黃 薇周建川何 健
(1.四川鐵騎力士實(shí)業(yè)有限公司馮光德實(shí)驗(yàn)室,四川綿陽621006;2.西南科技大學(xué),四川綿陽621000)
動(dòng)物腸道是養(yǎng)分吸收利用的關(guān)鍵部位。腸道內(nèi)寄生著大量的微生物,正常情況下,腸道內(nèi)有益菌處于優(yōu)勢(shì)地位,動(dòng)物表現(xiàn)出健康狀況。當(dāng)受某些內(nèi)外界因素不良影響時(shí),腸道內(nèi)有害菌大量繁殖,導(dǎo)致宿主疾病,破壞腸黏膜,使養(yǎng)分消化吸收率下降,從而導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能的下降。因此,維持腸道內(nèi)有益菌的優(yōu)勢(shì)地位,即微生態(tài)平衡,對(duì)動(dòng)物的健康及最佳生產(chǎn)性能的發(fā)揮是非常重要的。由于抗生素存在很多弊端,如在殺死有害菌的同時(shí),也殺滅有益菌,易導(dǎo)致二重感染等。營(yíng)養(yǎng)學(xué)家和微生態(tài)學(xué)家一直在尋找研究微生態(tài)制劑,研究和應(yīng)用較成功的活菌制劑(又稱益生素)、寡糖、酸化劑和酶制劑。在此對(duì)益生素作一綜述。
益生素又名促生素、競(jìng)生素、生菌素、活菌劑、微生態(tài)制劑等,是活的微生物飼料添加劑,在希臘語中意為“有利于生命”(Gibson等,2000)。益生素作為飼料添加劑始于Metehnikoff(1907)用牛奶調(diào)治幼畜腹瀉出現(xiàn)的菌群失調(diào)。而益生素(Probiotics)一詞首次出現(xiàn)于1965年,Lilly等將其定義為“由一種微生物分泌,刺激另一種微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)”。隨著對(duì)益生素的進(jìn)一步認(rèn)識(shí),Sogaard(1990)將其定義為被攝入動(dòng)物體內(nèi)后,參與腸內(nèi)微生物平衡,抑制腸內(nèi)有害微生物群落生長(zhǎng),或者通過增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能來預(yù)防疾病,從而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率的活的微生物。
益生素按照所用的菌種類型可以分為乳酸菌類、芽孢桿菌類、酵母菌類。
目前允許使用的安全的微生物品種見表1、表2。
益生素中的菌株種類很多,在畜牧生產(chǎn)中效果差異較大,但其主要作用機(jī)理如下:①產(chǎn)生抑菌物質(zhì);②生物屏障作用;③提高機(jī)體免疫機(jī)能;④與病原菌競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);⑤提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
1.2.1 乳酸菌類的作用機(jī)理
①乳酸鏈球菌可產(chǎn)生細(xì)菌素及過氧化氫,Biota等研究發(fā)現(xiàn),過氧化氫可使Fe2+、Fe3+與乳酸桿菌表面胰蛋白酶結(jié)合,致使病原菌不能從體內(nèi)得到Fe2+,有效地抑制了腸道內(nèi)大腸桿菌、沙門氏菌、梭狀芽孢桿菌的繁殖,消除有毒代謝產(chǎn)物,減少腸道疾病的發(fā)病率。
表2 美國(guó)允許使用的安全微生物品種
②乳酸菌通過糖蛋白或糖脂質(zhì)的糖鏈彼此結(jié)合,在黏膜表面形成一層菌膜,與致病菌競(jìng)爭(zhēng)消化腸道黏膜附著點(diǎn),從而對(duì)宿主起到占位保護(hù)作用。乳酸菌有加強(qiáng)腸道定植抗力、抵擋外來致病菌、抑制革蘭氏陰性菌過度繁殖和維持腸道內(nèi)生態(tài)平衡的作用。
③乳酸桿菌和雙歧桿菌所產(chǎn)生的乳酸、乙酸等有機(jī)酸不僅是動(dòng)物的能量來源,還可降低腸道pH值,為不解離脂肪酸分子傳遞斷裂電化學(xué),引起蛋白質(zhì)斷裂,從而抑制痢疾桿菌、傷寒沙門氏菌、副傷寒沙門氏菌、彎曲桿菌、葡萄球菌等致病菌在腸道內(nèi)的定植。
④乳酸菌能夠促進(jìn)免疫器官的發(fā)育成熟、刺激宿主建立完備的免疫系統(tǒng)。另外,其可刺激宿主產(chǎn)生免疫及清除功能,如通過活菌體內(nèi)或代謝產(chǎn)物中含的較高超氧化物歧化酶(SOD),增加黏膜表面和血清中I-gA、IgM、IgG水平,加強(qiáng)體液免疫,促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生,活化自然殺傷細(xì)胞并產(chǎn)生免疫球蛋白。
1.2.2 芽孢桿菌類的作用機(jī)理
①芽孢桿菌在腸道主要通過生物奪氧維持腸道生態(tài)平衡,這是因?yàn)槟c道原籍優(yōu)勢(shì)菌大多屬厭氧菌,而有害菌和外來菌多為需氧菌。
②拮抗病原微生物。
③產(chǎn)生多種有益代謝產(chǎn)物,可分泌多種酶類,參與動(dòng)物消化道“酶池”,促進(jìn)動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。Sogaard(1990)報(bào)道,枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌具有較強(qiáng)的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。
1.2.3 酵母菌類的作用機(jī)理
活酵母所產(chǎn)生的作用可以認(rèn)為是一種屏蔽效應(yīng),該效應(yīng)可改善消化道微生態(tài)環(huán)境,保護(hù)動(dòng)物消化道?;罱湍竿ㄟ^3個(gè)已得到科學(xué)證明的作用機(jī)制發(fā)揮其作用:
①通過產(chǎn)生可破壞梭狀芽孢桿菌(Clostridium)在腸道黏膜上所產(chǎn)毒素(A和B)的蛋白酶,減少由此造成的損傷,從而有助于減少腹瀉的發(fā)生。
②通過與有鞭毛的致病性細(xì)菌(如大腸埃希氏桿菌、沙門氏菌)結(jié)合形成復(fù)合物,并通過糞便將復(fù)合物排出體外,使有助于消化的菌群腸道中處于正態(tài)平衡狀態(tài)。
③通過刺激酶的活性、提高腸道上皮細(xì)胞的成熟程度、增強(qiáng)腸黏膜和腸壁的完整性,從而增強(qiáng)動(dòng)物免疫應(yīng)答能力,提高飼料利用率。
Mallo(2010)報(bào)道,飼料中添加糞腸球菌CECT4515 106CFU/g,112頭豬,每圈7頭,2個(gè)處理,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),飼養(yǎng)期28~56 d,試驗(yàn)結(jié)束,添加糞鏈球菌處理組末重增加7.7%(18.1vs19.5 kg,P<0.05),并且提高了豬的日增重 (392vs443 g/d,P<0.05)和飼料轉(zhuǎn)化率(1.74vs1.60)。提高了豬回腸、盲腸、糞便中乳酸菌的數(shù)量(7.9×106vs5.9×105,P<0.05;5.0×107vs.3.1×107,P<0.01;3.9×107vs.5.0×106,P<0.05),并且降低了回腸大腸桿菌的數(shù)量(1.2×105vs.1.3×106,P<0.01)。
Bon(2010)報(bào)道,4周齡仔豬,斷奶后飼喂6周2×109CFU/kg活酵母S.boulardii CNCM I-1079,接著飼喂3周1×109CFU/kg乳酸片球菌MA18/15M。益生素處理組顯著提高了飼料的轉(zhuǎn)化率(P<0.05)。降低了斷奶后4周腸道大腸桿菌數(shù)(3 log),降低了大腸菌群數(shù)(2 log),差異極顯著(P<0.01)。其中小腸絨毛高度、隱窩深度、杯狀細(xì)胞處理與對(duì)照組差異均不顯著(P>0.05)。
Hoang(2010)試驗(yàn),使用 96 頭 21~23 日齡斷奶仔豬 ,處理1:空白組;處理 2:LAB1[屎腸球菌Enterococcus faecium 6H2(3×108CFU/g)+ 嗜酸性乳桿菌Lactobacillus acidophilus C3(4×106CFU/g)+戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus D7(3×106CFU/g)];處理3:LAB2[屎腸球菌 E.faecium 6H2(3×108CFU/g)+嗜酸性乳桿菌L.acidophilus C3(4×106CFU/g)+植物乳桿菌 L..plantarum 1K8(2×106CFU/g)(1K8分離于結(jié)腸)];處理 4:LAB3[植物乳桿菌 L..plantarum 1K8(2×106CFU/g)+嗜酸性乳桿菌 L.acidophilus C3(4×106CFU/g)+植物乳桿菌 L..plantarum 1K8(2×106CFU/g)],試驗(yàn)結(jié)果在斷奶后的頭2周各益生素處理組仔豬的采食量、日增重、飼料轉(zhuǎn)化率均與對(duì)照組差異顯著(P<0.05),各處理間差異不顯著(P>0.05),斷奶后的3~5周各益生素處理組仔豬的采食量、日增重、飼料轉(zhuǎn)化率與對(duì)照組及各處理組間差異均不顯著(P>0.05)。益生素添加組在斷奶后14 d和35 d,小腸和盲腸乳酸和乙酸含量均較對(duì)照組提高,差異顯著(P<0.05),丙酸僅35 d差異顯著(P<0.05),14 d差異不顯著。丁酸在小腸和盲腸14 d和35 d差異均不顯著。斷奶后前2周處理組和對(duì)照組間飼料的OM、CP、CF的回腸表觀消化率(CIAD)顯著提高(P<0.05),各處理間差異不顯著(P>0.05)。處理組和對(duì)照組飼料CP和CF的全消化道表觀消化率(CTTAD)也顯著提高(P<0.05),而OM的CTTAD差異不顯著。斷奶后3~5周各處理和對(duì)照組間OM、CP、CF的CIAD和CTTAD差異均不顯著 (P>0.05)。在試驗(yàn)的第一周處理組和對(duì)照組間的腹瀉率和腹瀉指數(shù)沒有顯著的差異(P>0.05)。然而第2周益生素處理組顯著降低了仔豬的腹瀉率和腹瀉指數(shù)(P<0.05)。
Hoang等(2010)報(bào)道,復(fù)合乳酸桿菌制劑對(duì)大腸桿菌攻毒仔豬腹瀉影響,復(fù)合乳酸菌組顯著降低腹瀉指數(shù)(81%vs15%)。
也有報(bào)道稱,添加益生菌對(duì)仔豬的生產(chǎn)性能沒有影響。Strompfová等(2006)研究表明,添加屎腸球菌(EK13)對(duì)斷奶仔豬的生產(chǎn)性能無顯著影響,但有提高14日齡仔豬體重和日增重的趨勢(shì)。Broom等(2006)研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加1.4×109CFU/kg劑量的屎腸球菌SF68,對(duì)仔豬的生產(chǎn)性能和胃腸道內(nèi)的菌群數(shù)量無影響,但是在斷奶后20 d,血液IgG的水平有降低的趨勢(shì)。Taras等(2007)也發(fā)現(xiàn),添加屎腸球菌(NCIMB 10415)對(duì)斷奶仔豬的生產(chǎn)性能無顯著影響,但使飼料轉(zhuǎn)化率有所改善。
Nousiainen等(1993)報(bào)道26個(gè)使用乳酸菌產(chǎn)品的試驗(yàn)結(jié)果:16個(gè)試驗(yàn)結(jié)果豬的生長(zhǎng)性能得到改善,9個(gè)試驗(yàn)結(jié)果豬的生長(zhǎng)性能反而下降,8個(gè)試驗(yàn)結(jié)果豬的飼料轉(zhuǎn)化率得到提高,9個(gè)試驗(yàn)結(jié)果豬飼料轉(zhuǎn)化率卻降低了,乳酸菌制劑在豬上的作用及其機(jī)制尚需更多研究。
劉影等(2010)報(bào)道,日糧添加枯草芽孢桿菌可以減少哺乳仔豬的腹瀉,提高斷奶活仔數(shù)和斷奶體重,減少斷奶后的生長(zhǎng)抑制,促進(jìn)斷奶仔豬的生長(zhǎng)。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)潘康成教授(2006)的研究證明,在仔豬基礎(chǔ)日糧中添加的枯草芽孢桿菌制劑,使試驗(yàn)組比對(duì)照組的頭均日增重提高3.92%,飼料轉(zhuǎn)化率提高了5.96%,腹瀉率降低了5%,凈增重耗料成本降低了4.61%。蔡一鳴(1995)、曹國(guó)文(1997)用無毒芽孢桿菌治療仔豬黃痢、白痢,取得了較好療效,仔豬黃痢治愈率分別達(dá)96.18%、94.29%,仔豬白痢治愈率分別為96.94%、94.02%。張國(guó)龍等(1994)報(bào)道,35日齡斷奶仔豬日糧中添加0.2%~0.4%活菌制劑(主成分是蠟樣芽孢桿菌)可使糞中大腸桿菌總數(shù)明顯降低,同時(shí)血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性高于對(duì)照組35%(P<0.05)。曾東等(1995)研究了芽孢桿菌微生物飼料添加劑“8701”在不同營(yíng)養(yǎng)條件下對(duì)30~90 kg豬的生產(chǎn)性能的影響。結(jié)果表明,單獨(dú)添加“8701”在高營(yíng)養(yǎng)水平下可提高日增重7.6%,在低營(yíng)養(yǎng)水平下可提高日增重3.5%。
Chen等(2006)報(bào)道,日糧添加芽孢桿菌對(duì)育肥豬生產(chǎn)性能的影響(益生菌組:枯草芽孢桿菌1×107CFU/kg+凝固芽孢桿菌2×106CFU/kg+嗜酸乳桿菌5×106CFU/kg),48頭豬,起始體重90 kg,分別添加0.1%益生素、0.2%益生素,ADG均較對(duì)照組提高5.29%和11.44%,ADFI均較對(duì)照組提高1.60%和6.02%。DM消化率也較對(duì)照組提高1.15%和1.66%,N消化率也較對(duì)照組提高0.79%和3.88%。
胡友軍等(2003)報(bào)道,添加耐高溫活性酵母組的斷奶仔豬飼糧的生產(chǎn)性能(試驗(yàn)?zāi)┲?、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率)極顯著(P<0.01)優(yōu)于添加金霉素組,采食量有提高的趨勢(shì)(P=0.07);與金霉素聯(lián)合使用后飼料轉(zhuǎn)化率無顯著影響(P=0.13),且顯著降低了采食量(P<0.05)。添加耐高溫活性酵母組的斷奶仔豬腹瀉率極顯著(P<0.01)低于添加金霉素組,嚴(yán)重腹瀉率顯著(P<0.01)低于添加金霉素組;與金霉素聯(lián)合使用后斷奶仔豬腹瀉率無顯著差異。王玲等(2008)報(bào)道,早期斷奶仔豬口服活性酵母培養(yǎng)物有助于提高其生產(chǎn)性能,降低腹瀉率,提高機(jī)體細(xì)胞免疫水平。
應(yīng)用試驗(yàn)證實(shí),酵母菌能通過調(diào)整母豬消化道的微生態(tài)平衡,很好地解決其便秘問題,并提高母豬哺乳期的采食量和仔豬的斷奶成績(jī)。蔡銳芳等(2011)報(bào)道活酵母菌對(duì)哺乳母豬生產(chǎn)性能的影響表明,活酵母菌提高了哺乳母豬的采食量(P>0.05)和仔豬的窩增重(P<0.05)。2003年INZO公司在法國(guó)進(jìn)行的試驗(yàn)是選用60頭哺乳母豬,從母豬分娩前3周起至哺乳期結(jié)束,母豬日糧按1×109CFU/kg添加布拉酵母I-1079株,結(jié)果表明,在日糧中添加了布拉酵母I-1079株后,哺乳母豬的平均采食量從7.40 kg增加到8.48 kg,仔豬斷奶時(shí)的窩重較大,平均增加了7.12 kg。李彪等(2009)報(bào)道,添加活性酵母組母豬所產(chǎn)仔豬,21日齡斷奶前的平均日增重和斷奶重都顯著高于對(duì)照組,同時(shí),添加活性酵母具有提高哺乳母豬采食量、提高斷奶率及改善母豬胃內(nèi)菌群結(jié)構(gòu)的作用,其中母豬胃內(nèi)雙歧桿菌和厭氧菌的增加達(dá)到極顯著水平。
益生素已逐漸被認(rèn)為是最有潛力取代抗生素的產(chǎn)品之一,其中乳酸菌類、芽孢桿菌類、酵母菌類在豬的飼料中已經(jīng)得到廣泛的應(yīng)用,其中以乳仔豬應(yīng)用效果較為明顯。新益生素的研究也將是未來的發(fā)展方向,選育穩(wěn)定性好、安全性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)的益生菌菌種是今后益生素產(chǎn)品開發(fā)的關(guān)鍵,并需要改進(jìn)研究手段,進(jìn)一步弄清益生素的作用機(jī)制應(yīng)是推進(jìn)益生素科學(xué)應(yīng)用的重要前提。
[1]Etleva Veizaj-Delia,Thanas Piu,Pashk Lekaj,et al.Using combined probiotic to improve growth performance of weaned piglets on extensive farm conditions[J].Livestock Science,2010(134):249-251.
[2]J.J.Mallo,J.Rioperez,P.Honrubia.The addition of Enterococcus faecium to diet improves piglet's intestinalmicrobiota and performance[J].Livestock Science,2010(133):176-178.
[3]Melanie Le Bon,Helen E.Davies,Caitriona Glynn.Influence of probiotics on gut health in the weaned pig[J].Livestock Science,2010(133):179-181.
[4]Hoang Huong Giang,Tran Quoc Viet,Brian Ogle.Effects of different probiotic complexes of lactic acid bacteria on growth performance and gut environment of weaned piglets[J].Livestock Science,2010(133):182-184.
[5]Julia B Ewaschuk,Levinus A Dieleman.Probiotics and prebiotics in chronic inflammatory bowel diseases[J].World Journal of Gastroenterology,ISSN 1007-9327,2006
[6]Gregor Reid,Jeremy Burton.Use of Lactobacillus to prevent infection by pathogenic bacteria Microbes and Infection.2002(4):319-324
[7]劉影,王春林,成廷水,等.母豬和仔豬日糧中添加枯草芽孢桿菌對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].飼料工業(yè),2010,31(18):29-30.
[8]潘康成,黃許鋼,祝小,等.微生態(tài)制劑在斷奶小豬飼料中的應(yīng)用效果研究[J].四川畜牧獸醫(yī),2006,33(11):21-22.
[9]蔡一鳴,李密.菌痢康活菌劑預(yù)防和治療仔豬黃痢和白痢的試驗(yàn)[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,1995,21(11):36-37.
[10]曹國(guó)文,李建明.蠟質(zhì)芽孢桿菌懸浮劑治療仔豬下痢的試驗(yàn)[J].中國(guó)獸醫(yī)科技,1997,27(11):38-39.
[11]張國(guó)龍,李德發(fā).益微制劑對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能,氮平衡,糞中大腸桿菌數(shù)及血清SOD酶活性的影響[J].飼料研究,1994(9):2-6.
[12]曾東,陳代文.芽孢菌類微生物飼料添加劑“8701”飼喂生長(zhǎng)肥育豬的效果研究[J].四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1995,13(3):332-336.
[13]胡友軍,林映才,鄭黎,等.活性酵母對(duì)早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫機(jī)能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2003,15(4):49-53.
[14]王玲,蒲萬霞,扎西英派,等.益生酵母改善斷奶仔豬腸道健康、調(diào)節(jié)免疫功能和提高生產(chǎn)性能的作用研究[J].國(guó)外畜牧學(xué):豬與禽,2008,28(5):62-65.
[15]蔡銳芳,李鵬,張亞智,等.活酵母菌對(duì)哺乳母豬生產(chǎn)性能的影響[J].湖北畜牧獸醫(yī),2011,7:6-7.
[16]李彪,楊乃歡.活性酵母對(duì)經(jīng)產(chǎn)母豬生產(chǎn)性能的影響[J].飼料研究,2009,7:25-27.