鄧江山綜述， 趙玉武審校

星形膠質(zhì)細胞在哺乳動物腦內(nèi)是神經(jīng)元數(shù)量的5倍，參與了營養(yǎng)代謝、腦內(nèi)離子和水平衡、腦血流量和突觸傳遞的調(diào)節(jié)、血腦屏障正常功能的維持、膠質(zhì)瘢痕修復和灰白質(zhì)發(fā)育［1，2］。星形膠質(zhì)細胞足突，腦血管內(nèi)皮細胞以及相鄰內(nèi)皮細胞之間的緊密連接，周圍細胞和基質(zhì)一起構成了血腦屏障。除了與腦微血管密切的接觸，星形膠質(zhì)細胞大量的突起包繞在突觸周圍以及延伸到腦室腔表面形成膠質(zhì)界膜，共同構成了對腦內(nèi)液體調(diào)節(jié)的結構基礎。腦內(nèi)液體在腦血管腔、細胞間隙和腦細胞內(nèi)不停交換，若在腦內(nèi)代謝失衡，過度積聚即可能發(fā)生腦水腫。星形膠質(zhì)細胞上存在大量水通道蛋白，離子通道和轉運體，現(xiàn)就其參與腦內(nèi)水、離子代謝及腦水腫形成方面簡要綜述。

1 與轉移水有關的生物學基礎

1.1 谷氨酸轉運體 神經(jīng)突觸傳遞使得突觸間隙谷氨酸濃度升高，星形膠質(zhì)細胞發(fā)揮主要清除作用，以保證正常神經(jīng)活動進行。星形膠質(zhì)細胞膜上含有兩種高親和力轉運體(excitatory amino acid transporter1，EAAT1)和 EAAT2(excitatory amino acid transporter2，EAAT2)。EAAT1轉移水基本是等滲轉運，對細胞內(nèi)滲透壓影響不大，但神經(jīng)細胞攝取過多的谷氨酸并伴隨水的進入能引發(fā)細胞體積增大。另一方面，谷氨酸濃度過高時激活谷氨酸促代謝性受體，引發(fā)細胞水腫，其機制為細胞內(nèi)鈣庫鈣釋放，激活鈣調(diào)蛋白激酶和一氧化氮合酶，通過蛋白激酶G途徑使得水通道蛋白-4(aquaporin-4，AQP4)發(fā)生磷酸化，增加AQP4對水的通透性［3］。不同部位的星形膠質(zhì)細胞對谷氨酸誘發(fā)腫脹反應不一，發(fā)現(xiàn)大腦皮質(zhì)和海馬較小腦相對容易發(fā)生興奮性氨基酸毒性水腫，可能是因為腦內(nèi)各部位谷氨酸轉運體及AQP4分布不一致引起［4］。

1.2 離子通道

1.2.1 鉀通道 K+平衡電位為細胞膜靜息電位主要組成部分，復極化后細胞外過高的K+需要迅速被清除，星形膠質(zhì)細胞不斷攝取K+通過縫隙連接網(wǎng)絡緩沖細胞外K+濃度以保證神經(jīng)元活動正常進行［5］。Kir4.1是星形膠質(zhì)細胞膜上已發(fā)現(xiàn)5種鉀通道中最主要的一種，轉移鉀具有雙向性，能根據(jù)細胞內(nèi)外鉀離子濃度差來攝取或排出鉀。其主要位于星形膠質(zhì)細胞包繞在突觸、血管周圍和軟腦膜下的足突上面。K+的吸收伴有水的進入，水的進入主要通過AQP4［6］。

1.2.2 NKCC NKCC(Na+/K+/CL-)同向轉運體單向協(xié)同轉運1Na+、1K+、2CL-，有兩種亞型，NKCC1 和 NKCC2。其中NKCC2僅存在于腎臟，NKCC1分布于多種細胞包括星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元，轉移離子的同時伴隨水的轉移。在腦缺血和腦創(chuàng)傷中，當K+濃度很高時，此時單純鉀通道不足以轉移過多的鉀離子，NKCC通道被激活。當星形膠質(zhì)細胞上各種鉀通道發(fā)揮“緩沖鉀”作用時，大量K+進入細胞，細胞內(nèi)離子濃度升高導致滲透性水轉移引起細胞體積增大。據(jù)報道，谷氨酸能增加NKCC1活性，導致細胞腫脹［7］。

1.2.3 體積調(diào)節(jié)性陰離子通道(volume regulated anion channels，VRACs) 目前尚不清楚VRACs是單獨的一種離子通道，還是不同離子通道的復合體。在低滲環(huán)境中培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞發(fā)生形態(tài)變化，細胞體積增大激活VRACs，激活后除了排除CL-，還釋放興奮性氨基酸包括谷氨酸和天冬氨酸、?；撬帷TP［8］。細胞內(nèi)溶質(zhì)的排出有利于細胞滲透壓恢復平衡和細胞體積回到正常。AQP4基因敲除大鼠VRACs表達量下調(diào)，提示血管周圍星形膠質(zhì)細胞足突膜上水通道和離子通道之間存在密切作用，共同調(diào)節(jié)腦內(nèi)水平衡［9］。

1.3 AQP4 AQPs是細胞膜上的跨膜水通道蛋白，具雙向水通透性，哺乳動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的13種水通道蛋白中［10］，AQP4在腦內(nèi)含量最豐富，主要分布于包繞毛細血管周圍的星形膠質(zhì)細胞足突、室管膜細胞及室管膜下星形膠質(zhì)細胞足突形成的膠質(zhì)界膜上，在鄰近毛細血管的足突上密度最高。AQP4本身的表達數(shù)量，在星形膠質(zhì)細胞足突上的準確定位以及與離子通道、血腦屏障之間的相互作用都可以影響水的通透性［11］。

2 星形膠質(zhì)細胞膜“極性”結構

星形膠質(zhì)細胞膜表面的分子結構分布呈非均質(zhì)性，特異性分布在靠近細胞外基質(zhì)側膜上，呈現(xiàn)“極性”狀態(tài)。用冰凍蝕刻技術觀察生理狀態(tài)下軟腦膜下和腦微血管旁的星形膠質(zhì)細胞終足，發(fā)現(xiàn)在面臨基質(zhì)側足突膜上存在大量“方形陣列”結構(orthogonal arrays of intramembranous particles，OAPs)。

2.1 OAPs結構基礎 AQP4可能是OAPs的主要分子基礎［12］，證據(jù)包括:AQP4缺乏的小鼠OAPs結構消失;AQP4轉染的中國倉鼠卵巢細胞能形成OAPs結構;抗AQP4抗體標記直接覆蓋了OAPs結構。由于翻譯起始位置不同，AQP4包括兩種亞型M1和M23，兩者首先聚合成四聚體，然后再進一步排列成更高級“方形陣列”。M1單純表達時，不能形成穩(wěn)定的 OAPs結構，形成穩(wěn)定的 OAPs結構需要 M23的參與［13，14］。但是Rossi認為M23也可直接由M1mRNA翻譯生成，于是在單獨存在M1的情況下也可形成OAPs結構［15］。在某些病理狀態(tài)下，AQP4同樣可以非OAPs結構形式存在于星形膠質(zhì)細胞膜上，說明OAPs結構的形成需要某種內(nèi)在因素的參與和維持，目前認為除了AQP0和AQP4以不同數(shù)量的四聚體構成更復雜的結構，其他的AQPs均不形成更高級結構［14］。

2.2 Agrin Agrin是一種肝素硫酸蛋白聚糖，其存在于細胞外基質(zhì)中。當星形膠質(zhì)細胞足突膜遠離血管旁和軟腦膜下基質(zhì)時，OAPs結構明顯減少，由此推測星形膠質(zhì)細胞膜“極性”的形成可能與細胞外基質(zhì)有關。Noell在存在agrin介質(zhì)上培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞膜上AQP4表達量增強，形成OAPs結構，水轉移能量增強［16］，敲除Agrin基因后發(fā)現(xiàn)小鼠星形膠質(zhì)細胞足突膜上OAPs結構明顯減少。體外培養(yǎng)無Agrin的情況下，野生型小鼠和Agrin基因敲除小鼠兩種來源的星形膠質(zhì)細胞膜上均不能形成OAPs，而經(jīng)檢測AQP4的表達量在蛋白表達水平和轉錄水平均無差異［17］。Fallier-Becker觀察到類似的結果，通過對存在Agrin培養(yǎng)基上培養(yǎng)來自于基因敲除小鼠和野生型小鼠的星形膠質(zhì)細胞，發(fā)現(xiàn)AQP4表達水平無差異，冰凍切片觀察OAPs密度較高，同時星形膠質(zhì)細胞在低滲環(huán)境下水通透性增加。以上充分說明了Agrin有利于AQP4在星形膠質(zhì)細胞足突膜上聚集形成OAPs結構，從而增強轉移水的能力［18］。Agrin有不同亞型，主要包括神經(jīng)元型A0B0和內(nèi)皮細胞型A4B8。內(nèi)皮型A0B0促使AQP4形成小的集合體，神經(jīng)元型A4B8使得OAPs密度在某些地方明顯增加，說明兩種Agrin均能促使AQP4的聚集，但是后一種效果更明顯［16］。綜上，從體內(nèi)和體外均說明了Agrin能促進小鼠腦內(nèi)AQP4形成OAPs結構。

2.3 DDC復合體 AQP4并不是以單個水通道的形式鑲嵌在細胞膜上，而是與抗肌萎縮蛋白聚糖復合物(dystroglycan-dystrophin complex，DDC)連接被錨定在血管旁星形膠質(zhì)細胞膜足突上［19，20］。DDC復合體在肌肉系統(tǒng)中研究較多，其位于肌細胞膜上，連接細胞外基質(zhì)成分和肌膜，以在肌收縮過程中發(fā)揮穩(wěn)定結構的作用［21］，近來也發(fā)現(xiàn)其在腦內(nèi)發(fā)揮著重要作用。肌營養(yǎng)不良蛋白聚糖是DDC的重要組成部分，包括α和β兩個亞基。α-dystroglycan與細胞外基質(zhì)如Agrin連接;β-dystroglycan是一個跨膜蛋白，將α-dystroglycan與細胞骨架蛋白和其他胞內(nèi)蛋白連接，例如dystrophin和αsyntrophin。另外，α-Dystrobrevin蛋白與dystrophin蛋白相互連接?；蚯贸夹g證明，在缺乏dystrophin-71或α-syntrophin大鼠，AQP4在星形膠質(zhì)細胞膜足突上的“極性”分布明顯減少。Nicchia觀察兩種dystrophin缺陷小鼠品種，DP71KO(缺乏膠質(zhì)細胞dystrophin-71基因產(chǎn)物)和mdx3cv小鼠(所有dystrophin亞型均明顯減少)，發(fā)現(xiàn)存在于血管旁星形膠質(zhì)細胞上的AQP4“極性”分布依賴于dystrophin，而位于小腦的顆粒細胞層以及軟腦膜下星形膠質(zhì)細胞足突和室管膜細胞上AQP4分布不依賴于dystrophin，說明了血腦屏障與AQP4關系密切，血管旁AQP4受dystrophin調(diào)控，而腦膜下AQP4不受其調(diào)控［19］。在實驗性腦脊髓炎動物模型中，觀察到βdystroglycan被炎癥激活的細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)清除后，OAPs結構能形成，但在星形膠質(zhì)細胞足突上特異性定位被破壞［22］。另外選擇性基因敲除dystroglycan基因后，血管旁和皮質(zhì)淺層星形膠質(zhì)細胞足突上OAPs結構大大減少，甚至血管旁足突上AQP4表達也減少［23］。α-Dystrobrevin基因敲除后，在 dystrophins蛋白存在情況下同樣導致AQP4和Kir4.1分布改變而蛋白表達量不受影響，在整個膜上彌散性分布［24］。以上說明了DDC復合體中任何一種蛋白與AQP4在膜上的準確定位都非常相關。細胞外基質(zhì)Agrin對AQP4形成OAPs結構有重要作用，OAPs結構主要出現(xiàn)在面臨細胞外基質(zhì)一側足突膜上，主要是為了建立水通道的“極性”分布，有利于迅速且直接轉移水。

3 星形膠質(zhì)細胞與血腦屏障

血腦屏障作為腦實質(zhì)和外周循環(huán)系統(tǒng)之間的一道彌散性屏障，通過機械屏障作用、電荷阻力和轉運系統(tǒng)共同調(diào)節(jié)血管內(nèi)和腦實質(zhì)之間的物質(zhì)交換。腦微血管表面大約99%以上被星形膠質(zhì)細胞足突覆蓋，血管內(nèi)皮細胞的發(fā)育依賴于細胞周圍環(huán)境。星形膠質(zhì)細胞除了對血腦屏障的形成有關，對正常血腦屏障功能的維持也至關重要。足突膜上OAPs“極性”分布結構對血腦屏障完整性的維持非常重要。間接證據(jù)證明:腦膠質(zhì)母細胞瘤血腦屏障緊密連接蛋白claudin-3喪失，血腦屏障遭破壞，OAPs相關的“極性”分布結構消失。當Agrin表達時，occludin、claudin-5存在，說明了在膠質(zhì)母細胞瘤中 Agrin與血腦屏障損害之間存在某種相關性［25］。Zhou報道AQP4基因敲除大鼠，腦微血管結構發(fā)生改變，緊密連接破壞，血腦屏障通透性明顯增加，血管旁星形膠質(zhì)細胞足突腫脹［26］。但隨后Saadoun報道，AQP4基因敲除大鼠未見明顯腦水腫，內(nèi)皮細胞間緊密連接完整，血腦屏障結構正常［27］。敲除α-Dystrobrevin后，不僅破壞星形膠質(zhì)細胞足突細胞膜上分子的“極性”分布，而且發(fā)現(xiàn)血腦屏障被破壞［24］，則充分說明了星形膠質(zhì)細胞膜上分子結構對維持血腦屏障完整性發(fā)揮重要作用。

4 星形膠質(zhì)細胞與腦水腫

4.1 星形膠質(zhì)細胞體積調(diào)節(jié)機制 星形膠質(zhì)細胞膜上含有多種離子通道，AQP4，氨基酸轉運體，攝納大量離子和神經(jīng)遞質(zhì)后，細胞內(nèi)滲透壓升高，水分伴隨進入胞內(nèi)，引發(fā)細胞體積生理性一過性增大，激活星形膠質(zhì)細胞體積調(diào)節(jié)機制［28］。細胞體積增大激活一系列生理反應，引發(fā)細胞排出各種物質(zhì)及水以恢復正常細胞體積［8，29］。參與體積調(diào)節(jié)的離子通道有 VRACs，CL-通道，Kir4.1。生理狀態(tài)下，隨著神經(jīng)活動發(fā)生，星形膠質(zhì)細胞足突表現(xiàn)為短暫一過性體積增大，當細胞體積調(diào)節(jié)機制受損則可能發(fā)生細胞水腫。

4.2 細胞性水腫 當腦組織發(fā)生缺氧或葡萄糖供應不足時，細胞膜Na+-K+-ATP泵因ATP供應不足發(fā)生功能障礙，正常的膜內(nèi)外Na+、K+梯度不能維持，同時細胞內(nèi)代謝產(chǎn)物不能排除，導致細胞內(nèi)物質(zhì)聚集，滲透壓增高，水分由于滲透梯度進入細胞內(nèi)引起細胞腫脹。與神經(jīng)元相比，星形膠質(zhì)細胞負責攝取細胞外K+和谷氨酸，細胞內(nèi)滲透壓更容易增高，因此發(fā)生細胞性腦水腫時，星形膠質(zhì)細胞足突腫脹往往為早期主要表現(xiàn)［30］。AQP4基因敲除可以延緩早期局灶性腦缺血、細菌性腦膜炎腦水腫形成。同樣，轉基因小鼠過度表達AQP4，可以加速水中毒性腦水腫的發(fā)生［31］。上述AQP4在細胞膜上的一些連接蛋白，同樣影響到AQP4的水通透性。敲除α-syntrophin大鼠由于AQP4不能很好錨定在足突膜上，可以延緩腦缺血腦水腫的發(fā)生［32］。在Agrin基因敲除大鼠，AQP4“極性”分布消失，細胞內(nèi)水腫延遲發(fā)生［33］，說明了星形膠質(zhì)細胞足突膜上分子“極性”分布方式確實與細胞性腦水腫有關。

4.3 血管性腦水腫 血管性腦水腫的發(fā)生是因為血腦屏障被破壞引起，包括腦出血、感染、腫瘤等。

實驗表明眾多MMPs參與破壞了血腦屏障，導致血管性腦水腫的發(fā)生。星形膠質(zhì)細胞足突主要表達MMP-2及其激活劑MT1-MMP。自發(fā)性高血壓大鼠大腦中動脈阻塞后，MMP-9在24h后生成和MMP2在第5天明顯增加，均與腦水腫的發(fā)展相一致［34］。在缺血再灌注模型中，梨狀皮質(zhì)血腦屏障再灌注3h后發(fā)生開放，同時MMP-2及其激活劑MT1-MMP一過性增加［35］，而claudin-5和occludin在恢復灌注3h后減少，24h后完全消失，如果予以MMPs抑制劑能消除這種效應［36］，充分說明了MMPs與血腦屏障破壞引起腦水腫之間的密切關系。水腫液的清除主要經(jīng)腦脊液循環(huán)通路，經(jīng)過內(nèi)皮細胞返回血液和經(jīng)過淋巴系統(tǒng)進入血液循環(huán)［37］，水腫液經(jīng)室管膜細胞和星形膠質(zhì)細胞界膜上的AQP4進入腦室腔為主要清除途徑。在眾多血管性腦水腫模型中，AQP4基因敲除小鼠較野生型小鼠腦水腫更加嚴重，說明了AQP4缺乏可能引起了水腫清除障礙。另外，星形膠質(zhì)細胞能清除細胞外水腫液中的血清蛋白，加速水腫液的吸收。

5 結語和展望

人們認識到星形膠質(zhì)細胞與腦微血管、神經(jīng)元的密切關系，于是提出“神經(jīng)血管單元”的概念，其在中樞神經(jīng)活動中發(fā)揮重要作用，尤其與腦內(nèi)微環(huán)境動態(tài)平衡密切相關。星形膠質(zhì)細胞與腦水腫關系毋庸置疑。腦水腫進展快，危害性大，做到有效控制必須進一步研究其發(fā)病環(huán)節(jié)。個人認為:星形膠質(zhì)細胞對水的轉移的影響最終歸結于AQP4的通透性變化，AQP4與水轉移之間的關系已經(jīng)很明確，對其調(diào)節(jié)因素和相關作用蛋白研究需要進一步深入;神經(jīng)血管單元組分之間存在相互作用，研究其組分之間的相互作用及其信號機制，有利于在腦水腫不同發(fā)展階段做到有效調(diào)控。

［1］Nag S.Morphology and properties of astrocytes［J］.MethodsMol Biol，2011，686:69-100.

［2］Sofroniew MV，Vinters HV.Astrocytes:biology and pathology［J］.Acta Neuropathol，2010，119(1):7-35.

［3］Gunnarson E，Zelenina M，Axehult G，et al.Identification of a molecular target for glutamate regulation of astrocyte water permeability［J］.Glia，2008，56(6):587-596.

［4］Han BC，Koh SB，Lee EY，et al.Regional difference of glutamate-induced swelling in cultured rat brain astrocytes［J］.Life Sci，2004，76(5):573-583.

［5］Rash JE.Molecular disruptions of the panglial syncytium block potassium siphoning and axonal saltatory conduction:pertinence to neuromyelitis optica and other demyelinating diseases of the central nervous system［J］.Neuroscience，2010，168(4):982-1008.

［6］MacAulay N，Zeuthen T.Water transport between CNScompartments:contributions of aquaporins and cotransporters［J］.Neuroscience，2010，168(4):941-956.

［7］KoyamaY.Transient treatments with L-glutamate and threo-betahydroxyaspartate induce swelling of rat cultured astrocytes［J］.Neurochem Int，2000，36(2):167-173.

［8］Pasantes-Morales H，Cruz-Rangel S.Brain volume regulation:osmolytes and aquaporin perspectives［J］.Neuroscience，2010，168(4):871-884.

［9］Benfenati V，Nicchia GP，Svelto M，et al.Functional down-regulation of volume-regulated anion channels in AQP4 knockdown cultured rat cortical astrocytes［J］.J Neurochem，2007，100(1):87-104.

［10］Zelenina M.Regulation of brain aquaporins［J］.Neurochem Int，2010，57(4):468-488.

［11］Wolburg H，Noell S，Mack A，et al.Brain endothelial cells and the glio-vascular complex［J］.Cell Tissue Res，2009，335(1):75-96.

［12］Wolburg H，Wolburg-Buchholz K，F(xiàn)allier-Becker P，et al.Structure and functions of aquaporin-4-based orthogonal arrays of particles［J］.Int Rev Cell Mol Biol，2011，287:1-41.

［13］Furman CS，Gorelick-Feldman DA，Davidson KG，et al.Aquaporin-4 square array assembly:opposing actions of M1 and M23 isoforms［J］.Proc Natl Acad Sci U SA，2003，100(23):13609-13614.

［14］Nicchia GP.Higher order structure of aquaporin-4［J］.Neuroscience，2010，168(4):903-914.

［15］Rossi A，Pisani F，Nicchia GP，et al.Evidences for a leaky scanning mechanism for the synthesis of the shorter M23 protein isoform of aquaporin-4:implication in orthogonal array formation and neuromyelitis optica antibody interaction ［J］.J Biol Chem，2010，285(7):4562-4569.

［16］Noell S，F(xiàn)allier-Becker P，Beyer C，et al.Effects of agrin on the expression and distribution of the water channel protein aquaporin-4 and volume regulation in cultured astrocytes［J］.Eur J Neurosci，2007，26(8):2109-2118.

［17］Noell S，F(xiàn)allier-Becker P，Deutsch U，et al.Agrin defines polarized distribution of orthogonal arrays of particles in astrocytes［J］.Cell Tissue Res，2009，337(2):185-195.

［18］Fallier-Becker P，Sperveslage J，Wolburg H，et al.The impact of agrin on the formation of orthogonal arraysof particles in cultured astrocytes from wild-type and agrin-null mice［J］.Brain Res，2011，1367:2-12.

［19］Nicchia GP，Rossi A，Nudel U，et al.Dystrophin-dependent and-independent AQP4 pools are expressed in the mouse brain［J］.Glia，2008，56(8):869-876.

［20］Nicchia GP，Cogotzi L，Rossi A，et al.Expression of multiple AQP4 pools in the plasma membrane and their association with the dystrophin complex［J］.J Neurochem，2008，105(6):2156-2165.

［21］Ehmsen J，Poon E，Davies K.The dystrophin-associated protein complex［J］.JCell Sci，2002，115(Pt 14):2801-2803.

［22］Wolburg-Buchholz K，Mack AF，Steiner E，et al.Loss of astrocyte polarity marks blood-brain barrier impairment during experimental autoimmune encephalomyelitis［J］.Acta Neuropathol，2009，118(2):219-233.

［23］Noell S，Wolburg-Buchholz K，Mack AF，et al.Evidence for a role of dystroglycan regulating the membrane architecture of astroglial endfeet［J］.Eur JNeurosci，2011，33(12):2179-2186.

［24］Lien CF，Mohanta SK，F(xiàn)rontczak-Baniewicz M，et al.Absence of glial alpha-dystrobrevin causes abnormalities of the blood-brain barrier and progressive brain edema［J］.J Biol Chem，2012，287(49):41374-41385.

［25］Rascher G，F(xiàn)ischmann A，Kroger S，et al.Extracellular matrix and the blood-brain barrier in glioblastoma multiforme:spatial segregation of tenascin and agrin［J］.Acta Neuropathol，2002，104(1):85-91.

［26］Zhou J，Kong H，Hua X，et al.Altered blood-brain barrier integrity in adult aquaporin-4 knockout mice［J］.Neuroreport，2008，19(1):1-5.

［27］Saadoun S，Tait MJ，Reza A，et al.AQP4 gene deletion in mice does not alter blood-brain barrier integrity or brain morphology［J］.Neuroscience，2009，161(3):764-772.

［28］Kimelberg HK.Astrocytic swelling in cerebral ischemia as a possible cause of injury and target for therapy［J］.Glia，2005，50(4):389-397.

［29］Verbalis JG.Brain volume regulation in response to changes in osmolality［J］.Neuroscience，2010，168(4):862-870.

［30］Nase G，Helm PJ，Enger R，et al.Water entry into astrocytes during brain edema formation［J］.Glia，2008，56(8):895-902.

［31］Yang B，Zador Z，Verkman AS.Glial cell aquaporin-4 overexpression in transgenic mice accelerates cytotoxic brain swelling ［J］.J Biol Chem，2008，283(22):15280-15286.

［32］Amiry-Moghaddam M，Otsuka T，Hurn PD，et al.An alpha-syntrophin-dependent pool of AQP4 in astroglial end-feet confers bidirectional water flow between blood and brain［J］.Proc Natl Acad Sci U SA，2003，100(4):2106-2111.

［33］Steiner E，Enzmann GU，Lin S，et al.Loss of astrocyte polarization upon transient focal brain ischemia as a possible mechanism to counteract early edema formation［J］.Glia，2012，60(11):1646-1659.

［34］Rosenberg GA，Navratil M，Barone F，et al.Proteolytic cascade enzymes increase in focal cerebral ischemia in rat［J］.J Cereb Blood Flow Metab，1996，16(3):360-366.

［35］Chang DI，Hosomi N，Lucero J，et al.Activation systems for latent matrix metalloproteinase-2 are upregulated immediately after focal cerebral ischemia［J］.J Cereb Blood Flow Metab，2003，23(12):1408-1419.

［36］Yang Y，Estrada EY，Thompson JF，et al.Matrix metalloproteinase-mediated disruption of tight junction proteins in cerebral vessels is reversed by synthetic matrix metalloproteinase inhibitor in focal ischemia in rat［J］.JCereb Blood Flow Metab，2007，27(4):697-709.

［37］Nag S，Manias JL，Stewart DJ.Pathology and new players in the pathogenesis of brain edema［J］.Acta Neuropathol，2009，118(2):197-217.