高等教育出版社,2006.167-173.
[6] RANA G, KATERJI N. Evapotranspiration measurement for tall plant canopies: the sweet sorghum case[J]. Theoretical and Applied Climatology,1996,54:187-200.
[7] 趙建武,申惠勇,邱海杰.高粱抗逆性研究綜述[J].種子科技,2012(3):23-25.
[8] 閻志紅,劉文革,趙勝杰,等. NaCl脅迫對不同西瓜種質(zhì)資源發(fā)芽的影響[J].植物遺傳資源學(xué)報,2006,7(2):220-225.
[9] 秦 嶺,張華文,楊延兵,等.不同高粱品種種子萌發(fā)耐鹽能力評價[J].種子,2009,28(11):7-11.
[10] 張華文,秦 嶺,王海蓮,等.不同甜高粱品種(系)萌發(fā)期耐鹽性研究[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2011(9):24-26.