■吳紅翔 藩東福 諶南輝 溫慶琪 翁燕梅 段美國 吳登堃
(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動科院,江西南昌 330045;2.江西婺源農(nóng)業(yè)局畜牧技術(shù)中心,江西婺源 330200)
在規(guī)模化的畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中動物食品安全問題頻出,隨著瘦肉精豬肉、蘇丹紅鴨蛋、三聚氫胺牛奶等事件的不斷出現(xiàn),人們對養(yǎng)殖業(yè)失去信心,加上長期使用抗生素帶來的病原耐藥性及藥物殘留等問題,已引起人們的重視,尋找一種能替代抗生素及安全的飼料添加劑已迫在眉睫。
蛋白飼料對畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展至關(guān)重要。我國農(nóng)業(yè)廢棄物(包括加工副產(chǎn)物)種類繁多,數(shù)量巨大[1]。我國是世界蘋果生產(chǎn)第一大國,蘋果總產(chǎn)量高達(dá)2610萬噸[2],蘋果渣通過微生物的轉(zhuǎn)化作用,發(fā)酵成為蛋白飼料意義重大[3]。
用蘋果渣發(fā)酵飼料與中草藥單獨作為飼料添加劑已在我國廣泛開發(fā)利用,而將兩者結(jié)合開發(fā)飼料添加劑產(chǎn)品的少有研究,其配伍技術(shù)將縮小同國外養(yǎng)殖水平的差距。
試驗研究比較蘋果渣發(fā)酵飼料與中草藥配伍在蛋品質(zhì)指標(biāo)上的應(yīng)用效果,以期尋找一種優(yōu)質(zhì)添加劑,開發(fā)綠色優(yōu)質(zhì)禽蛋產(chǎn)品。
松針、黃芪、何首烏、陳皮、刺五加、郁金、金銀花等中草藥均購自本校醫(yī)院中藥房,鮮松針采自農(nóng)大林學(xué)院,經(jīng)陰干后備用。各種中藥除去雜質(zhì)后按比例混合均勻,過60目篩粉碎,裝袋密封于陰冷干燥處貯藏備用。
固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:蘋果渣85%、麩皮15%,嗜酸乳桿菌、酵母菌、放線菌的菌配比為1∶1∶0.5,總接種量15%,發(fā)酵溫度30℃,物料水分約為65%,自然pH值,裝于500 ml三角瓶中,密閉發(fā)酵72 h,65℃恒溫干燥至恒重,室溫保存,發(fā)酵后蘋果渣風(fēng)干樣的營養(yǎng)成分含量:粗蛋白(20.20±0.5)%,粗脂肪(5.2±0.8)%,粗纖維(12.6±2.2)%,粗灰分(3.51±0.3)%,鈣(0.16±0.03)%,總磷(0.09±0.02)%。
蛋白高度測定儀、液體比重計、恒溫干燥箱、754紫外分光光度儀、DHS16-A型快速水分測定儀、梅特勒-托利多AL104天平、勻漿機(jī)、高速微量藥物粉碎機(jī)。
試驗用日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。
表1 日糧配方及營養(yǎng)水平
試驗選用300只飼養(yǎng)了半年的日本鵪鶉,隨機(jī)分成A、B、C、D四組,試驗設(shè)計見表2,每組設(shè)3個重復(fù),每重復(fù)25只鵪鶉。試驗A組為對照組,各組日喂3次,定量采食、自由飲水,預(yù)試期7 d,正試期為28 d。正試期結(jié)束時采血,禁食12 h,只供飲水。試驗期結(jié)束,每個重復(fù)取3只采血,靜置,于離心管中,2500 r/min離心15 min,制備血清樣品,分裝于Eppendorf管中,于-20℃冰箱中保存,備測總蛋白含量、白蛋白含量、球蛋白含量、血脲素氮含量,堿性磷酸酶量、血糖含量等生化指標(biāo)。
撿蛋進(jìn)行指標(biāo)測定,飼養(yǎng)試驗最后一周每日撿蛋,每組的蛋中選9個作為試驗用蛋,每個指標(biāo)取同一天的蛋進(jìn)行測定。
表2 試驗設(shè)計
產(chǎn)蛋重、比重、哈夫單位、蛋黃率、蛋白率、蛋殼率、熟蛋率、蛋形指數(shù)、蛋黃比率、哈夫單位按楊寧[4]主編的《家禽生產(chǎn)學(xué)》中蛋品質(zhì)的測定方法測定。
蛋重:用電子天平稱量蛋重,精確到0.01 g。
儲藏?fù)p失為鵪鶉蛋放冰箱中儲藏一周后損失的重量占原重量的百分比。
蛋黃、蛋白水分按GB/T—6433飼料中水分干物質(zhì)含量的測定,蛋黃灰分按GB/T—6434飼料中灰分含量的測定,粗脂肪測定按GB/T—6433飼料中粗脂肪含量的測定方法-索氏浸提法,膽固醇含量、蛋白含量、甘油三酯、游離脂肪酸用試劑盒按說明書測定。
采用Microsoft Office Excel 2003對試驗結(jié)果進(jìn)行運(yùn)算處理,SPSS11.5軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,用LSD法作多重比較。
表3 蘋果渣發(fā)酵飼料及中草藥對鵪鶉產(chǎn)蛋性能的影響
由表3可以看出:儲藏?fù)p失C組比A組降低了33.93%,差異顯著(P<0.05),表明中草藥單獨使用,降低了鵪鶉蛋的儲藏?fù)p失。
熟蛋率B、D組比A組分別提高了1.65%、0.99%,差異顯著(P<0.05),表明飼料中加蘋果渣發(fā)酵飼料后能提高鵪鶉蛋熟蛋率。
蛋黃率B、C組比 A組提高了9.76%、8.31%(P<0.05),說明中草藥組能提高營養(yǎng)物質(zhì)豐富的蛋黃比率。降低蛋白比率,兩者配伍效果更好。其它指標(biāo)A、B、C、D四組差異不明顯(P>0.05)。
表4 蘋果渣發(fā)酵飼料及中草藥對鵪鶉蛋黃品質(zhì)的影響
由表4可以看出:蛋黃水分B、D組與A組之間差異顯著(P<0.05),蛋黃水分B、D組比A組分別降低了2.49%、2.18%(P<0.05),表明飼料中加蘋果發(fā)酵飼料后能減少鵪鶉蛋黃中的水分,增加營養(yǎng)物質(zhì)含量。B組的蛋黃水分的減少還是主要靠蘋果發(fā)酵飼料的作用,而中草藥的效果不是很明顯。蛋黃灰分D組與其他三組之間的差異顯著,加入蘋果發(fā)酵飼料后蛋黃的灰分含量增加了10.90%(P<0.05)。
蛋黃膽固醇含量C組比A組顯著降低了20.52%(P<0.05),游離脂肪酸含量C組顯著高于其他組,比對照組高出26.78%(P<0.05),比D組高出41.14%(P<0.01),說明中草藥的飼用可有效地降低蛋黃膽固醇的含量,提高游離脂肪酸含量。蛋黃甘油三酯(Triglyceride)含量D組比A組極顯著降低,表明蘋果發(fā)酵飼料對蛋黃甘油三酯的作用明顯,使甘油三酯的含量降低。
試驗中添加蘋果渣發(fā)酵飼料的兩組蛋黃水分明顯低于對照組,熟蛋率顯著高于對照組。蘋果渣發(fā)酵飼料降低了蛋黃水分的含量,使得蛋黃中營養(yǎng)物質(zhì)的含量增加,提高了鵪鶉蛋的營養(yǎng)價值。本試驗結(jié)果與楊福有[5]用青貯蘋果渣等量代替麩皮,雞蛋品質(zhì)有所改善效果接近,蘋果渣發(fā)酵飼料氨基酸組成較合理,菌體蛋白含量高,生物效價高,微生物在成長時還產(chǎn)生胞外酶等生物活性物質(zhì)。對鵪鶉新陳代謝、免疫調(diào)節(jié)等具有重要作用。同時對蛋黃灰分的含量影響顯著,提高了灰分含量,鄭學(xué)斌等[6]的研究說明益生素能影響蛋中礦物質(zhì)的含量,可提高灰分含量,與本試驗的數(shù)據(jù)相符,這主要是因為蘋果渣發(fā)酵飼料富含豐富的有益菌和礦物質(zhì),吸收轉(zhuǎn)化效果好。
蘋果渣發(fā)酵飼料較對照組降低了蛋黃甘油三酯的含量,游離脂肪酸含量也下降了,但未達(dá)到顯著水平。甘油三酯是長鏈脂肪酸與甘油形成的脂肪分子,是人體內(nèi)含量最多的脂類,甘油三酯分解產(chǎn)物可作為能量被大部分組織利用。長鏈脂肪酸對乳酸菌等有益菌敏感度大,對大腸桿菌、鏈球菌敏感度小,D組蛋黃甘油三酯含量低,可能是蘋果渣發(fā)酵飼料中乳酸菌等有益菌的作用。Leontow?icz M[7]進(jìn)行動物實驗研究發(fā)現(xiàn),蘋果渣和甜菜渣都可以改善人工高膽固醇大鼠(Wistar rats)的脂代謝,降脂作用的主要因素是可溶性組分。Shin-Kyo Chung[8]進(jìn)行大鼠(Sprague-Dawley rats)試驗研究指出,蘋果渣和蘋果渣乙醚提取物都有降低肝毒,預(yù)防肝損傷的作用。因而得以驗證,蘋果渣使膽固醇含量下降,但沒達(dá)到顯著程度。游離脂肪酸由脂肪脂解而生成,測定游離脂肪酸可以了解脂肪代謝的情況。蘋果渣發(fā)酵飼料組游離脂肪酸與對照組的差異不顯著,但較對照組減少了13.80%,這可能是蘋果渣中富含蘋果多酚,而使用蘋果多酚能有效地抑制組胺的游離,間接降低了游離脂肪酸??偟膩碚f蘋果渣發(fā)酵飼料促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成,從而使蛋中的蛋白質(zhì)含量明顯提高,脂肪、膽固醇含量下降,多酚與有益菌使甘油三酯、膽固醇降低,蛋品質(zhì)有所改善。因而蘋果渣發(fā)酵飼料促進(jìn)了鵪鶉各營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝,改善各生理組織的功能從而改善蛋品質(zhì)。
本次試驗儲藏?fù)p失,蛋黃率兩個指標(biāo)中,中草藥添加劑組與配伍組效果顯著,本試驗喂中草藥添加劑的鵪鶉蛋儲藏?fù)p失明顯下降,改善了蛋的品質(zhì),有利于蛋品的保存,提高了營養(yǎng)物質(zhì)豐富的蛋黃比率,降低蛋白比率。賈海燕[9]使用松針、陳皮和何首烏,按不同比例飼養(yǎng)北京白羽鵪鶉產(chǎn)蛋性能提高了,料蛋比降低了,各中草藥組在哈夫單位、蛋黃指數(shù)、蛋黃比率上都有一定提高,本研究與其結(jié)果大致相同,這可能是中草藥中含有葉黃素,具有抗氧化的功能,是良好的自由基清除劑,且中草藥中有特殊生理活性的物質(zhì)、多種礦物元素,抗菌、抗氧化活性高,導(dǎo)致此效果。
本試驗所用中草藥添加劑的主要作用:補(bǔ)中益氣,健脾開胃,抗菌消炎,調(diào)節(jié)脂代謝的各種酶的活性,從而起到增產(chǎn)降脂作用。胡忠澤[10]、劉璐[11]等研究的復(fù)方中草藥添加劑(山楂、決明子、大黃)有效降低蛋黃膽固醇的含量,本試驗的結(jié)果顯示與其吻合。程小曲[12]研究益壽飲中草藥添加劑,表明其可降低血清膽固醇水平,抑制脂肪肝形成。其機(jī)理可能是中草藥中的總皂甙,通過抑制外源性膽固醇吸收,抑制內(nèi)源性膽固醇生成,保護(hù)肝功能,促進(jìn)肝細(xì)胞內(nèi)的膽固醇代謝并通過清除體內(nèi)過剩的自由基達(dá)到抑制肝臟中過氧化脂質(zhì)升高,降低血脂等途徑,大大降低血清總膽固醇[13]。本研究蛋黃中游離脂肪酸(FFA)與TG呈正相關(guān),與王鳳清[14]研究結(jié)論相似,中草藥組游離脂肪酸(FFA)與TG顯著升高,其機(jī)理可能是FFA使血糖升高,FFA抑制葡萄糖氧化與攝取,抑制肌糖原的合成,從而抑制外周葡萄糖的利用,F(xiàn)FA還可以促進(jìn)糖異生作用從而使血糖升高,間接影響脂類代謝。
本次試驗中蘋果渣發(fā)酵飼料與中草藥配伍后能提高熟蛋率,提高蛋黃率,降低蛋白率而單方面喂蘋果渣發(fā)酵飼料或中草藥時效果不是很明顯。丁柯等研究[15]測定乳酸桿菌與貫眾、郁金、黃茂等15種中草藥的相互作用,結(jié)果顯示中草藥能在一定程度上促進(jìn)乳酸桿菌的增殖,這都說明中草藥與蘋果渣發(fā)酵飼料中有益菌發(fā)生了協(xié)同作用,可能是因為蘋果渣發(fā)酵飼料中有大量的有益菌產(chǎn)生多種酶,中草藥添加劑有多糖、生物活性物質(zhì),促進(jìn)有益菌在肌體發(fā)揮作用,有益菌在腸道的作用促進(jìn)了中草藥的吸收。蛋黃水分含量與對照組有顯著差異,說明兩者配伍可提高蛋黃中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度,除了蛋黃水分外,兩者配伍對蛋黃中成分的影響不是很顯著,對于兩者配伍方面的研究還要更深入的進(jìn)行,使得它們在配伍時可揚(yáng)長避短,能有效地提高鵪鶉蛋蛋黃的品質(zhì)。
中草藥單獨使用降低了儲藏?fù)p失,蛋黃率。同時配伍使用儲藏?fù)p失也較低,說明這是中草藥起作用了。蘋果渣發(fā)酵飼料在影響熟蛋率方面效果好,使蛋黃的水分顯著減少,蛋黃灰分提高。
中草藥組比對照組蛋黃膽固醇含量顯著降低,游離脂肪酸含量顯著升高,說明中草藥的飼用可有效地降低蛋黃膽固醇的含量,提高游離脂肪酸含量。
蘋果渣發(fā)酵飼料組蛋黃甘油三酯(Triglycer?ide)含量D組顯著降低,說明蘋果發(fā)酵飼料對蛋黃甘油三酯的作用明顯,蛋黃中游離脂肪酸與甘油三酯呈正相關(guān)。