牛廷獻(xiàn), 羅曉紅, 萬東君, 王春雨, 馮小明, 陸　璐, 王紅義

?

血必凈對高原綿羊多器官功能障礙綜合征的治療效果

牛廷獻(xiàn)1, 羅曉紅2*, 萬東君3, 王春雨2, 馮小明1, 陸璐1, 王紅義1

（蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院:1動物實(shí)驗(yàn)科,2內(nèi)分泌科,3干部病房, 蘭州 730050）

探討血必凈（XBJ）對內(nèi)毒素（LPS）致綿羊高原多器官功能障礙綜合征（H-MODS）的治療作用。將18只綿羊隨機(jī)分為對照組（A組）、模型組（B組）和XBJ組（C組），每組6只。B組和C組綿羊均靜脈泵入LPS （6μg/kg）建立H-MODS模型，A組以等劑量的生理鹽水代替LPS進(jìn)行處理作為對照。待靜脈泵入LPS后，C組綿羊立刻靜脈滴注XBJ（2ml/kg），2次/d，連續(xù)3d。B組以生理鹽水（2ml/kg）進(jìn)行同樣處理。各組分別于0，3，12，24，48和72h檢測血清生化和血常規(guī)指標(biāo)的變化。不同時點(diǎn)，B組血清肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總膽紅素（TBIL）和肌酐（Cr）水平較A組和C組明顯升高（＜0.05或＜0.01）；與A組比較，3h時B組和C組的白細(xì)胞（WBC）計數(shù)驟然下降，3h后又急劇上升，但C組的升降趨勢明顯比B組平緩。血必凈注射液能有效減輕H-MODS綿羊心、肺、肝、腎等器官的損傷。

高原多器官功能障礙綜合征; 血必凈; 內(nèi)毒素

我國高原地區(qū)急性重型高原病并發(fā)多器官功能障礙綜合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）的發(fā)病率較高[1-3]。高原地區(qū)MODS（H-MODS）雖然在本質(zhì)上與平原地區(qū)MODS沒有差別，但從平原進(jìn)駐高原后隨著海拔的升高，以缺氧為主的環(huán)境因素逐漸成為主要打擊因素，從而不同程度地改變了MODS的發(fā)病過程、臨床特征和預(yù)后，使其治療方案也隨之發(fā)生了顯著變化[4]。而H-MODS在治療中的不確定因素比平原和亞高原地區(qū)更多、變數(shù)更大。筆者既往對亞高原地區(qū)（蘭州市）MODS的防治進(jìn)行了初步研究，為了探討H-MODS的防治措施，本研究在建立高原地區(qū)綿羊MODS模型的基礎(chǔ)上，研究血必凈（XBJ）注射液對H-MODS的干預(yù)效果[5-7]。

1 材料與方法

1.1 動物與試劑

18只1年齡杜泊綿羊[蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院動物實(shí)驗(yàn)科提供，設(shè)施使用許可證號：SYXK（軍）2009-022]，雌雄各半，體質(zhì)量（20±2）kg，隨機(jī)分為對照組（A組）、模型組（B組）和XBJ組（C組），每組6只，全價飼料飼養(yǎng)。速眠新Ⅱ號[軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所，長春，吉獸藥試字（2004）005013]，內(nèi)毒素（LPS，血清型為：O127∶B8，批號64H4010，美國Sigma公司）；生化分析儀（BECKMAN公司，COULTER LX20）。

1.2 模型建立及分組

參照文獻(xiàn)[6-8]方法建模，18只綿羊急進(jìn)至甘肅省甘南?？撇菰ê０?500m）后，均用速眠新Ⅱ號（1.5ml/kg）肌內(nèi)注射麻醉，B組和C組綿羊經(jīng)前肢橈靜脈泵入LPS（6μg/kg，30min內(nèi)泵完），A組以等量的生理鹽水靜脈泵入作為對照。待LPS靜脈泵入完畢后，C組綿羊以2ml/kg 血必凈（XBJ）靜脈滴注，2次/d，連續(xù)3d。B組以生理鹽水（2ml/kg）進(jìn)行同樣處理。

1.3 檢測指標(biāo)與方法

血常規(guī)及各項生化指標(biāo)的檢測均由蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院檢驗(yàn)科完成。三組分別于0，3，12，24，48，72h經(jīng)頸靜脈采血，測定白細(xì)胞（white blood cell，WBC）計數(shù)和血清肌酸激酶（creatine kinase，CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（aspartic transaminase，AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、總膽紅素（total bilirubin，TBIL）和肌酐（creatinine，Cr）水平。

1.4 MODS的診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照胡森等[9]提出的動物發(fā)生MODS時，各個器官功能障礙分期診斷標(biāo)準(zhǔn)和評分標(biāo)準(zhǔn)。在注射LPS后出現(xiàn)2個或2個以上器官或系統(tǒng)功能障礙即判定為MODS。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 一般情況

B組綿羊靜脈泵入LPS 2h后，出現(xiàn)呼吸頻率加快、心率增快、腹脹、尿頻、發(fā)熱；蘇醒后食欲顯著減退、腹脹、精神萎靡、呼吸急促、四肢無力。與B組比較，C組的癥狀體征明顯較輕。3h后，B組2只和C組1只綿羊因呼吸窘迫、心律失常、血壓下降，繼之心力衰竭死亡；24h后，B組4只與C組2只綿羊相繼死亡，A組無1例死亡。

2.2 血清生化指標(biāo)改變

各組生化指標(biāo)的改變見表1。（1）CK和CK-MB：C組，3～24h時二者的水平較A組及其0h時明顯升高（＜0.05或＜0.01），但48～72h時，二者水平與0h比較，明顯降低（＜0.05或＜0.01）；兩組的變化趨勢基本相同且無顯著差異。（2） AST：B組和Ｃ組的水平在12～72h較A組及其0h時顯著升高（＜0.01）；與B組比較，C組AST水平明顯下降（＜0.05或＜0.01）。（3）ALT：B組和C組的水平在12～72h明顯高于A組及其0h時（＜0.05或＜0.01），且與B組比較，C組ALT水平明顯降低（＜0.05或＜0.01）。（4）TBIL：B組和C組水平的變化趨勢與ALT基本一致，二者只在48～72h具有明顯差異（＜0.05）。（5）Cr：與A組比較，B組和C組在12～24h的水平明顯升高（＜0.05或＜0.01），且兩組間在24h時具有明顯差異（＜0.05）。

2.3 WBC計數(shù)改變

與A組比較，B組和C組靜脈泵入LPS后0～3h的WBC計數(shù)驟然下降（＜0.01），且B組顯著低于C組（＜0.05）；3h后WBC計數(shù)開始上升，在48～72h，B組WBC計數(shù)顯著高于A組（＜0.01），且在48h時，B組顯著高于C組（＜0.05），而C組與A組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞0.05）。

3 討 論

MODS一直是危重癥醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。高原與平原 MODS雖未發(fā)現(xiàn)本質(zhì)上的區(qū)別，但進(jìn)駐高原人群伴隨海拔上升以缺氧為主的環(huán)境暴露因素逐漸參與了平原普遍認(rèn)知的原發(fā)性打擊因素，不同程度地改變了MODS的發(fā)病過程、臨床癥征、診斷標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)，使平原習(xí)用的多器官功能指標(biāo)參數(shù)界值和區(qū)間范圍發(fā)生了變化，形成了具有高海拔地區(qū)特性的H-MODS診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]，其治療方案也隨之發(fā)生了明顯的改變。

表1 各組不同時點(diǎn)生化指標(biāo)比較

CK: creatine kinase; CK-MB: creatine kinase isoenzyme; AST: aspartic transaminase; ALT: alanine aminotransferase; TBIL: total bilirubin; Cr: creatinine; group A: control group; group B: model group; group C: XBJ treatment group.Compared with group A,*＜0.05,**＜0.01; Compared with group B,#＜0.05,##＜0.01; Compared with 0h,△＜0.05,△△＜0.01

圖1 各組不同時點(diǎn)WBC計數(shù)的變化

Figure 1 Change of WBC number at different time points in each group

WBC: white blood cell. Compared with group A,**＜0.01; compared with group C,#＜0.05

在MODS的病程中，首先是形成全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS），繼而形成膿毒癥（sepsis）。促炎和抗炎介質(zhì)的失衡是SIRS和（或）膿毒癥形成的主要原因[11-13]。血必凈注射液是由紅花、赤芍、當(dāng)歸、丹參等組成的中藥復(fù)方制劑，它能有效地拮抗LPS，清除體內(nèi)炎癥介質(zhì)，改善微循環(huán)，增加血流量，減少血小板的黏附聚集，降低急性炎癥時毛細(xì)血管的通透性，減少炎癥滲出，改善局部的血液循環(huán)，促進(jìn)炎癥的吸收，從而促進(jìn)病變部位的修復(fù)和痊愈[14-18]。

本研究中B組和C組靜脈泵入LPS后，與A組綿羊比較，體征表現(xiàn)、生化指標(biāo)和WBC計數(shù)變化明顯。由此判定，綿羊MODS模型建立成功。同時，C組綿羊與B組相比，臨床癥狀輕、不同時點(diǎn)的血清生化指標(biāo)水平明顯降低。結(jié)果表明，血必凈注射液在H-MODS的病程中，對心、肝、腎等器官的損傷具有一定的保護(hù)作用，對H-MODS具有較好的治療效果，可作為一種高效的臨床遴選藥物。

WBC測定結(jié)果表明，B、C兩組WBC計數(shù)較A組在3h時均明顯下降（＜0.01），之后又明顯升高（＜0.01），此結(jié)果與有關(guān)文獻(xiàn)報道一致[6,19,20]。這提示靜脈泵入LPS后，可能首先對WBC造成急劇殺傷作用，之后形成SIRS，又使得WBC計數(shù)急劇升高。而且，3h時WBC計數(shù)的下降程度和48h時的上升程度，C組均較B組明顯減輕（＜0.05）。由此可見，血必凈注射液對WBC的急劇變化具有一定的干預(yù)作用。

血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果表明，CK和CK-MB的變化趨勢與其他生化指標(biāo)不盡相同。A組CK和CK-MB值分別在24h和48h后明顯小于0h（＜0.05或＜0.01）。這可能是急進(jìn)高原后，缺氧應(yīng)激狀態(tài)下，二者的基礎(chǔ)水平明顯升高，待高原缺氧習(xí)服后，二者的水平又明顯降低。另外，以往對亞高原（蘭州市）和高原地區(qū)MODS的研究表明，急進(jìn)高原后，對照組綿羊動脈血氧分壓明顯降低，而AST的水平則明顯升高[6,21]，這使得多器官功能指標(biāo)的參數(shù)界值和區(qū)間范圍發(fā)生了顯著變化，進(jìn)而不同程度地改變MODS的發(fā)病過程。因此，對于MODS的預(yù)防和臨床治療，高原地區(qū)應(yīng)有別于平原和亞高原地區(qū)，其有待于進(jìn)一步的探討。

[1] 周其全, 劉福玉, 鄭必海, 等. 3184例重型急性高原病患者并發(fā)多器官功能障礙綜合征的結(jié)果分析[J]. 中國危重病急救醫(yī)學(xué), 2007, 19(1): 362?401.

[2] 周其全, 劉福玉, 鄭必海, 等. 白細(xì)胞與白細(xì)胞介素增高在急性高原病并發(fā)多器官功能障礙中的作用及臨床意義[J]. 中國危重病急救醫(yī)學(xué), 2007, 19(10): 5882?5921.

[3] 高 煒, 張世范, 張德海, 等. 急性高原病合并多臟器功能障礙綜合征(附9例報告)[J]. 西北國防醫(yī)學(xué)雜志, 2004, 25(1): 72?91.

[4] 周其全, 張世范. 急性重型高原病并發(fā)多器官功能障礙綜合征的早期診斷與臨床救治[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2010, 35(10): 1183?1186.

[5] 羅曉紅, 萬東君, 牛廷獻(xiàn), 等. 烏司他丁對羊多臟器功能障礙綜合征的防護(hù)作用[J]. 中華老年多器官疾病雜志, 2011, 10(5): 431?434.

[6] 牛廷獻(xiàn), 萬東君, 陸 璐, 等. 高原地區(qū)多臟器功能障礙綜合征綿羊模型的建立[J]. 實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué), 2012, 32(4): 285?288.

[7] 萬東君, 牛廷獻(xiàn), 王春雨, 等.高海拔地區(qū)內(nèi)毒素致綿羊多臟器功能障礙綜合征的病理學(xué)改變[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 22(8): 40?42.

[8] 郭鳳梅, 邱海波, 周韶霞, 等. 急性呼吸窘迫綜合征綿羊模型的建立[J]. 中國危重病急救醫(yī)學(xué), 2001, 13(2): 95?98.

[9] 胡森, 盛志勇, 周寶桐, 等. 雙相遲發(fā)多器官功能不全綜合征(MODS)動物模型的研究[J]. 中華創(chuàng)傷雜志, 1996, 12(2): 102?106.

[10] 張世范, 劉 毅, 高 煒, 等. 高海拔地區(qū)多臟器功能障礙評分系統(tǒng)診斷的標(biāo)準(zhǔn)[J]. 中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2006, 15(4): 366?369.

[11] Adib-Conquy M, Cavaillon JM. Host inflammatory and anti?inflammatory response during sepsis[J]. Pathol Biol (Paris), 2012, 60(5): 306?313.

[12] Fry DE. Sepsis, systemic inflammatory response, and multiple organ dysfunction: the mystery continues[J]. Am Surg, 2012, 78(1): 1?8.

[13] Sugita H, Kinoshita Y, Baba H. The duration of SIRS before organ failure is a significant prognostic factor of sepsis[J]. Int J Emerg Med, 2012, 5(1): 44.

[14] 王 強(qiáng), 姚詠明, 王文江, 等. 血必凈注射液對燙傷大鼠肺組織高遷移率族蛋白B1表達(dá)的影響及意義[J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 32(4): 374?376.

[15] 劉達(dá)興, 盧斌, 梁貴友, 等. 靜脈滴注血必凈對體外循環(huán)肺損傷的保護(hù)作用研究[J]. 中國藥房, 2008, 19(24): 1860?1862.

[16] 張云杰. 血必凈注射液對小腸缺血再灌注大鼠血清細(xì)胞因子的影響[J]. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2008, 32(6): 502?505.

[17] 袁雪松, 卞曉星, 戚傳平. 血必凈對大鼠外傷性腦損傷后血清S-100β和IL-6水平的影響[J]. 江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版), 2009, 19(1): 35?38.

[18] 孫軍平, 汪建新, 郭麗娜, 等. 內(nèi)毒素致兔急性肺損傷及血必凈保護(hù)作用[J]. 軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報, 2009, 30(1): 102?104.

[19] 任添華, 姜悅, 任愛民, 等. 單相速發(fā)型多臟器功能障礙綜合征動物模型的研究[J]. 首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2005, 26(4): 479?481.

[20] 平易, 劉駿峰, 謝瓊紅, 等. 內(nèi)毒素介導(dǎo)的多臟器功能障礙綜合癥動物模型的研究[J]. 中國臨床醫(yī)學(xué), 2009, 16(2): 287?290.

[21] 王春雨, 凡春玲, 羅曉紅, 等. 內(nèi)毒素致多臟器功能障礙綜合征綿羊模型的研究[J]. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 21(8): 49?52.

（編輯: 張青山）

Therapeutic efficiency of Xuebijing on sheep multiple organ dysfunction syndrome at high altitude

NIU Ting-Xian1, LUO Xiao-Hong2*, WAN Dong-Jun3, WANG Chun-Yu2, FENG Xiao-Ming1, LU Lu1, WANG Hong-Yi1

(1Department of Animal Experiment,2Department of Endocrinology,3Cadre’s Ward, Lanzhou General Hospital, Lanzhou Military Command, Lanzhou 730050, China)

To determine therapeutic effect of Xuebijing (XBJ) injection, a compound injection of traditional Chinese herbs, on multiple organ dysfunction syndrome at high altitude (H-MODS).A total of 18 sheep were randomly divided into control, model and XBJ treatment groups, with 6 sheep in each group. After the sheep quickly reached a highland of 3500m, H-MODS model was inflicted by venous injection of 6μg/kg lipopolysaccharide (LPS), and LPS was substituted with normal saline in the same dose for control group. After that, the sheep in model and XBJ groups were given an intravenous injection of 2ml/kg normal saline and 2ml/kg XBJ injection respectively, twice per day for 3 consecutive days. Biochemical parameters and blood routine indices were detected in the blood samples collected at 0, 3, 12, 24, 48 and 72h after model establishment.The contents of creatine kinase (CK), creatine kinase isoenzyme (CK-MB), aspartic transaminase (AST), alanine aminotransferase (ALT), total bilirubin (TBIL) and creatinine (Cr) were significantly higher in the model group than in the control and treatment groups (＜0.05 or＜0.01) at the different time points. Compared with the control, the number of white blood cells (WBC) was obviously decreased rapidly in the model and treatment groups at 3h, and then began to elevate suddenly in another 3h later. But the increasing tendency was more smoothly in the treatment group than in the model group.XBJ injection exerts protective effect on the heart, lung, liver, and kidney in sheep against H-MODS injury.

multiple organ dysfunction syndrome at high altitude; Xuebijing injection; lipopolysaccharide

(1010RJZA052)

R459.7

A

10.3724/SP.J.1264.2013.00155

2013?03?01;

2013?04?28

甘肅省自然科學(xué)基金（1010RJZA052）

羅曉紅, Tel: 0931-8994183, E-mail: lznfmluo@163.com