■郭艷麗 鐘光柱 王 榮

（甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅蘭州 730070）

紅芪是多序巖黃芪的干燥根，在中醫(yī)臨床上主要用于補(bǔ)氣固表,利尿托毒、排膿和斂瘡生肌等(國(guó)家藥典委員會(huì),2005)。有關(guān)人和鼠的研究表明，紅芪具有提高機(jī)體免疫力(王瑋等，2000)、改善心血管系統(tǒng)缺血、缺氧現(xiàn)象（馬海彥等，2009），改善抗氧化機(jī)能（海力茜·陶爾大洪等，2007）、抗腫瘤（雷豐豐等，2008）、抗病毒（張宸豪等，2005）以及保護(hù)肝臟（任遠(yuǎn)等，2000）等作用。有關(guān)紅芪對(duì)畜禽作用的報(bào)道較少。來(lái)自本研究小組的試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加紅芪能顯著提高肉雞的粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀存留率（鐘光柱等，2010)，并能改善肉雞的脂類代謝（郭艷麗等，2010）。尚未見(jiàn)到紅芪對(duì)肉雞抗氧化性能和免疫功能影響的研究報(bào)道。所以，本研究將以紅芪作為添加劑，研究其對(duì)肉仔雞抗氧化性能和免疫功能的影響，為其在飼料中的合理應(yīng)用提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物、飼糧和處理

選用240只0日齡的AA肉公雛，按體重隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。采用三層籠養(yǎng)，試驗(yàn)期0～42 d，分為前期（0～21 d）和后期（22～42 d）兩個(gè)階段，自由采食和飲水。于7、21日齡進(jìn)行新城疫+傳支（二聯(lián)）免疫，14、28日齡進(jìn)行法氏囊免疫。日常管理參照《AA肉仔雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)》進(jìn)行。

參照美國(guó)NRC（1994）家禽營(yíng)養(yǎng)需要配制基礎(chǔ)飼糧（見(jiàn)表1），另外在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0.5%、1%、2%的紅芪（購(gòu)自蘭州市安寧醫(yī)藥公司，在60～65℃烘箱中烘干、粉碎、過(guò)40目篩），共配制成4種飼糧。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 樣品采集和制備

于試驗(yàn)第21和42 d，每個(gè)重復(fù)選擇1只接近平均體重的雞，空腹12 h后頸部采血，肝素鈉抗凝。用離心機(jī)3000 r/min離心15 min后，吸取血漿，一份用于測(cè)定T淋巴細(xì)胞陽(yáng)性率，另一份放于-20℃冰箱保存，用于測(cè)定抗氧化性能等指標(biāo)。同時(shí)屠宰動(dòng)物，采集心臟、肝臟和腎臟等組織樣品，同樣于-20℃保存?zhèn)錅y(cè)抗氧化性能指標(biāo)。然后摘取胸腺、法氏囊和脾臟,并稱重量，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.3 樣品分析

血漿、心臟、肝臟和腎臟中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量等指標(biāo)采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定。T淋巴細(xì)胞陽(yáng)性率采用α-醋酸萘酯酶反應(yīng)標(biāo)記法（ANAE+）測(cè)定（劉玉斌等，1989）。IgG含量用OlyMPUS-AU400生化分析儀測(cè)定。

免疫器官指數(shù)按下式計(jì)算：免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官重(g)/活重(g)]×100

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析

采用SPSS10.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著時(shí)采用Duncan法進(jìn)行多重比較，顯著性水準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗氧化性能

和對(duì)照組相比，添加紅芪能顯著提高肉雞21、42日齡血漿和多數(shù)組織的SOD活性（見(jiàn)表2）(P≤0.012)，對(duì)于GSH-Px活性（見(jiàn)表3），除腎臟外，21和42日齡血漿和其他組織多數(shù)指標(biāo)在紅芪添加組顯著高于對(duì)照組(P≤0.024)。另外，抗氧化效應(yīng)在不同組織及不同日齡顯示效應(yīng)的紅芪添加量不同。對(duì)于SOD活性，前期肝臟、腎臟和心臟以及后期血漿，添加0.5%處理組就顯示出提高的效應(yīng)，且在前期腎臟和心臟，2%處理組進(jìn)一步提高，顯著高于0.5%和1%添加組；后期肝臟和心臟，在1%處理組顯著升高，且與2%處理組無(wú)顯著差異；而前期血漿和后期腎臟，在2%紅芪添加組顯著高于其他三個(gè)處理組，其他三組間無(wú)顯著差異。就GSHPx活性而言，前、后期血漿在0.5%處理組顯著高于對(duì)照組，且三個(gè)添加劑量組間無(wú)顯著差異；前期肝臟、后期心臟和肝臟，在1%添加組才開(kāi)始顯著提高，后期心臟和肝臟與2%處理組無(wú)顯著區(qū)別，前期肝臟在2%組比1%處理組又進(jìn)一步提高；前期心臟顯示效應(yīng)的添加劑量是2%。MDA含量在21日齡血漿上表現(xiàn)出添加效應(yīng)（見(jiàn)表4）（P=0.026），在2%添加組顯著低于基礎(chǔ)飼糧組和0.5%添加組。

2.2 免疫功能

添加紅芪對(duì)肉仔雞免疫功能的影響僅表現(xiàn)在細(xì)胞免疫功能上(見(jiàn)表5)。肉雞21、42日齡的ANAE+百分率在紅芪添加組顯著高于基礎(chǔ)飼糧組，且存在顯著的劑量依賴效應(yīng)(P＜0.001)，隨著紅芪添加量的提高，其效應(yīng)也顯著提高。其他免疫功能指標(biāo)不受添加紅芪的影響。

表2 紅芪對(duì)肉仔雞血漿和組織中SOD活性的影響

表3 紅芪對(duì)肉仔雞血漿和組織中GSH-Px活性的影響

表4 紅芪對(duì)肉仔雞血漿和組織中MDA含量的影響

表5 紅芪對(duì)肉仔雞免疫功能的影響

3 討論

在集約化的飼養(yǎng)條件下，肉雞受到很多應(yīng)激因素的影響，這些應(yīng)激因素會(huì)促使動(dòng)物體內(nèi)的自由基增多，細(xì)胞受損，影響免疫功能，最終導(dǎo)致疾病、死亡率增加，生產(chǎn)效率下降。自由基的毒害作用可因抗氧化劑的存在而受到抑制。近年來(lái)，一些天然的具有抗氧化作用的物質(zhì)受到重視。研究表明，中草藥是一種重要的抗氧化物質(zhì)。其中，紅芪具有很強(qiáng)的抗氧化活性(惠和平等,2010)。本研究中，添加紅芪能夠提高肉雞血漿和多數(shù)組織中的SOD和GSH-Px活性的結(jié)果說(shuō)明，紅芪可能是通過(guò)提高抗氧化酶的活性而調(diào)整動(dòng)物的氧化和抗氧化平衡。盡管在畜禽上沒(méi)有類似的研究，但體外試驗(yàn)與鼠上的試驗(yàn)結(jié)果表明，紅芪或其浸提物能顯著提高SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量（金智生等，2004；劉毅等,2010；楊小虎等,2010；惠和平等,2010；金智生等，2011）。

家禽生產(chǎn)中，提高動(dòng)物的免疫功能，減少疾病感染非常重要。鼠上的研究表明，紅芪（崔芬芬等，2012）、紅芪多糖(姚寶泰等,2008)、紅芪水提物（胡燕等，2011）能顯著提高鼠的免疫功能。有關(guān)紅芪對(duì)畜禽免疫功能的研究較少。本研究中，添加紅芪能顯著提高肉雞ANAE+百分率的結(jié)果說(shuō)明，紅芪能夠提高肉雞的細(xì)胞免疫功能。研究表明，紅芪水提物（海力茜·陶爾大洪等,2007)或紅芪總黃酮(王瑋等,2000)能提高非健康大鼠的胸腺和脾臟指數(shù)。但在本研究中，紅芪對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)沒(méi)有顯著影響，可能與試驗(yàn)動(dòng)物的健康狀態(tài)有關(guān)。

4 小結(jié)

飼糧中添加紅芪能顯著提高肉雞的抗氧化性能和細(xì)胞免疫功能，且在多數(shù)指標(biāo)上以2%的添加組效果最好。由于2%是本試驗(yàn)中設(shè)計(jì)的最高添加劑量，所以，尚無(wú)法提出肉雞飼糧中最適宜的紅芪添加量，需要做更多的研究加以確定。