劉平年

環(huán)氧大豆油是一種低毒高效的塑料助劑，廣泛應(yīng)用于和食品接觸的塑料產(chǎn)品的生產(chǎn)上。環(huán)氧大豆油在塑料中的添加量較高，最高可達(dá)40%，因而可通過遷移，浸出進(jìn)入到食品中，被人體攝入。

環(huán)氧大豆油是用精煉大豆油采用過氧化物處理而制得的一種化工產(chǎn)品。英文名為Epoxidized Soybean Oil（簡(jiǎn)寫為ESBO），分子量約為1000。常溫下為淺黃色粘稠油狀液體，流動(dòng)點(diǎn)-1℃，沸點(diǎn)150℃（0.5kPa），可溶烴類、酮類、酯類、高級(jí)醇等有機(jī)溶劑，微溶于乙醇，不溶于水。

ESBO具有良好的耐熱性、耐光性、互滲性及低溫柔韌性，且揮發(fā)度低，低毒，被廣泛用于食品包裝材料的增塑劑和穩(wěn)定劑，較多用于PVC的增塑劑，在食品包裝中主要用于玻璃罐頭食品的瓶蓋密封墊圈。

由于ESBO日益廣泛應(yīng)用，很多國家和地區(qū)對(duì)ESBO的使用在法規(guī)上進(jìn)行了規(guī)定，歐盟食品接觸塑料法規(guī)EU 10-2011中規(guī)定食品接觸材料中ESBO的遷移限量為60mg/kg，如果材料用于嬰兒食品包裝，遷移限量則降為30mg/kg，法規(guī)對(duì)ESBO的質(zhì)量也進(jìn)行了規(guī)定，其中碘值小于6，環(huán)氧乙烷的含量小于8%。

食品中ESBO主要來自包裝材料的遷移，各國對(duì)食品中ESBO含量并沒有做出限量的規(guī)定，按照歐洲的毒理試驗(yàn)結(jié)果，ESBO的TDI為1mg/kg·bw，但目前ESBO的暴露水平小于該TDI。

目前對(duì)ESBO的檢測(cè)主要為塑料中ESBO含量測(cè)試，和食品接觸塑料中ESBO遷移測(cè)試，食品中ESBO含量測(cè)試。衍生氣相色譜測(cè)定方法

根據(jù)ESBO的特性，可以通過檢測(cè)其中的環(huán)氧基團(tuán)來檢測(cè)ESBO。通過有機(jī)溶劑提取ESBO，進(jìn)行甲酯化或乙酯化之后檢測(cè)環(huán)氧脂肪酸的甲酯或乙酯。也有文獻(xiàn)報(bào)道為增強(qiáng)檢測(cè)效果，將酯化以后的環(huán)氧脂肪酸酯用環(huán)戊酮和三氟化硼乙醚溶液進(jìn)行衍生之后，檢測(cè)衍生產(chǎn)物環(huán)戊基環(huán)氧脂肪酸酯，以得到更好的分離效果和更具特征的標(biāo)記化合物，

根據(jù)研究，大豆油中的脂肪酸含有一定量的環(huán)氧油酸，所以環(huán)氧油酸不被作為EsBO的檢測(cè)標(biāo)記物，ESBO中的順式環(huán)氧亞油酸（18：2E）有兩個(gè)同分異構(gòu)體，根據(jù)報(bào)道的測(cè)定結(jié)果其中脂肪酸（18：2E）ME1在EESBO的甲酯化衍生物中有比較恒定的含量，為33%，所以可以用來作為標(biāo)記物對(duì)ESBO進(jìn)行定量，報(bào)導(dǎo)的氣相色譜分析方法采用（20：2E）的環(huán)氧脂肪酸來做為內(nèi)標(biāo)物。

Sandr Biedermann-Brem等利用GC-FID和GC/MS分析了油性食品中的ESBO，實(shí)驗(yàn)中采用的質(zhì)譜技術(shù)為E1，NCI和PCI，實(shí)驗(yàn)中分析了環(huán)氧亞油酸甲酯的色譜特征，比較了各種電離方式下環(huán)氧亞油酸甲酯的質(zhì)譜特征。其中GC-FID采用較長(zhǎng)的極性色譜柱來分離各種脂肪酸，F(xiàn)ID方法可用于簡(jiǎn)單樣品的分析，對(duì)于油性食品，檢出限為20mg/kg。GC/MS測(cè)試中采用了非極性的柱子，并能測(cè)定到較低的檢出限。

Koni Grob等建立了液相色譜和氣相色譜在線聯(lián)用的方法來檢測(cè)食品中的ESBO，利用正向的液相色譜分離脂肪酸甲酯，通過閥切換將（18：2E）ME1和內(nèi)標(biāo)（20：2E）ME1注入到氣相色譜中，通過FID檢測(cè)相應(yīng)脂肪酸甲酯來測(cè)定ESBO的含量。正相的液相色譜可以除去基質(zhì)中大量的脂肪酸甲酯，提取目標(biāo)標(biāo)記物的脂肪酸甲酯進(jìn)GC分析，減少樣品量過載對(duì)氣相色譜檢測(cè)系統(tǒng)的影響。此方法需要配置特殊的LC-GC-FID聯(lián)用系統(tǒng)，較難推廣

提取

對(duì)于塑料樣品，有報(bào)道采用四氫呋喃提取PVC中的ESBO，沉淀PVC后的溶液用于檢測(cè)。對(duì)于食品，采用正己烷，二氯甲烷等提取。對(duì)于油類樣品，可直接用正己烷稀釋。

直接測(cè)定方法LC/MS/MS法

食品經(jīng)二氯甲烷提取，濃縮后乙腈溶解，注入LC/MS/MS來測(cè)定，通過采集環(huán)氧脂肪酸甘油酯母離子和他們的子離子來確認(rèn)ESBO的量，定量采用標(biāo)準(zhǔn)加入法。

紅外光譜用于塑料中ESBO含量的測(cè)定

塑料樣品四氫呋喃提取之后，沉淀PVC，用FTIR測(cè)定提取物，檢出PVC中ESBO的含量為0.2%～35.2%。

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法

本實(shí)驗(yàn)室采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的方法，進(jìn)行食品接觸塑料中ESBO的遷移測(cè)試，參考法規(guī)BS EN 13130-1中推薦的食品接觸材料特定遷移指南，采用的遷移液為水，3%乙酸，50%乙醇和橄欖油。

對(duì)于水性食品（水，3%乙酸，50%乙醇遷移溶液）用正己烷提取后濃縮至干加甲醇?xì)溲趸浫芤杭柞セ?，氣相色譜質(zhì)譜法檢測(cè)，定量采用外標(biāo)法，測(cè)試中采用環(huán)氧亞油酸甲酯（18：2E）ME1作為標(biāo)記化合物。

由于橄欖油經(jīng)衍生后含大量脂肪酸甲酯，導(dǎo)致GC分析時(shí)化合物的保留時(shí)間改變，需要采用橄欖油配置標(biāo)準(zhǔn)曲線，用樣品衍生的方法衍生這一標(biāo)準(zhǔn)品序列，用這個(gè)方法制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以使樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間保持一致，便于判斷。

在甲酯化的基礎(chǔ)上，可以采用環(huán)戊酮和三氟化硼乙醚溶液衍生的方法得到更好的分離效果和檢測(cè)結(jié)果。

具體流程為：將甲酯化后的正己烷層轉(zhuǎn)移至離心管中，氦吹溶劑至干，加入2mL異辛烷，1mL環(huán)戊酮，0.5mL三氟化硼乙醚，渦旋30s。加入2mL氯化鈉溶液終止衍生反應(yīng)，在4000rpm/離心3min，轉(zhuǎn)移異辛烷層至5mL容量瓶，定容用于GC分析。

目前實(shí)驗(yàn)室采用上述方法的檢出限為水性食品模擬液（水，3%乙酸，50%乙醇）為2mg/kg，油性食品模擬物（橄欖油）為20mg/kg。