李 輝
河南商丘市第一人民醫(yī)院心血管內(nèi)二科 商丘 476100
心臟或腦缺血再灌注損傷是當(dāng)心臟或腦組織缺血后血管再通時,組織損傷不但不減輕,反而加重的現(xiàn)象,常見于臨床上進(jìn)行心臟或腦部手術(shù)時。大多研究[1-2]認(rèn)為,缺血再灌注損傷與組織的能量代謝障礙、鈣超載、細(xì)胞凋亡及氧自由基損傷等有關(guān)。丹參多酚酸鹽是提取于丹參的多酚酸鹽類化合物,具有活血、化瘀、通脈的作用,臨床上常用于冠心病穩(wěn)定型心絞痛的治療。作者主要觀察丹參多酚酸鹽對大鼠缺血再灌注損傷心臟、大腦組織中超氧化物歧化酶(SOD、丙二醛(MDA)水平的影響,以期探討其在抗心臟和腦組織缺血再灌注損傷中的作用。
1.1 材料 丹參多酚酸鹽購自上海綠谷制藥有限公司,批號:110523;SOD、MDA、考馬斯亮蘭測試盒均購自南京建成生物工程研究所,批號分別為:20110712、20110715、20110716;722型分光光度計(jì)為上海第一分析儀器廠產(chǎn)品。
1.2 實(shí)驗(yàn)動物 健康6月齡雄性 Wistar大鼠,體質(zhì)量306~329g,購自河南省實(shí)驗(yàn)動物中心。
1.3 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法 40只Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、DSF 2個劑量組(30mg/kg和15mg/kg),每組10只。DSF 2個劑量組大鼠均給予相應(yīng)濃度的藥物10 mL/kg皮下注射,而假手術(shù)組和模型組大鼠均給予相應(yīng)體積的生理鹽水注射,1次/d,共7d。末次給藥1h后,2%戊巴比妥鈉麻醉,氣管插管,上呼吸機(jī),建立左下肢股靜脈通道,肝素鈉肝素化,開胸,假手術(shù)組以外的其他3組結(jié)扎左冠狀動脈前降支中上1/3處和左右頸總動脈40min,再灌注100 min。
1.4 SOD及MDA的檢測 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,取出心臟和大腦,用4℃生理鹽水沖洗,濾紙吸干,分別剪取左心室和大腦組織,用生理鹽水制成勻漿,3 500r/min離心10min,取適量上清液,按試劑盒說明測定SOD和MDA水平??偟鞍琢繙y定采用考馬斯亮蘭法。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用χ2表示,比較采用單因素方差分析和LSD法,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。
表1 DSF對大鼠缺血再灌注損傷心臟、大腦組織SOD、MDA水平的影響
與模型組相比,DSF 2個劑量組大鼠心臟、大腦組織中SOD水平升高、MDA水平降低(P<0.05);DSF大劑量組心臟、大腦組織中SOD、MDA水平與DSF小劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
組織缺血再灌注損傷的眾多機(jī)制中,自由基損傷機(jī)制研究較為徹底和成熟,該理論認(rèn)為,當(dāng)心臟發(fā)生缺血再灌注損傷時,自由基清除酶類含量和活性均降低,且自由基的生成卻增加,這造成了機(jī)體內(nèi)自由基過量,從而引發(fā)脂質(zhì)過氧化的發(fā)生,大量生物膜受到損害,從而造成了機(jī)體線粒體產(chǎn)生能量及細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)等生物學(xué)行為不能順利進(jìn)行,同時還造成了機(jī)體內(nèi)MDA的過剩,而后者也能進(jìn)一步對機(jī)體造成損傷,形成了惡性循環(huán),這就是機(jī)體發(fā)生缺血再灌注損傷的自由基理論[3-4]。SOD是機(jī)體抗氧化的關(guān)鍵酶,廣泛存在于各種生物體內(nèi),其活力水平與機(jī)體正常的活動關(guān)系密切,同時其還是唯一能夠特異性清除超氧自由基的酶類,其活性的高低與缺血再灌注損傷的程度關(guān)系密切[5]。MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物之一,其水平高低反映脂質(zhì)過氧化程度,同時還間接反映機(jī)體自由基損傷程度[6]。本文結(jié)果顯示:模型組較假手術(shù)組大鼠心臟、大腦組織中SOD水平降低,而MDA水平升高,提示造模成功;DSF 2個劑量組較模型組SOD水平升高、MDA水平降低,提示DSF對缺血再灌注損傷心臟、大腦具有抗氧化作用;DSF 2個劑量組SOD、MDA水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示其作用可能具有一定的劑量依賴性。DSF對缺血再灌注損傷心臟和大腦具有抗氧化作用,可能具有減輕心臟和大腦缺血再灌注損傷的作用。
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