周 萌 朱旺明 汪福保 羅祖征 譚永剛 崔祥東 韋 宏 楊獻(xiàn)秀

(廣州市信豚水產(chǎn)技術(shù)有限公司，廣東廣州 510640)

生魚(yú)，學(xué)名雜交鱧，屬于烏鱧和斑鱧的遠(yuǎn)緣雜交后代，具有明顯的遠(yuǎn)緣雜種優(yōu)勢(shì)，如肉質(zhì)好、生長(zhǎng)速度快、抗病力強(qiáng)、個(gè)體大、病害少、耐運(yùn)輸?shù)?。自從生魚(yú)苗種成功培育以后，已得到大面積推廣養(yǎng)殖，僅廣東省生魚(yú)的養(yǎng)殖面積就超過(guò)4 000 hm2，并向江蘇、浙江、湖南、湖北等內(nèi)陸省份不斷延伸，已成為我國(guó)一種重要淡水養(yǎng)殖品種。

烏賊膏作為一種飼料原料，對(duì)魚(yú)蝦有明顯的誘食作用，可提高飼料的適口性和利用率，在水產(chǎn)飼料中有著廣泛的應(yīng)用，市場(chǎng)需求量連年上升。但是由于烏賊膏來(lái)源不穩(wěn)定，水分及脂肪含量高，在儲(chǔ)存、運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中極易酸敗變質(zhì)，質(zhì)量控制不好則易影響其使用效果。酵母膏是利用優(yōu)質(zhì)的新鮮啤酒酵母為原料，通過(guò)酶解、脫色脫臭、分離和濃縮技術(shù)精制而成的一種新型飼料原料，由于其富含游離氨基酸、小肽、核苷酸、β-葡聚糖、甘露寡糖等小分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可顯著提高飼料對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的誘食性，改善水產(chǎn)動(dòng)物消化道菌群，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率，促進(jìn)生長(zhǎng)[1]。本文將以生魚(yú)為研究對(duì)象，研究飼料中添加烏賊膏和酵母膏對(duì)其生長(zhǎng)性能、腸道健康的影響，為生魚(yú)實(shí)用飼料配方的優(yōu)化提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

在生魚(yú)商品飼料（魚(yú)粉33%、豆粕24%、高筋面粉28%、玉米蛋白粉4%、噴霧干燥血粉3%、魚(yú)油3%、磷脂油1.5%、磷酸二氫鈣1.5%、預(yù)混料2%）中分別添加1%、2%的酵母膏，1%、2%的烏賊膏及其混合物（1%酵母膏+1%烏賊膏），用面粉和豆粕調(diào)節(jié)飼料粗蛋白含量，使所有飼料等氮（粗蛋白43.23%、粗脂肪8.74%），與對(duì)照組共組成6種試驗(yàn)飼料，制成膨化飼料，于陰涼干燥處保存待用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用魚(yú)種購(gòu)自佛山市南海區(qū)某生魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng),于廣州信豚南海淡水研究基地的池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)兩周,然后挑選規(guī)格整齊、體質(zhì)健康的1 080條生魚(yú)隨機(jī)放入該池塘的18個(gè)同規(guī)格的網(wǎng)箱中(2.0 m×1.5 m×1.5 m),每個(gè)網(wǎng)箱60尾魚(yú)[初重(73.91±1.44)g/尾]，每個(gè)處理3個(gè)網(wǎng)箱。試驗(yàn)期間，每天投喂兩次（10：00和16：00），日投飼率為體重的2%～4%，根據(jù)天氣、水溫、生魚(yú)每天的攝食情況進(jìn)行調(diào)整。試驗(yàn)期間水溫27～34℃，溶解氧濃度＞5.0 mg/l，氨氮濃度＜0.1 mg/l，亞硝酸鹽氮濃度＜0.005 mg/l。試驗(yàn)共進(jìn)行8周。

1.3 取樣與分析測(cè)試

試驗(yàn)結(jié)束前空腹24 h，然后每箱魚(yú)分別稱(chēng)重、計(jì)數(shù)，并從每箱中隨機(jī)取10尾魚(yú)，測(cè)量體長(zhǎng)、體重、內(nèi)臟重、肝重、腸長(zhǎng)、腸重，并取背肌混合樣于-4℃冰箱中保存，用于測(cè)定肌肉營(yíng)養(yǎng)組成。

臟體比（%）=內(nèi)臟重×100/體重；

肝體比（%）=肝臟重×100/體重；

腸體比（%）=腸道重×100/體重；

腸長(zhǎng)比（cm/cm）=腸長(zhǎng)/體長(zhǎng)。

分別采用105℃恒溫干燥法、凱氏定氮法、索氏提取法及550℃灼燒法測(cè)定肌肉的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量。

自前腸（離胃下端1 cm處）剪下2 cm左右的腸道組織，迅速放入組織固定液固定，制作組織切片在顯微鏡下觀察，從每個(gè)處理切片中選取效果最佳的3張切片拍照記錄，用于腸壁組織結(jié)構(gòu)觀察。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

用統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS 11.0 for windows進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析統(tǒng)計(jì)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，經(jīng)過(guò)單因素方差分析，使用Duncan's多重比較法分析數(shù)據(jù)之間的差異顯著性，顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 生長(zhǎng)性能（見(jiàn)表1）

表1 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對(duì)生魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

由表1可見(jiàn)，飼喂不同飼料生魚(yú)的增重率依次為：2%酵母膏組＞（1%酵母膏+1%烏賊膏）組＞1%酵母膏組＞1%烏賊膏組＞2%烏賊膏組＞對(duì)照組，其中1%和2%酵母膏組、混合組與對(duì)照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。飼料系數(shù)以2%酵母膏組顯著低于對(duì)照組、1%烏賊膏組、2%烏賊膏組和混合組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 形體指標(biāo)及體組成（見(jiàn)表2、表3）

表2 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對(duì)生魚(yú)形體指標(biāo)的影響

表3 飼料中添加烏賊膏和酵母膏對(duì)生魚(yú)背肌營(yíng)養(yǎng)組成的影響（%）

由表2可見(jiàn)，飼料中添加酵母膏使生魚(yú)的肝體比、臟體比、腸體比及腸長(zhǎng)比均有不同程度的下降，但臟體比和腸長(zhǎng)比在各組之間差異不顯著。2%的酵母膏組的肝體比顯著低于對(duì)照組和1%烏賊膏組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）；1%酵母膏組腸體比顯著低于對(duì)照組、1%烏賊膏組和2%烏賊膏組（P＜0.05），其它各組之間差異不顯著（P＞0.05）。飼料中添加烏賊膏和酵母膏對(duì)生魚(yú)背肌營(yíng)養(yǎng)組成的影響見(jiàn)表3。飼料中添加烏賊膏或酵母膏對(duì)生魚(yú)背肌的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均沒(méi)有顯著影響（P＞0.05），但與其它各組相比，飼料中添加1%和2%烏賊膏背肌的粗脂肪含量略低，粗灰分含量略高。

2.3 腸道組織切片觀察（見(jiàn)圖1）

圖1 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對(duì)生魚(yú)腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，飼料中添加1%和2%的酵母膏，生魚(yú)腸道皺襞的密度和高度明顯增加，幾乎填滿整個(gè)腸腔。飼料中添加1%和2%烏賊膏，生魚(yú)的腸壁厚度增加，但腸道皺襞的密度減小，以2%烏賊膏組尤為明顯?；旌咸砑咏M的腸道組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與2%酵母膏組相似。

3 討論

3.1 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對(duì)生魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

飼料中添加酵母膏，生魚(yú)的增重率顯著上升。且隨著酵母膏添加量的增加，生魚(yú)的增重率有升高的趨勢(shì)，這可能是由于酵母膏中所含的多種功能性小分子物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)作用所致。酵母膏中所含的豐富的氨基酸、小肽及B族維生素是動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育必需的營(yíng)養(yǎng)素，所含的核苷酸不僅是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，還是蛋白質(zhì)合成必需的中間體，在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、代謝、能量和功能調(diào)節(jié)等方面具有重要作用。快速生長(zhǎng)的動(dòng)物本身合成的核苷酸無(wú)法滿足機(jī)體的需要，必須由外源供給[2]。酵母膏中含有的葡聚糖和甘露寡糖對(duì)于增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫能力具有重要作用，減少機(jī)體為支持免疫應(yīng)答而消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，降低免疫應(yīng)答中產(chǎn)物對(duì)攝食和生長(zhǎng)的抑制作用，從而促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)。核苷酸、葡聚糖和甘露寡糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)及免疫的促進(jìn)作用已有大量報(bào)道[3-8]。

本試驗(yàn)中，飼料中添加烏賊膏對(duì)生魚(yú)的增重率也有一定程度的提高，但與對(duì)照組之間差異不顯著，且隨著添加量的升高，生魚(yú)的增重率有下降的趨勢(shì)。這可能是由于烏賊膏富含水分及不飽和脂肪酸，在儲(chǔ)存、運(yùn)輸、飼料加工等過(guò)程中極易酸敗變質(zhì)[9]，且容易富集重金屬元素鎘[10]，長(zhǎng)期添加可能對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)造成潛在的危害。根據(jù)國(guó)家對(duì)漁用配合飼料鎘安全限量（NY5070—2002）的規(guī)定，海水魚(yú)及蝦類(lèi)配合飼料中的鎘含量不得高于3.0 mg/kg，其它漁用配合飼料中不得高于0.5 mg/kg。因此，在使用烏賊膏作為水產(chǎn)飼料原料時(shí)，應(yīng)做好品質(zhì)的控制，并在有條件時(shí)，就其安全添加量做相應(yīng)的科學(xué)研究。

3.2 飼料中添加酵母膏和烏賊膏對(duì)生魚(yú)腸道組織結(jié)構(gòu)的影響

動(dòng)物腸道是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場(chǎng)所，黏膜皺襞的高低和疏密、腸絨毛的密度與高度等與消化吸收能力密切相關(guān)，腸皺襞和腸絨毛的密度越高、長(zhǎng)度越長(zhǎng)，則表明單位面積的細(xì)胞數(shù)增加，消化吸收功能也增強(qiáng)[11]。而腸壁厚度的增加，則營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收通過(guò)的屏障增加，會(huì)影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)，從而影響動(dòng)物的生長(zhǎng)速度[12]。另外，研究證實(shí)，小腸重量減輕、長(zhǎng)度變短，避免代償性增生，可減少機(jī)體內(nèi)臟器官的維持需要，更有利于生長(zhǎng)[12-14]。

本研究結(jié)果表明，隨著飼料中酵母膏添加量的增加，生魚(yú)腸壁變薄，腸皺襞和腸絨毛的密度和高度有明顯增加，腸長(zhǎng)比和腸體比下降，使腸道的形態(tài)和健康得到改善，這可能也是飼料中添加酵母膏能提高生魚(yú)的生長(zhǎng)性能的原因之一。至于酵母膏促進(jìn)腸道健康的原因，可能是于其內(nèi)富含益生元——甘露寡糖有關(guān)。研究表明，甘露寡糖能促進(jìn)有益菌增殖，改善腸道微生態(tài)，提高機(jī)體免疫力，在提高幼齡動(dòng)物生長(zhǎng)、降低死亡率方面有明顯作用。有關(guān)甘露寡糖對(duì)促進(jìn)腸道的發(fā)育、改善腸道微生物菌群、促進(jìn)生長(zhǎng)的作用已在羅非魚(yú)[15-16]、鯉魚(yú)[17]、虹鱒[18]、異育銀鯽[19]、黃顙魚(yú)[8]中得到證實(shí)。另外，研究表明，酵母膏中的β-葡聚糖能在腸道微生物的作用下生成短鏈脂肪酸，而短鏈脂肪酸能促進(jìn)腸黏膜的生長(zhǎng)，因此，β-葡聚糖也可通過(guò)加強(qiáng)皮膚和黏膜屏障而發(fā)揮作用，并通過(guò)增加腸道分泌型IgA的分泌量而減少致病微生物對(duì)腸道的黏附[20]。本研究中添加酵母膏的生魚(yú)腸壁變薄可能也是由于這個(gè)原因。除此之外，酵母膏中還含有豐富的游離氨基酸、核苷酸及B族維生素，也能為腸道的健康發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

隨著飼料中烏賊膏添加量的升高，生魚(yú)的腸道健康似乎有惡化的趨勢(shì)。這可能與影響生長(zhǎng)的原因是一樣的。腸道不僅是食物消化、吸收和代謝的主要器官，物質(zhì)代謝和能量代謝非常旺盛，而且是重要的分泌和免疫器官，因此極易受到各種有害物質(zhì)的攻擊，誘發(fā)腸道疾病。腸道損傷在慢性應(yīng)激狀態(tài)下，表征不易察覺(jué)，但長(zhǎng)期下來(lái)對(duì)腸道健康危害極大，最終影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。烏賊膏中潛在的有毒、有害物質(zhì)可能對(duì)腸道的生長(zhǎng)和發(fā)育產(chǎn)生不良影響，相關(guān)的數(shù)據(jù)還有待于進(jìn)一步研究獲取。

4 結(jié)論

飼料中添加1%、2%的酵母膏及1%酵母膏+1%烏賊膏能顯著提高生魚(yú)的生長(zhǎng)性能，改善腸道的組織結(jié)構(gòu)和健康，添加2%酵母膏的優(yōu)勢(shì)更明顯。飼料中添加1%和2%的烏賊膏對(duì)生魚(yú)生長(zhǎng)性能的提高不如酵母膏明顯，且隨著添加量的增加，其生長(zhǎng)性能和腸道健康狀況有下降的趨勢(shì)。在生魚(yú)飼料中酵母膏可以完全替代烏賊膏，建議在生魚(yú)配合飼料中添加1%～2%的酵母膏，過(guò)量使用烏賊膏可能對(duì)生魚(yú)的生長(zhǎng)有不利影響。