周玉文, 曹雪濱

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力竭大鼠血清睪酮、皮質(zhì)醇的變化及對(duì)心臟的可能影響

周玉文, 曹雪濱*

（解放軍第252醫(yī)院心內(nèi)科, 保定 071000）

力竭性心臟損傷; 睪酮; 皮質(zhì)醇; 大鼠

力竭性運(yùn)動(dòng)損傷多見(jiàn)于軍人及運(yùn)動(dòng)員，心臟損傷尤為常見(jiàn)。與力竭性心臟損傷可能相關(guān)的機(jī)制是多方面的，其機(jī)體生理病理變化亦是包括諸多方面，其中包括內(nèi)分泌的改變，如腎上腺素、睪酮和皮質(zhì)醇等。有研究表明睪酮具有保護(hù)心臟的作用，而不恰當(dāng)升高的皮質(zhì)醇則可導(dǎo)致心臟損傷。本文旨在通過(guò)大鼠力竭性游泳試驗(yàn)，研究大鼠血清睪酮、皮質(zhì)醇的變化及其對(duì)心臟的可能保護(hù)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇清潔級(jí)Sprague-Dawley（SD）雄性大鼠20只，體質(zhì)量（180±10）g，購(gòu)于軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心，許可證號(hào)：SCXK-（軍）2007-004。

1.2 主要儀器、藥品及試劑

XH-6080r放射免疫計(jì)數(shù)器由西安核儀器廠生產(chǎn)；貝克曼DXI800全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀由美國(guó)貝克曼公司生產(chǎn)；碘[125I]皮質(zhì)醇放射免疫分析藥盒由同濟(jì)大學(xué)上海放射免疫分析技術(shù)研究有限公司生產(chǎn)；睪酮測(cè)定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）由貝克曼庫(kù)爾特有限公司生產(chǎn)。肌酸激酶MB同工酶（creatine kinase isoenzymes MB，CK-MB）檢測(cè)試劑盒由寧波瑞源生物科技有限公司生產(chǎn)；心肌肌鈣蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）檢測(cè)試劑（膠體金法）由瑞萊生物工程（深圳）有限公司生產(chǎn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

20只健康雄性SD大鼠購(gòu)進(jìn)后，自由飲食，自然光照，動(dòng)物室溫度（23±2）℃，分籠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后用于實(shí)驗(yàn)。20只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩組：安靜對(duì)照組（C組）、力竭運(yùn)動(dòng)組（E組），每組各10只。

1.4 模型制備

于試驗(yàn)第4天，C組麻醉大鼠留取血液標(biāo)本；于試驗(yàn)第1，2，3天，E組分別給予15，30，40min無(wú)負(fù)重適應(yīng)性游泳訓(xùn)練，第4天給予尾巴根部墜體重2%鉛塊進(jìn)行一次性力竭游泳，力竭性游泳后即刻麻醉大鼠，并留取血液標(biāo)本；本試驗(yàn)采用高120cm、直徑70cm的塑料圓桶作為大鼠游泳槽，水深70cm以上，水溫（33±2）℃。力竭標(biāo)準(zhǔn)采用Thomas標(biāo)準(zhǔn)“經(jīng)過(guò)10s后動(dòng)物仍不能返回水面”，或大鼠游泳乏力動(dòng)作失去協(xié)調(diào)，取出仰臥平放地上大鼠無(wú)力翻轉(zhuǎn)，或大鼠無(wú)力抓握網(wǎng)格樣漏勺使身體完全露出水面。凡在4h內(nèi)迅速力竭者，給予去除尾部負(fù)重，或把大鼠取出后放于平地讓其休息3min后，繼續(xù)進(jìn)行力竭游泳直至再次力竭。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

C組或E組一次性力竭游泳后即刻給予10%水合氯醛0.35～0.40ml/100g麻醉，經(jīng)腹部下腔靜脈取血，經(jīng)過(guò)37℃水浴30min，進(jìn)行2500～3000r/min離心10min，分離血清并置于-20℃冰箱保存。以化學(xué)發(fā)光法、免疫分析PR-法檢測(cè)血清中的睪酮和皮質(zhì)醇的含量；以膠體金法檢測(cè)cTnI含量；以日立7600-020生化分析儀檢測(cè)CK-MB活性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用單因素方差分析。＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

表1結(jié)果表明，E組與C組比較血清cTnI含量、CK-MB活性明顯升高，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05，＜0.01），提示力竭性運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致心肌損傷。C組大鼠血清皮質(zhì)醇含量顯著小于E組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.01），提示力竭運(yùn)動(dòng)可顯著性升高大鼠血清皮質(zhì)醇水平。C組大鼠血清睪酮含量顯著大于E組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.01），提示力竭運(yùn)動(dòng)顯著性降低大鼠血清睪酮水平。

表1 兩組大鼠血清皮質(zhì)醇、睪酮、cTnI和CK-MB的比較

Group C: control group; group E: exhaustive group; cTnI: cardiac troponin I; CK-MB: creatine kinase isoenzymes MB. Compared with group C,*＜0.05,**＜0.01

3 討 論

力竭性運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致心臟損傷[2]。力竭性運(yùn)動(dòng)對(duì)血清睪酮、皮質(zhì)醇有一定影響，可能參與力竭性心臟損傷。

睪酮可以通過(guò)對(duì)L型鈣離子通道和T型鈣離子通道的阻滯作用，減少鈣超載、心律失常及心肌細(xì)胞凋亡的發(fā)生[3]；心肌中存在睪酮受體，睪酮可以直接作用于心肌改善心肌缺血[4]，睪酮還可以通過(guò)cGMP途徑激活大電導(dǎo)鈣激活鉀通道保持動(dòng)脈平滑肌靜息電位[5]，與鈣離子通道阻滯的機(jī)制協(xié)同舒張冠狀動(dòng)脈[3]改善心肌缺血。睪酮水平的升高，可上調(diào)β2腎上腺素能受體和鈣調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)[6]，提高細(xì)胞內(nèi)鈣瞬變的幅度，使心肌的收縮力增加、舒張加快。

糖皮質(zhì)激素可導(dǎo)致心臟氧化應(yīng)激損傷、心肌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)高血壓發(fā)生以及降低左室射血分?jǐn)?shù)[7]；降低主動(dòng)脈內(nèi)皮一氧化氮合酶水平，損傷血管內(nèi)皮功能；增加心肌細(xì)胞的L型鈣離子電流[8]；研究表明，急性心肌梗死早期糖皮質(zhì)激素血清水平升高為心肌重構(gòu)的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[9]。并且在健康人群中糖皮質(zhì)激素血清水平與高敏肌鈣蛋白T血清含量密切相關(guān)[10]。

綜上所述，力竭性運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致大鼠心臟損傷，而血清睪酮水平降低、血清皮質(zhì)醇水平升高,可能參與了力竭性心臟損傷。

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（編輯: 周宇紅）

R541.9

A

10.3724/SP.J.1264.2013.00171

2013?07?16;

2013?08?19

軍隊(duì)中醫(yī)藥科研專項(xiàng)課題項(xiàng)目資助（10zyz106）

曹雪濱, E-mail: cxb252@yahoo.com.cn

周玉文, 現(xiàn)工作單位是保定市第二醫(yī)院心內(nèi)科