李炳　曾云軍　陳韓英　谷新利

摘要：試驗比較了中藥復(fù)方理囊散揮發(fā)油提取物、乙醇提取物、水提取物對21日齡雌性昆明種小鼠子宮系數(shù)和卵巢卵泡發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，理囊散乙醇提取物組、揮發(fā)油提取物組小鼠的子宮系數(shù)及大型卵泡的百分比與空白組小鼠相比差異顯著（P<0.05），理囊散水提取物組與空白組相比差異不顯著（P>0.05）。表明乙醇提取物是中藥復(fù)方理囊散中起主要作用的成分，揮發(fā)油提取物次之。

關(guān)鍵詞：理囊散；提取物；小鼠；子宮系數(shù)；卵泡發(fā)育

中圖分類號：S859.79+3 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）09-2104-03

中藥復(fù)方理囊散由香附子、女貞子、益智仁等10余味中藥組成，主要用于治療卵巢囊腫和排卵延遲等原因造成的奶牛不孕癥。臨床應(yīng)用證明該復(fù)方促孕效果顯著[1]，副作用小[2]。但作為純中藥散劑，理囊散用藥量大，灌服困難，藥材利用率低，有效成分不明確，不利于質(zhì)量控制和推廣應(yīng)用。

本試驗中，通過觀察小鼠子宮系數(shù)和卵巢的變化，比較中藥復(fù)方理囊散揮發(fā)油提取物、乙醇提取物、水提取物的作用效果，旨在為篩選出理囊散的主要活性成分及研制新劑型提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

昆明種21日齡雌性小鼠220只（由石河子大學(xué)實驗動物中心提供，分籠飼養(yǎng)，自由飲水和進食）。

1.2 藥物與試劑

理囊散揮發(fā)油提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；理囊散乙醇提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；理囊散水提取物（自制，每毫升含生藥1.00 g）；苯甲酸雌二醇注射液（上海通用藥業(yè)股份有限公司，每支1 mL，含雌二醇2 mg，批號：110514）；蒸餾水（自制）。

1.3 儀器

1.4 方法

1.4.1 理囊散不同提取物對小鼠子宮系數(shù)的影響試驗 取21日齡健康雌性昆明種小鼠，體重9～12 g，隨機分為揮發(fā)油提取物組、乙醇提取物組、水提取物組，每組各設(shè)高、中、低劑量組（劑量分別為6、4、2 g/kg），同時設(shè)空白對照組及雌二醇陽性對照組。空白對照組灌服等體積蒸餾水；陽性對照組前3 d灌服等體積蒸餾水，從第四天開始每天腹腔注射雌二醇0.5 mg/kg，連續(xù)給藥7 d。其他各組按不同劑量灌服給藥，每天1次，連續(xù)給藥7 d。各組小鼠于末次給藥后24 h頸椎脫臼處死，剖開腹腔，摘取子宮，除去脂肪組織迅速稱子宮濕重，并計算子宮系數(shù)（子宮系數(shù)=子宮濕重/體重×100%）[3，4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 理囊散不同提取物對小鼠子宮系數(shù)的影響

2.2 理囊散不同提取物對小鼠卵巢的影響

理囊散不同提取物對小鼠卵巢的影響結(jié)果見表2。由表2可見，理囊散乙醇提取物在促進小鼠卵泡增長發(fā)育方面效果最好，其次是揮發(fā)油提取物，最后是水提取物。乙醇提取物組、揮發(fā)油提取物組與空白對照組相比，其大型卵泡的百分比差異顯著（P<0.05），且乙醇提取物組優(yōu)于揮發(fā)油提取物組；水提取物組與空白對照組相比其大型卵泡的百分比沒有顯著差異（P>0.05）。進一步表明理囊散中起主要作用的是乙醇提取物，其次是揮發(fā)油提取物。

3 小結(jié)與討論

采用小鼠子宮增重法檢測藥物的雌激素活性作為一種最常用的評價雌激素作用的方法，它具有經(jīng)濟、方便、省時、靈敏度高等優(yōu)點，某些需要在體內(nèi)代謝、活化才有雌激素活性的物質(zhì)和中間代謝產(chǎn)物也可用該方法檢測[7-9]。其主要原理是子宮含有大量的雌激素受體，雌激素或具有雌激素活性的化合物通過與該受體結(jié)合，可誘發(fā)細胞內(nèi)反應(yīng)，表現(xiàn)為子宮組織增生[10]。為了減少內(nèi)源性雌激素對試驗結(jié)果的影響，本試驗選用了剛剛斷乳、未性成熟的21日齡雌性小鼠。試驗結(jié)果表明，雌性小鼠灌服理囊散乙醇提取物后，其子宮系數(shù)明顯增加，理囊散揮發(fā)油提取物作用效果次之，提示理囊散乙醇提取物和理囊散揮發(fā)油提取物有明顯促進小鼠子宮生長的作用。卵泡成熟的程度是衡量卵巢發(fā)育的重要依據(jù)之一[11]，本試驗中小鼠卵巢的變化結(jié)果顯示，理囊散乙醇提取物組小鼠成熟卵泡所占的比例最高、卵泡直徑大，與空白對照組相比差異顯著（P<0.05），其次是揮發(fā)油提取物組，水提取物組成熟卵泡的比例與空白對照組相比沒有顯著差異（P>0.05）。說明理囊散乙醇提取物、揮發(fā)油提取物能促進小鼠卵巢發(fā)育并出現(xiàn)排卵，促使性成熟形態(tài)學(xué)特征提前出現(xiàn)，啟動新的發(fā)情周期。

本試驗通過測定理囊散不同提取物對小鼠子宮系數(shù)和卵泡發(fā)育的影響，確定了中藥復(fù)方理囊散中起主要作用的是乙醇提取物，揮發(fā)油提取物次之。該結(jié)果對改革傳統(tǒng)中藥制備工藝，實現(xiàn)中獸藥安全、穩(wěn)定、高效、可控的質(zhì)量要求提供了理論支持。但理囊散乙醇提取物、揮發(fā)油提取物都是一種粗提物，其具體有效成分和起主要作用的有效成分尚不明確，還需對其分離純化后進行更進一步的研究。

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