黃文軍， 劉俊明， 高霞， 謝偉 ，李科， 王明建， 趙亮， 鄒琦

血清基質(zhì)金屬蛋白酶 -2（MMP-2）和 MMP-9與急性冠狀動(dòng)脈綜合征的相關(guān)研究

黃文軍， 劉俊明， 高霞， 謝偉 ，李科， 王明建， 趙亮， 鄒琦

目的： 探討血清基質(zhì)金屬蛋白酶 -2（MMP-2）和基質(zhì)金屬蛋白酶 -9（MMP-9）水平與急性冠狀動(dòng)脈（冠脈 ）綜合征的關(guān)系。

方法： 72 例冠心病患者分為穩(wěn)定型心絞痛組 34 例和急性冠脈綜合征組 38 例，其中急性冠脈綜合征組包括不穩(wěn)定型心絞痛患者 13 例和急性心肌梗死患者 25 例；根據(jù)冠脈造影檢查結(jié)果，72 例患者再分為單支病變 24 例、雙支病變 21 例和三支病變 27 例；對(duì)照組為冠脈正?；颊?26 例。采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定所有患者術(shù)前 1 天血清 MMP-2，MMP-9水平。

結(jié)果： ①急性冠脈綜合征組血清 MMP-2、MMP-9 水平高于穩(wěn)定型心絞痛組以及對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；穩(wěn)定型心絞痛組血清 MMP-2、MMP-9 水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；急性心肌梗死患者血清 MMP-2、MMP-9 水平高于不穩(wěn)定型心絞痛患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②血清 MMP-2、MMP-9 水平在正常對(duì)照、單支病變、雙支病變和三支病變患者間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

結(jié)論： 血清 MMP-2、MMP-9 表達(dá)水平與急性冠脈綜合征病情的嚴(yán)重程度有關(guān)。關(guān)鍵詞 基質(zhì)金屬蛋白酶；急性冠狀動(dòng)脈綜合征

(Chinese Circulation Journal, 2013,28:103.)

急性冠狀動(dòng)脈（冠脈）綜合征的發(fā)生機(jī)制與易損斑塊密切相關(guān)；易損斑塊是指易于破裂，形成血栓或病變進(jìn)展迅速的冠脈粥樣硬化性斑塊，是引起急性冠脈綜合征的重要危險(xiǎn)因素[1]。早期識(shí)別易損斑塊，對(duì)預(yù)防和干預(yù)血栓形成，降低心血管事件的發(fā)生率、死亡率，有著十分重要的意義。血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）和基質(zhì)金屬蛋白酶 -9（MMP-9）作為細(xì)胞外基質(zhì)降解的重要蛋白水解酶，可以降解內(nèi)皮細(xì)胞基底膜，分解纖維帽中膠原，使炎癥細(xì)胞、脂蛋白易于侵入內(nèi)膜，使纖維帽變薄，與斑塊的穩(wěn)定性降低有關(guān)。本研究目的在于探討血清 MMP-2 和 MMP-9 水平與急性冠脈綜合征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料：連續(xù)收集 2010-10 至 2011-10 期間在我院心血管內(nèi)科住院冠心病患者 72例，并均行冠脈造影（CAG）再次確診，分為穩(wěn)定型心絞痛 (SAP)組 34 例，急性冠脈綜合征組 38 例，其中不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）患者 13 例、急性心肌梗死（AMI）患者 25 例； 冠脈造影檢查單支病變 24 例、雙支病變 21 例和三支病變 27 例 ;行冠脈造影證實(shí)冠脈正常 26例作為對(duì)照組。冠心病診斷參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)頒布的《冠心病診斷與治療指南》。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除惡性腫瘤、近期使用炎癥抑制物、嚴(yán)重心功能不全（NYHA 心功能分級(jí)Ⅲ～Ⅳ）、活動(dòng)性結(jié)核、自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)疾病、結(jié)締組織疾病等對(duì) MMP-2、MMP-9 的測(cè)定有較大影響的患者 ;②排除兩周內(nèi)有活動(dòng)性出血、近期有重大外傷和手術(shù)史、洋地黃中毒、對(duì)造影劑過(guò)敏、中風(fēng)的活動(dòng)期、高度懷疑有夾層動(dòng)脈瘤等不能行冠脈造影檢查的患者。

1.2 方法 :所有患者于冠脈造影檢查術(shù)前 1 天 (急性心肌梗死于術(shù)前 30 min)抽取外周靜脈血 4 ml，3800 r/min 離 心 10 min 分 離 血 清， 離 心 半 徑 16cm， 并于 -80℃保存待測(cè)。采用夾心酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒測(cè)定血清 MMP-2、MMP-9 水平，試劑盒為武漢博士德公司提供，MMP-2 試劑盒批號(hào) NO.178744，MMP-9 試 劑 盒 批 號(hào) NO.184744， 檢 測(cè) 范 圍 均 為156pg/ml～10000pg/ml，敏感性均為 ＜5pg/ml。

冠脈造影檢查在美國(guó)西門子公司C型臂X光機(jī)下進(jìn)行，選用 Judkin's 氏法選擇性冠脈造影。三支心外膜下的冠脈及大分支中有任何一段血管狹窄直徑≥ 50% 即為狹窄病變。根據(jù)冠脈病變所在部位分為右冠脈、左前降支、左回旋支，根據(jù)病變累及血管支數(shù)分為單支病變，雙支病變和三支病變。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用 SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)以及方差齊性檢驗(yàn)后，兩組均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)的比較采用方差分析，并采用 LSD 方法以及 Dunnet-t方法進(jìn)行兩兩比較，雙側(cè)檢驗(yàn) P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般臨床資料比較：組間性別、高血壓史、糖尿病史、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 三組患者一般臨床資料比較（x±s）

2.2 不同類型冠心病血清 MMP-2、MMP-9 水平變化：急性冠脈綜合征組血清 MMP-2、MMP-9 水平均高于穩(wěn)定型心絞痛組以及對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；穩(wěn)定型心絞痛組血清 MMP-2、MMP-9 水平與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表2）。急性冠脈綜合征組中急性心肌梗死患者和不穩(wěn)定型心絞痛患者血清 MMP-2 水平分別為（113.25±31.29）ng/ml vs（98.58±29.51 ）ng/ml ；MMP-9 水平分別為（882.19±205.63 ）ng/ml vs（ 769.44±214.03）ng/ml，急性心肌梗死患者均高于不穩(wěn)定型心絞痛患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 三組患者血清 MMP-2、MMP-9 水平比較（ng/ml，x±s）

2.3 不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)的血清 MMP-2、MMP-9水平變化：血清 MMP-2、MMP-9 水平在對(duì)照組患者、單支病變、雙支病變和三支病變患者之間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表3）

表3 不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)血清 MMP-2、MMP-9水平比較（ng/ml，x±s）

3 討論

目前認(rèn)為，急性冠脈綜合征的發(fā)生機(jī)制主要與易損斑塊的破裂 , 進(jìn)而引起冠脈內(nèi)血栓形成有關(guān)。薄纖維帽及大脂質(zhì)核心是易損斑塊的主要特點(diǎn)之一[2]。一般認(rèn)為纖維帽厚度小于 100μm、脂核占斑塊體積 40% 以上時(shí)，粥樣斑塊易于發(fā)生破裂[3]。纖維帽的破裂是由于細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解失去平衡的結(jié)果[4]。有研究表明 , 在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，血管平滑肌細(xì)胞及聚集的巨噬細(xì)胞可誘導(dǎo) MMP-2、MMP-9 的表達(dá)，降解細(xì)胞外基質(zhì)，使纖維帽變?。欢诎邏K破裂常發(fā)生的肩部區(qū) MMP-2、MMP-9 的活性最高，細(xì)胞外基質(zhì)降解最嚴(yán)重[5]。

本研究中，急性冠脈綜合征組血清 MMP-2、MMP-9 水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛組以及對(duì)照組，并且急性心肌梗死患者血清 MMP-2、MMP-9 水平高于不穩(wěn)定型心絞痛患者，但是穩(wěn)定型心絞痛組血清 MMP-2、MMP-9 水平與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異，提示 MMP-2、MMP-9 與斑塊的穩(wěn)定性相關(guān)?；|(zhì)金屬蛋白酶家族是一類活性依賴于鋅離子和鈣離子的蛋白水解酶，主要的生理作用是降解細(xì)胞外基質(zhì)。MMP-2、MMP-9 屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族中明膠酶類，主要水解變性膠原及基膜的主要成分 IV型膠原。在易損斑塊的肩部區(qū)MMP-2、MMP-9過(guò)度表達(dá)，降解膠原及彈力纖維等細(xì)胞外基質(zhì)成分，引起血管平滑肌細(xì)胞凋亡，由于大量平滑肌細(xì)胞凋亡使斑塊肩部無(wú)法發(fā)揮支撐作用，導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定而易于破裂， 最 終 發(fā) 生 急 性 冠 脈 綜 合 征[6,7]。Brown 等[8]在穩(wěn)定型心絞痛和不穩(wěn)定型心絞痛患者的旋切斑塊組織中發(fā)現(xiàn)，不穩(wěn)定型心絞痛患者 MMP-2、MMP-9含量明顯高于穩(wěn)定型心絞痛患者，并認(rèn)為 MMP-2、MMP-9 活性增高是斑塊不穩(wěn)定性的生化基礎(chǔ)。Kai等[9]首次報(bào)道了外周靜脈血中 MMP-2 和 MMP-9 水平與冠心病的關(guān)系，結(jié)果顯示不穩(wěn)定型心絞痛和急性心肌梗死患者 MMP-2、MMP-9 水平約為穩(wěn)定型心絞痛患者和正常對(duì)照組的 2～3 倍 ,經(jīng)藥物治療后急性冠脈綜合征患者血液中高水平 MMP-2、MMP-9持續(xù)一周后降至正常水平。我國(guó)也有相關(guān)報(bào)道，唐其 東 等[10]在 觀 察 不 同 類 型 冠 心 病 患 者 MMP-2 和MMP-9 水平變化的研究中，認(rèn)為 MMP-2、MMP-9水平顯著升高提示了粥樣斑塊的不穩(wěn)定性，并與急性冠脈綜合征病情嚴(yán)重程度相一致。

本研究同時(shí)還發(fā)現(xiàn)血清 MMP-2、MMP-9 水平在不同冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)患者之間無(wú)明顯差異。其原因可能為：MMP-2 是由正常的血管平滑肌細(xì)胞分泌 , 在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中表達(dá)增高，斑塊中的巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)的泡沫細(xì)胞也可以分泌大量的MMP-2, 特異降解膠原蛋白和基底膜，改變斑塊的結(jié)構(gòu)和自身組織成分加速斑塊破裂 , 最終導(dǎo)致急 性 冠 脈 綜 合 征[11]；MMP-9 是 由 動(dòng) 脈 粥 樣 硬 化斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞分泌 , 可以降解粥樣硬化斑塊內(nèi)細(xì)胞外各型膠原及明膠，是動(dòng)脈粥樣硬化形成和粥 樣 斑 塊 破 裂 的 重 要 促進(jìn) 因素[12]，相關(guān)研究也顯示急性冠脈綜合征患者 MMP-2、MMP-9 水平的升高 主 要來(lái)源 于 不 穩(wěn) 定 斑 塊 的 釋 放[13]， 因 此 MMP-2、MMP-9 與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)，而與冠脈病變支數(shù)無(wú)關(guān)；其次目前認(rèn)為急性冠脈綜合征的發(fā)病基礎(chǔ)取決于斑塊的穩(wěn)定性，而不是冠脈粥樣硬化斑塊狹窄的嚴(yán)重程度，或是病變支數(shù) , 約70% 急性心肌梗死發(fā)生于冠脈狹窄 ＜50% 的斑塊破裂處，這進(jìn)一步提示血清 MMP-2、MMP-9 水平與斑塊的穩(wěn)定性相關(guān)，這與既往研究結(jié)果一致[14]。

從理論上來(lái)說(shuō)，急性冠脈綜合征患者 MMP-2，MMP-9 的表達(dá)早于肌酸激酶、 肌酸激酶同工酶、肌鈣蛋白 I/T 等心肌損傷標(biāo)志物。這就提示我們，是否可以將 MMP-2，MMP-9 作為急性冠脈綜合征早期診斷的敏感生化檢測(cè)指標(biāo)。Fred 等[15]的研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9 聯(lián)合其他多種生物標(biāo)記物檢驗(yàn)，可以提 高 急性 心肌梗 死的 確 診率。Hlatky 等[16]認(rèn) 為外周血清 MMP-2、MMP-9 水平是急性心肌梗死獨(dú)立危險(xiǎn)因素。在對(duì)急性冠脈綜合征的預(yù)測(cè)中，血清MMP-2、MMP-9 具有獨(dú)立于傳統(tǒng)標(biāo)志物的預(yù)測(cè)價(jià)值， 甚 至有 可 能優(yōu) 于 傳統(tǒng) 預(yù) 測(cè)因 子[17]。 因此 血 清MMP-2、MMP-9 可以作為預(yù)測(cè)易損斑塊的良好因子，并且有望成為預(yù)防以及治療急性冠脈綜合征的新靶點(diǎn)。

[1]陳 曦 . 冠 脈 易 損 斑 塊 生 物 標(biāo) 志 物 的 研 究 進(jìn) 展 . 中 國(guó) 循 環(huán) 雜志 ,2011,26: 125-126.

[2]葛均波 ,馬劍英 .冠狀動(dòng)脈易損斑塊的識(shí)別和防治進(jìn)展 .中國(guó)循環(huán)雜志 ,2010,25:243-244.

[3]Arbustini E.Total erythrocyte membrane cholesterol: an innocent new marker or an active player in acute coronary syndromes.J Am Coll Cardiol,2007,49: 2090-2092．

[4]楊 麗 霞 ,鄭 甲 林 ,齊 峰 ,等 .急 性 冠 狀 動(dòng) 脈 綜 合 征 患 者 核 因子 κB 和基質(zhì)金屬蛋白酶9的變化及臨床意義 .中國(guó)循環(huán)雜志 ,2010,25:352-355.

[5]Suzuki H,Kusuyam AT,Sato R,et al.Elevation of matrix metalloproteinases and inter leukin-6 in the culprit coronary artery of myocardial infarction.Eur J Clin Invest,2008,38:166-173.

[6]Papazafiropoulou A,Tentolouris N.Matrixmetalloproteinases and cardiovascular diseases.Hippokratia,2009,13:76-82．

[7]Konstantino Y,Nguyen TT,Wolk R,et al.Potential implications of matrix metall -oproteinase-9 in assessment and treatment of coronary artery disease.Biomarkers, 2009,14:118-129．

[8]Brown DL，Hibbs MS，Kearney M，et al.Identification of 92-kD gelatinase in human coronary atherosclerotic lesions.Association of active enzyme synthesis with unstable angina.Circulation，1995,91:2125-2131.

[9]Kai H, Ikeda H, Yasukawa H, et al. Peripheral blood levels of matrix metall- oproteases-2and-9 are elevated in patients with acute coronary syndromes.J Am Coll Cardiol,1998,32:368-372.

[10]唐其 東 ,吳平 生 ,候 玉 清 ,等 .急性冠 脈綜合征和冠脈 慢性完全閉塞患者 MMP-2、MMP-9 升高及臨床意義 .南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) ,2009,29:1005-1007.

[11]Hojo Y, Ikeda U, Ueno S,et al. Expression of matrix metalloprotrinase in patients with acute myocardial infarction.Jpn Circ J,2001,65: 71-75.

[12]Tao ZY, Cavasin MA, Yan GF,et al.Temporal changes in matrix metall -oproteinase expression and inflammatory response associated with cardiac rupture after myocardial infarction in mice.Life Sci,2004,74:1561-1572.

[13]陳少源 ,蘇又蘇 .急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者基質(zhì)金屬蛋白酶 -9 來(lái)源的研究 .臨床心血管病雜志 ,2011,27:439-441.

[14]陳樣新 ,傅國(guó)勝 ,徐耕 ,等 .急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶 2 的變化 .中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志 ,2005,13:363-366.

[15]Fred SA, Stephen WS, Lesly AP, et al.Assessment of the Multiple Biomarker Approach for Diagnosis of Myocardial Infarction in Patients Presenting with Symptoms Suggestive of Acute Coronary Syndrome. Clinical Chemistry,2009, 55:93-100.

[16]Hlatky MA, Ashley E, Quertermous T.Matrixmetalloproteinase circulating levels,genetic polymorphisms,and susceptibility to acute myocardial infarction among patients with coronary artery disease.Am Heart J,2007,154:1043-1051.

[17]段靜思，張建華 ,徐巖 .急性冠狀動(dòng)脈綜合征標(biāo)志物預(yù)測(cè)價(jià)值的新進(jìn)展心血管病學(xué)進(jìn)展 ,2011，32:806-808.

The Relationship Between Serum Levels of Matrix Metalloproteinase-2, -9 and the Severity Condition in Patients With Acute Coronary Syndrome

HUANG Wen-jun, LIU Jun-ming, GAO Xia, XIE Wei, LI Ke, WANG Ming-jian, ZHAO Liang, ZOU Qi.
Department of Cardiology, General Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps, Urumqi (830002), Xingjiang, China

Objective:To investigate the relationship between serum levels of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2), MMP-9 and the severity condition in patients with acute coronary syndrome (ACS).Methods:A total of 72 patients were divided into stable angina pectoris (SAP) group, n=34 and ACS group, n=38, ACS group including unstable angina pectoris (UAP) subgroup, n=13 and acute myocardial infarction (AMI) subgroup, n=25. The patients were also divided into another 3 groups as Single branch lesion group, n=24, Double branch lesion group, n= 21 and Three branch lesion group, n= 27. Control group had 26 subjects with normal coronary artery. The serum levels of MMP-2 and MMP-9 were examined and compared among all groups at 1 day before the operation.Results: ① Serum levels of MMP-2 and MMP-9 in ACS group was higher than those in SAP group and Control group, P＜0.05. MMP-2 and MMP-9 levels were similar between SAP group and Control group, P＞0.05. MMP-2 and MMP-9 levels in AMI subgroup were higher than that in UAP subgroup, P＜0.05. ② MMP-2 and MMP-9 levels were similar among Control group, Single, Double and Three branch lesion groups, P＞0.05.Conclusion: Serum levels of MMP-2 and MMP-9 might be correlated with the severity condition in ACS patients.

Metalloproteinase; Acute coronary syndrome

LI Ke, Email: like213097@sohu.com

2012-07-18）

（編輯：汪碧蓉）

830002 新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市，新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)醫(yī)院 心血管內(nèi)科

黃文軍 副主任醫(yī)師 心臟中心副主任 心血管內(nèi)科主任 研究方向：冠心病基礎(chǔ)與臨床研究 2011 年新加坡國(guó)家心臟中心研修Email:hwjdoc.my265@yahoo.com.cn 通訊作者：李科 Email:like213097@sohu.com

R54

A

1000-3614（2013）02-0103 -04

10.3969/j.issn.1000-3614.2013.02.008