郭竑　謝良喜　張灝　陳躍

【摘 要】目的：檢測(cè)128例食管-胃交界腺癌標(biāo)本中Snail 蛋白的表達(dá)，分析與不同臨床病理特征的關(guān)系及其對(duì)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后的影響。方法：收集128例食管-胃交界腺癌標(biāo)本并隨訪；免疫組化檢測(cè)Snail 蛋白的表達(dá)情況并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：1.Snail的表達(dá)與食管-胃交界腺癌的分化程度、UICC分期密切相關(guān)，組織分化越低，臨床分期級(jí)別越高，Snail蛋白的表達(dá)越強(qiáng)（P﹤0.05 ）。2. Snail 蛋白陰性表達(dá)組總生存率明顯優(yōu)于陽(yáng)性表達(dá)組 （ P=0.004 ）。結(jié)論：Snail蛋白與食管-胃交界腺癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)；高表達(dá)者預(yù)后不良。

【關(guān)鍵詞】食管-胃交界腺癌；Snail蛋白；免疫組織化學(xué)；腫瘤轉(zhuǎn)移；預(yù)后

【中圖分類號(hào)】R735 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2013）06-0005-02

Snail調(diào)控的上皮細(xì)胞-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）被認(rèn)為與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[1]。目前在食管-胃交界腺癌中這方面的研究還未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用免疫組化法，檢測(cè)128例食管-胃交界腺癌樣本中Snail 蛋白的表達(dá)，分析與不同臨床病理特征的關(guān)系及其對(duì)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后的影響，探討Snail蛋白的表達(dá)作為食管-胃交界腺癌預(yù)后指標(biāo)的可行性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選取汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院2000年10月～2002年10月間的有完整隨訪資料128例食管-胃交界腺癌患者。每例均行根治術(shù)。男性106例，女性22例；年齡35～81歲，中位年齡60歲；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者78例，腫瘤最大徑>5cm者64例；臨床分期按照UICC的TNM分期：Ⅰ期6例、Ⅱ期29例、Ⅲ期59例、Ⅳ期34例。隨訪：128例患者中121例的臨床治療結(jié)果進(jìn)行了5年及以上的隨訪。

1.2 試劑及來(lái)源：一抗：Snail羊抗人多克隆抗體（美國(guó)Santa Cruz公司，編號(hào)E-18），稀釋度為1：100。羊抗兔（鼠）二抗、DAB顯色試劑盒均為北京中杉公司產(chǎn)品。

1.3 免疫組化Envision二步法：所有標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，將石蠟標(biāo)本行4?m連續(xù)切片，常規(guī)脫蠟水化，3%雙氧水消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，高壓熱修復(fù)后在切片上滴加一抗，4℃孵育過(guò)夜；再加入二抗，37℃孵育30min；DAB顯色，蘇木素輕度復(fù)染，透明，封片。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

3 討論

Snail誘導(dǎo)EMT過(guò)程中的上皮鈣粘著蛋白下調(diào)，從而導(dǎo)致上皮間連接的破壞。腫瘤細(xì)胞失去極性，轉(zhuǎn)化為有運(yùn)動(dòng)能力的間質(zhì)細(xì)胞，穿透基底膜并進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，播散種植到其它器官[2]。乳腺癌[3]、食管癌[4]等都存在著Snail的高表達(dá)。我們通過(guò)分析得出Snail蛋白的表達(dá)和食管-胃交界腺癌的組織分化程度密切相關(guān)（P=0.049），相關(guān)性分析呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。分化程度越低，Snail的陽(yáng)性表達(dá)越高。同時(shí)Snail蛋白的表達(dá)和食管-胃交界腺癌的臨床分期（P=001）亦密切相關(guān)，呈正相關(guān)關(guān)系。提示Snail蛋白越高表達(dá)，腫瘤的分化程度也越低，惡性程度越大，腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)越大，腫瘤患者預(yù)后越差。

我們?cè)谘芯苛薙nail蛋白的表達(dá)與治療后轉(zhuǎn)移情況之后發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)與治療后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，呈正相關(guān)關(guān)系（P=0.038）。說(shuō)明Snail蛋白的表達(dá)與食管-胃交界腺癌的轉(zhuǎn)移相關(guān)，Snail的高表達(dá)可能導(dǎo)致最初浸潤(rùn)的開始和正常組織形態(tài)學(xué)的破壞，提示Snail陽(yáng)性表達(dá)的食管-胃交界腺癌更易于浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

此外，通過(guò)對(duì)128名患者進(jìn)行的追蹤隨訪，我們發(fā)現(xiàn)Snail的陽(yáng)性表達(dá)者的生存率明顯低于陰性表達(dá)者（P=0.004）。進(jìn)一步表明Snail陽(yáng)性表達(dá)者預(yù)后不良，Snail的表達(dá)可以作為判斷影響食管-胃交界腺癌患者預(yù)后的指標(biāo)，通過(guò)檢測(cè)Snail蛋白的表達(dá)可作為判斷食管-胃交界腺癌預(yù)后的手段。

參考文獻(xiàn)：

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