廖冰君

為了達(dá)到日常推薦的維生素需求量，健康均衡的飲食是必不可少的。在動(dòng)植物類食品中都含有維生素。因?yàn)槿梭w無(wú)法合成大多數(shù)必需的有機(jī)化合物，維生素的攝取便成為了一件極其重要的事情。維生素有助于增強(qiáng)人的免疫系統(tǒng)，能夠幫助人體吸收其他營(yíng)養(yǎng)物并排毒。同時(shí)它們可以作為酶類，降低心臟病的發(fā)病率。此外，維生素對(duì)于能量的產(chǎn)生起著至關(guān)重要的作用，它本身就能參與許多代謝途徑。缺乏維生素，會(huì)對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生不利影響。德國(guó)營(yíng)養(yǎng)協(xié)會(huì)（DGE）建議每日食用5種不同的果蔬以預(yù)防維生素缺乏。維生素的歷史

“維生素”一詞來(lái)源于拉丁文“Vita”及生物化學(xué)術(shù)語(yǔ)“Amine”，表明這些物質(zhì)方面使生命具備活力，另方面又具有氮化物和某種化學(xué)結(jié)構(gòu)特征。最初，這個(gè)名字是由波蘭的生物化學(xué)家CasimirFunk于1910年提出，他假設(shè)所有的維生素里都包含了氨基。這個(gè)假設(shè)最后被證明是錯(cuò)誤的，但是這個(gè)名字沿用了下來(lái)。維生素被分為了兩個(gè)基本類別：脂溶性維生素和水溶性維生素。脂溶性維生素能夠儲(chǔ)存在人體中，原則上不需要定期攝入，因?yàn)楫?dāng)身體儲(chǔ)存過(guò)量，有可能會(huì)導(dǎo)致一些健康問(wèn)題。水溶性維生素，通常不會(huì)儲(chǔ)存在身體里，而是隨著尿液排出體外。因此，有規(guī)律地?cái)z入水溶性維生素是非常必要的。維生素B₁₂是唯一一個(gè)能儲(chǔ)存在身體里特別是肝臟中的水溶性維生素。至今為止，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了13種維生素。有4種是脂溶性維生素（維生素A，維生素D，維生素E和維生素K），其余9種是水溶性維生素（B族維生素和維生素C），維生素的生物活性取決于它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。推薦維生素?cái)z入量使用的是國(guó)際通用的計(jì)量單位。一些維生素在食物中的含量非常少，因?yàn)檫@些維生素對(duì)于光和熱都極其敏感，并且不能暴露在氧氣中，因此對(duì)它們的生產(chǎn)和儲(chǔ)存都有特殊要求。

維生素是必不可少的。大部分已知的維生素都是在1925～1940年間發(fā)現(xiàn)的?，F(xiàn)在水果、蔬菜、肝臟、腎臟和酵母已經(jīng)被認(rèn)定為是維生素的重要攝入源。

維生素缺乏癥

維生素缺乏癥和與其相關(guān)的疾病，主要存在于些特定風(fēng)險(xiǎn)人群中。老年人是風(fēng)險(xiǎn)人群之，因?yàn)殡S著年齡的增長(zhǎng)，維生素的吸收能力在減弱，老年人缺乏維生素通常會(huì)引起食欲降低和營(yíng)養(yǎng)不良。孕婦同樣存在缺乏維生素的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于孕婦，專家給出的建議是食用葉酸補(bǔ)充品，特別是在懷孕的妊娠早期和中期，可以減少胚胎在發(fā)育中的神經(jīng)管缺陷和大腦缺陷。在德國(guó)，聯(lián)邦危機(jī)評(píng)估研究所（BfR）提出，至少在懷孕的4周前，除去日常飲食中攝入的葉酸，孕婦每天需要補(bǔ)充攝取400mg葉酸。德國(guó)營(yíng)養(yǎng)協(xié)會(huì)甚至建議在懷孕期間，至少要保證600mg/日的葉酸攝入量。為了降低葉酸不足的風(fēng)險(xiǎn)，可以在面粉中添加葉酸。從1998年1月起，美國(guó)已經(jīng)在谷類、大米和面食品中添加強(qiáng)化葉酸（1.4mg/kg），加拿大也使用了同樣的策略。匈牙利，智利和瑞士也通過(guò)了對(duì)面粉的配方強(qiáng)化（3mg/Kg）。自2009年起，澳大利亞的衛(wèi)生醫(yī)療當(dāng)局把面粉中的葉酸含量提升到了1.35mg/Kg。如今在德國(guó)，葉酸已經(jīng)被廣泛地添加在了各種不同的食品里。這些被強(qiáng)化了的產(chǎn)品普遍為食品和飲料，比如維生素飲料、牛奶制品、谷物早餐、面包和鹽等。然而，德國(guó)的公共衛(wèi)生部門并沒有采取措施增加葉酸在面粉中的含量，因?yàn)檫@也許會(huì)造成過(guò)量攝入葉酸而導(dǎo)致潛在的風(fēng)險(xiǎn)。

出于預(yù)防的目的，食品和飲料通常都會(huì)特別添加營(yíng)養(yǎng)維生素，以避免維生素不足的可能。制造維生素有3種不同的方式：通過(guò)化學(xué)方式合成：發(fā)酵；或是從動(dòng)植物原料中分離出來(lái)?，F(xiàn)今出售的大部分維生素都是通過(guò)化學(xué)方式合成生產(chǎn)的。在不同的生產(chǎn)程序和化學(xué)合成中，化學(xué)穩(wěn)定性在維生素的制造中是十分重要的因素。噴霧干燥法無(wú)疑是生產(chǎn)維生素產(chǎn)品中最受歡迎的制作方法。然而，什么才是檢測(cè)這些食品中維生素含量的最佳方法呢？檢測(cè)產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)明的維生素含量是否準(zhǔn)確是十分重要的事情。維生素分析

用傳統(tǒng)的分析方法確定維生素在產(chǎn)品中的含量是十分困難的。實(shí)際上，葉酸、維生素B₁₂和生物素在食品中的濃度是很低的。使用HPLC高效液相色譜法和其他傳統(tǒng)的物理化學(xué)方法來(lái)檢測(cè)維生素濃度的方法，都受到了定的限制。

使用免疫親和柱（IAC）則能排除以上問(wèn)題，因?yàn)闃悠分械木S生素在被分析以前，就已經(jīng)和干擾物質(zhì)分離并且得到了凈化。免疫親和柱是建立在高特異性抗體和抗原反應(yīng)的基礎(chǔ)上的。

樣品通過(guò)免疫親和柱時(shí)，維生素被捕獲在親和柱上，其他成分都會(huì)被洗掉。最后，通過(guò)洗脫液將親和柱上的維生素洗脫掉，隨即可用HPLC來(lái)對(duì)收集的溶液進(jìn)行檢測(cè)。R-Biopharm德國(guó)拜發(fā)公司為檢測(cè)維生素B₁₂、葉酸和生物素提供EASI-EXTRACT^?系列免疫親和柱。免疫親和柱的優(yōu)勢(shì)

·提取并濃縮樣品中的維生素；

·洗脫色素，除去干擾物：

·高靈敏度：

·降低了HPLC的維護(hù)費(fèi)用：

·實(shí)驗(yàn)已通過(guò)來(lái)源于美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院（NIST）和歐洲標(biāo)準(zhǔn)局（IRMM）的參考物質(zhì)的驗(yàn)證：

·適用范圍廣且通過(guò)驗(yàn)證。微生物分析法

微生物分析法是維生素檢測(cè)中的常見方法。在這些檢測(cè)中，微生物的生長(zhǎng)與目標(biāo)維生素正相關(guān)。在器皿中加入樣品及不含目標(biāo)維生素的培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)孵育后，如果樣品含有目標(biāo)維生素，純凈的培養(yǎng)基將變得渾濁?？赏ㄟ^(guò)測(cè)量濁度及標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣品中目標(biāo)維生素的含量。為此，R-Biopharm德國(guó)拜發(fā)公司研發(fā)出了VitaFast^?微生物法維生素快速檢測(cè)試劑盒。VitaFast^?維生素快速檢測(cè)試劑盒中的微孔板包被了對(duì)目標(biāo)維生素敏感的微生物。這免除了培養(yǎng)基準(zhǔn)備以及微生物接種的步驟。試劑盒可根據(jù)不同微生物的特殊要求來(lái)設(shè)置微孔板的微生物數(shù)量。

檢測(cè)時(shí)在微孔板中加入培養(yǎng)基及樣品。在培養(yǎng)箱中孵育后，使用酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù)。

表1為使用葉酸免疫親和柱與傳統(tǒng)生物分析法的結(jié)果對(duì)比。從表1可以看出，免疫親和色譜法與傳統(tǒng)的微生物法（MBA）得出的結(jié)果有著高度的致，并且與標(biāo)注的維生素含量也相當(dāng)。這表明EASI EXTRACT。免疫親和柱在檢測(cè)不同食物中的維生素時(shí)具有高靈敏度。

表2是在檢測(cè)在制造和儲(chǔ)存的過(guò)程中，酸奶和酸奶制品里的維生素分析結(jié)果。檢測(cè)出了含有水果配料的酸奶在3周的儲(chǔ)存后所含有的維生素。關(guān)于原味道哦和混合酸奶的產(chǎn)品，使用VitaFast^?維生素快速檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的結(jié)果與預(yù)計(jì)的維生素含量高度一致，經(jīng)過(guò)了5個(gè)星期的儲(chǔ)存，在4-8℃的條件下也很好的保持了穩(wěn)定性。除了酸奶制品以外，其他食品、飼料以及醫(yī)藥產(chǎn)品也同樣能使用VitaFast^?維生素快速檢測(cè)試劑盒來(lái)進(jìn)行分析。VitaFast^?維生素快速檢測(cè)試劑盒使用了通過(guò)驗(yàn)證的參考物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。

此種方法也已通過(guò)了多個(gè)官方實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)測(cè)試。VitsFast^?微生物分析法維生素快速檢測(cè)試劑盒的優(yōu)勢(shì)

·每個(gè)試劑盒都可做96次檢測(cè)（可拆分3次）；

·符合官方準(zhǔn)則：德國(guó)食品飼料法案第46章，AOAC；

·AOAC-RI認(rèn)證（部分試劑盒）；

·不需要洗滌；

·結(jié)果準(zhǔn)確性高；

·CV<10%；

·回收率95%--105%；

·適用于檢測(cè)所有水溶性B族維生素或人工添加的維生素含量；

·可使用一次性無(wú)菌實(shí)驗(yàn)器皿；

·VitaFast^?系列產(chǎn)品為大規(guī)模穩(wěn)定生產(chǎn)的成熟產(chǎn)品；

·依據(jù)不同的目標(biāo)檢測(cè)維生素，結(jié)果可在44-48小時(shí)（20-48/小時(shí)）內(nèi)出。

ELISA酶聯(lián)免疫法維生素分析

酶聯(lián)免疫法（ELISA）是另外一種使用于分析維生素的方法。ELISA測(cè)試采用了一種特異的抗體，它能結(jié)合目標(biāo)抗原，在這里指的是目標(biāo)檢測(cè)的維生素。通過(guò)酶標(biāo)抗體結(jié)合抗原，反應(yīng)后的產(chǎn)物被標(biāo)記上了顏色。RIDASCREEN^?FASTVitamin B₁₂維生素B₁₂快速檢測(cè)試劑盒，RIDASCREEN^?FAST Folic Acid葉酸快速檢測(cè)試劑盒，以及RIDASCREEN^?Biotin維生素B₇快速檢測(cè)試劑盒已經(jīng)在幾年前被引進(jìn)使用。這幾種極具競(jìng)爭(zhēng)力的酶聯(lián)免疫法使得添加維生素的檢測(cè)方法變得簡(jiǎn)易快速，它們適用于生產(chǎn)過(guò)程控制。

表3為維生素檢測(cè)產(chǎn)品。總結(jié)

正是有了這些使用范圍廣泛的維生素檢測(cè)方法做支撐，R-Biopharm德國(guó)拜發(fā)公司就能依據(jù)不同情況，向客戶提供各種獨(dú)特的解決方案。