洪尼寧，顏修剛，皮 泉，華 瑩，李基棕

（貴州省動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽550008）

衣原體目（Chlamydiales）的成員是一類專性細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物，可劃分為4個科，其中的衣原體科（Chlamydiaceae）包括衣原體屬（Chlamy dia）和嗜性衣原體屬（Chlamydophila），這2個屬又分別包含有3個及6個種［1］。嗜性衣原體引起的衣原體?。–hlamydiosis）是導(dǎo)致動物和人流產(chǎn)的一個主要原因［2－3］。嗜性衣原體多呈混合感染，流產(chǎn)嗜性衣原體（Chlamydophila abortus），以前也稱作鸚鵡熱衣原體（Chlamy dia psittaci）流產(chǎn)亞型，在牛、羊、馬、豬體內(nèi)很容易檢測到［4］，能導(dǎo)致反芻動物和豬孕育后期流產(chǎn)，在極少數(shù)情況下孕婦感染也會導(dǎo)致急性病癥和流產(chǎn)發(fā)生［5］。

我國自20世紀(jì)70年代從羊身上分離到衣原體以來，有關(guān)衣原體病的報道不在少數(shù)。周繼章等［6］2007年統(tǒng)計有6個省（市）和11個?。ㄊ校┓謩e報道有牛、羊衣原體病的流行，隨后寧夏［7］、青海［8－10］等?。▍^(qū)）也有血清學(xué)調(diào)查報道，這些從一個側(cè)面反映了動物衣原體病的流行情況。為深入了解該病在我省牛、羊群中的流行狀況，我們于2010年3月至2011年11月對省內(nèi)9個市（州）30個規(guī)模養(yǎng)殖場及12個鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）散養(yǎng)戶的牛、羊進(jìn)行了衣原體感染血清學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 材料

待檢血清采自省內(nèi)42個場（戶），按常規(guī)方法采血、分離血清后－20℃冷凍備用。衣原體IHA抗原、陰性標(biāo)準(zhǔn)血清、陽性標(biāo)準(zhǔn)血清為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（批號為100823）。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 按衣原體IHA說明書檢測。首先在110°V型有機(jī)玻璃板內(nèi)每孔加稀釋液75μL，取待檢血清25μL加入第1孔，呈4倍稀釋至第4孔，第4孔棄去25μL，每孔加稀釋好的抗原25μL，微型振蕩器上振蕩后置37℃作用2 h，被檢血清1∶16稀釋孔出現(xiàn)“＋ ＋”以上凝集者判為陽性。

1.2.2 數(shù)據(jù)分析 χ2檢驗使用下載軟件《卡方檢驗計算器》的四格表格式，將發(fā)生數(shù)（陽性數(shù)）和未發(fā)生數(shù)（陰性數(shù)）輸入相應(yīng)位置，即可得χ2值及P范圍。在計算小樣本的P值時，使用“直接概率”功能選項直接計算出P值。

2 結(jié)果

隨機(jī)抽取9個市（州）12縣8鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）散養(yǎng)戶及存欄數(shù)超過50頭的15個規(guī)模養(yǎng)牛場，采集牛血清838份。IHA檢測結(jié)果（表1）表明牛血清衣原體抗體總體陽性率為2.86%，牛群陽性率為39.13%（9／23），其中規(guī)模養(yǎng)殖場陽性率為46.67%（7／15），散養(yǎng)戶陽性率為25.00%（2／8），兩者陽性率差異不顯著（直接概率計算P＝0.22＞0.05）。奶牛、肉牛及耕牛陽性率差異不顯著（P＞0.05）。

隨機(jī)抽取15縣4鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）散養(yǎng)戶及存欄數(shù)超過200只的15個規(guī)模養(yǎng)羊場，共采集羊血清515份。IHA檢測結(jié)果（表2）表明羊血清衣原體抗體總體陽性率為36.12%，羊群陽性率為89.47%（17／19），其中規(guī)模養(yǎng)殖場陽性率為93.33%（14／15），散養(yǎng)戶陽性率為75.00%（3／4），規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶陽性率差異不顯著（直接概率計算P＞0.05）。黑山羊與白山羊、本地山羊、簡陽大耳羊相比陽性率差異不顯著（P＞0.05），黑山羊與黃羊相比陽性率偏高（χ2＝24.78，P＜0.01）。

表1 九市（州）牛血清衣原體抗體檢測結(jié)果Table1 The results of cattle chlamydial antibody test in nine regions of Guizhou province

表2 八市（州）羊血清衣原體抗體檢測結(jié)果Table2 The results of goat chlamydial antibody test in eight regions of Guizhou province

3 討論

本次衣原體感染血清學(xué)調(diào)查涉及貴州省12個縣的牛群、15個縣的羊群，樣品隨機(jī)抽取，采樣畜群未接種過衣原體疫苗。牛血清抗體陽性率較低（2.86%），羊血清抗體陽性率相對較高（36.12%），這為區(qū)別防控這類疫病提供了有價值的信息。

周繼章等［11］報道8?。▍^(qū)）部分牛血清衣原體抗體陽性率為23.2%（149／642），邱洪流等［12］報道寧夏牛、羊血清衣原體抗體陽性率分別為9.22%（107／1161）、22.06%（154／698），何存利等［7］調(diào)查寧夏規(guī)?；膛龊脱驁雠?、羊血清衣原體抗體陽性率分別為28.4%（109／384）和19.3% （113／586）。相比之下，我省這次牛血清衣原體抗體檢測陽性率相對較低（P＜0.01），這可能與飼養(yǎng)密度低、本地化程度高、引種把關(guān)嚴(yán)等因素有關(guān)。羊血清衣原體抗體陽性率與我省龍沖沖等［13］報道陽性率5.7%（11／194）及上述寧夏報道相比差異顯著（P＜0.01），就本次調(diào)查19群羊而言，個體陽性率≤10%有3群、10%～30%有7群、40%～60%有5群、＞60%有4群，如果羊群選擇不同，得出的陽性率是不同的，青海省曾報道陽性率變化范圍為8.6%～27.0%［14，8－10］也說明了這一問題。

血清學(xué)調(diào)查表明我省部分牛、羊群存在不同程度的衣原體感染，深入開展病原學(xué)調(diào)查，采取綜合防控措施顯得非常必要。

［1］Everett K D E，Bush R M，Andersen A A.Emended description of the order Chlamydiales，proposal of Parachlamydiaceae fam.nov.and Simkaniaceae fam.nov.，each containing one monotypic genus，revised taxonomy of the family Chlamydiaceae，including a new genus and five new species，and standards for the identification of organisms［J］.Int J Syst Evol Microbiol，1999，49（2）：415－440.

［2］Donn A，Jones G E，Ruiu A，et al.Serological diagnosis of chlamydial abortion in sheep and goats：comparison of the complement fixation test and an enzyme－linked immunosorbent assay employing solubilised proteins as antigen ［J］.Vet Microbiol，1997，59（1）：27－36.

［3］Szeredi L， Bacsadi A. Detection of Chlamydophila（Chlamydia）abortus and Toxoplasma gondii in smears from cases of ovine and caprine abortion by the streptavidin－biotin method［J］.J Comp Pathol，2002，127（4）：257－263.

［4］Pantchev A，Sting R，Bauerfeind R，et al.Detection of all Chlamydophila and Chlamydia spp.of veterinary interest using species－specific real－time PCR assays［J］.Comp Immunol Microbiol Infect Dis，2010，33（6）：473－484.

［5］Thomson N R，Yeats C，Bell K，et al.The Chlamydophila abortus genome sequence reveals an array of variable proteins that contribute to interspecies variation ［J］.Genome Res，2005，15（5）：629–640.

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［7］何存利，史 曉，張皓弘.寧夏鸚鵡熱衣原體血清學(xué)調(diào)查［J］.上海畜牧獸醫(yī)通訊，2009（5）：25.

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［9］李 娟，李德壽.青海省海晏縣綿羊衣原體病的血清學(xué)調(diào)查［J］.中國動物檢疫，2011，28（6）：59.

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