蘭騰芳　鄭尊濤　李俊凱　陳立　方祖凱　杜鐵鋼

摘要：分析了氟環(huán)唑（Epoxiconazole）30%懸浮劑在不同地區(qū)葡萄中的殘留消解動(dòng)態(tài)以及收獲期葡萄中的最終殘留量，為制定氟環(huán)唑在葡萄上合理使用提供科學(xué)依據(jù)。建立了乙酸乙酯或乙腈超聲提取，經(jīng)弗羅里硅土柱凈化，采用反相高效液相色譜法分析氟環(huán)唑殘留的方法。該懸浮劑在葡萄和土壤中的半衰期分別為15.9 ～17.2 d和21.2～32.5 d；在最后一次施藥后30 d和40 d時(shí)葡萄中的殘留量為0.05 ～0.33 mg/kg。結(jié)果表明，按推薦劑量施藥，每季最多使用3次，距最后一次施藥30 d時(shí)葡萄中的殘留量低于0.5 mg/kg，推薦氟環(huán)唑在葡萄上的最高殘留限量為 0.5 mg/kg。

關(guān)鍵詞：氟環(huán)唑（Epoxiconazole）；消解動(dòng)態(tài)；葡萄；土壤

中圖分類號(hào)：S482.2；O657.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：0439-8114（2012）20-4613-03

氟環(huán)唑（商品名：歐博；英文通用名：Epoxiconazole），是一種內(nèi)吸性三唑類殺菌劑，由德國(guó)巴斯夫公司1983年開(kāi)發(fā)[1]。它可抑制病菌麥角甾醇的合成，阻礙病菌細(xì)胞壁的形成，提高幾丁質(zhì)酶活性，導(dǎo)致真菌吸器的收縮，抑制病菌侵入。對(duì)一些禾谷類作物病害具有較好防效[2]，可用于防治香蕉、芹菜、韭菜的葉斑病，瓜類豆類的白粉病，葡萄的炭疽病、白腐病、立枯病等[3]。目前，已有氟環(huán)唑殘留分析的報(bào)道。孫海濱等[4]研究了氟環(huán)唑在香蕉和土壤中的消解動(dòng)態(tài)，氣相色譜-氮磷檢測(cè)器進(jìn)行定量分析。汪紅等[5]使用乙腈進(jìn)行提取，弗羅里硅土固相萃取小柱進(jìn)行凈化及GC-ECD檢測(cè)，該方法的回收率高，重現(xiàn)性好。沈偉健等[6]報(bào)道了氣相色譜-負(fù)化學(xué)離子源質(zhì)譜測(cè)定大豆和玉米中氟環(huán)唑等12種三唑類殺菌劑的殘留量。關(guān)于氟環(huán)唑在葡萄上的消解動(dòng)態(tài)研究目前國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)到報(bào)道。本研究選擇北京和杭州進(jìn)行兩年田間試驗(yàn)，采用超聲波輔助提取，弗羅里硅土小柱凈化，高效液相色譜-紫外檢測(cè)器，建立了氟環(huán)唑的液相色譜分析方法，為準(zhǔn)確分析葡萄中的氟環(huán)唑殘留提供參考。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

Agilent 1200型HPLC儀（美國(guó)Agilent公司，配紫外檢測(cè)器），KQ-600型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器公司），OSB-2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛(ài)朗儀器有限公司），TDL-40B型離心機(jī)（江蘇瑞江離心機(jī)廠），PICO-17型離心機(jī)（美國(guó)Thermo Fisher科技公司），弗羅里硅土小柱（艾杰爾 1 000 mg/6 mL）。

純度≥99%的氟環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品由上海市農(nóng)藥研究所提供；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純?cè)噭?/p>

1.2方法

1.2.1氟環(huán)唑在葡萄上殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)葡萄生長(zhǎng)至半果大時(shí)，以375 mg.a.i/kg（制劑800倍稀釋）的劑量噴霧1次，于施藥后0、1、3、5、7、10、14、21、30和45 d，采集葡萄樣品，測(cè)定氟環(huán)唑在葡萄上的殘留消解半衰期。

1.2.2氟環(huán)唑在土壤中殘留消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)選15 m2白地，以200 mg.a.i/m2噴霧施藥1次，于施藥后0、1、3、5、7、10、14、21、30、45和60 d，采集0～10 cm表層土，測(cè)定氟環(huán)唑在土壤中的殘留消解半衰期。

1.2.3最終殘留的田間試驗(yàn)在葡萄幼果期以后，以100.0～187.5 mg.a.i/kg（制劑333.3～625.0 mg/kg，3 000～1 600倍稀釋），噴霧2～3次，施藥間隔10 d，于施藥后30 d和40 d采收葡萄樣品。

1.2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作稱取氟環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品于25 mL容量瓶中，乙腈溶解，配制成1 000 mg/L母液，并稀釋成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，4 ℃保存待用。

1.2.5葡萄樣品的提取與凈化 準(zhǔn)確稱取10.00 g葡萄樣品于50 mL塑料離心管中，加入20 mL乙酸乙酯，渦旋1 min，超聲提取10 min，3 500 r/min離心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，旋蒸近干；過(guò)弗羅里硅土小柱凈化。小柱分別先用5 mL 重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）和5 mL石油醚淋洗，再用15 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）溶解殘?jiān)?，收集洗脫液，濃縮近干，乙腈定容至2.5 mL，過(guò)膜，待測(cè)。

1.2.6土壤樣品的提取與凈化準(zhǔn)確稱取10.00 g 樣品于50 mL離心管中，加20 mL乙腈，渦旋1 min，超聲10 min提取，準(zhǔn)確加入5 g NaCl，手搖1 min，3 500 r/min 離心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，減壓旋蒸近干；過(guò)弗羅里硅土小柱凈化，小柱先用5 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）活化，5 mL石油醚淋洗，再用重蒸石油醚∶丙酮（7∶3，V/V）15 mL 溶解殘?jiān)?，收集洗脫液，濃縮近干，乙腈定容至2.5 mL，過(guò)膜，待測(cè)。

1.2.7測(cè)定條件色譜柱Agilent HC-C18 4.6 mm×250.0 mm，5 μm ，流動(dòng)相為乙腈∶水=55∶45（V/V），流速為0.8 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)215 nm；進(jìn)樣量20 μL，柱溫為室溫。

2結(jié)果與分析

2.1檢測(cè)方法的回收率、最小檢出限及線性范圍

分別在空白葡萄及土壤樣品中加入氟環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)樣品，添加濃度分別為0.05、0.50和2.00 mg/kg，設(shè)3個(gè)平行，色譜圖見(jiàn)圖1，3個(gè)添加水平氟環(huán)唑的回收率為81%～101%，變異系數(shù)<9.98%（表1）。氟環(huán)唑的最小檢出限為0.005 mg/kg。

在該色譜條件下，對(duì)0.05～5.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，氟環(huán)唑峰面積與進(jìn)樣濃度間呈良好線性關(guān)系，在葡萄和土壤基質(zhì)中標(biāo)準(zhǔn)樣品的線性方程分別為：y=87.843x+16.457；y=89.361x+12.205，相關(guān)系數(shù)分別為0.999 2和0. 999 3，保留時(shí)間約為13.8 min。

2.2氟環(huán)唑在葡萄和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)

氟環(huán)唑在北京和杭州兩地葡萄中的原始沉積量分別為0.97和1.42 mg/kg，在兩地土壤中的原始沉積量分別為2.48和0.41 mg/kg。數(shù)據(jù)顯示隨著時(shí)間的延長(zhǎng)氟環(huán)唑的殘留量逐漸下降。藥后間隔期與葡萄和土壤中殘留量呈指數(shù)關(guān)系，根據(jù)殘留動(dòng)態(tài)曲線方程Ct=C0e-kt得到列于表2的消解動(dòng)態(tài)回歸方程。

2.3氟環(huán)唑在葡萄和土壤中的最終殘留量試驗(yàn)

經(jīng)2011年兩地試驗(yàn)，氟環(huán)唑按推薦劑量和高劑量施藥2和3次，間隔30和40 d采收，檢測(cè)結(jié)果如下：間隔30 d的葡萄中的殘留量為0.06～0.33 mg/kg，間隔40 d為0.05 mg/kg。土壤中氟環(huán)唑殘留量間隔30 d為0.21～0.52 mg/kg，間隔40 d為 0.06～0.25 mg/kg。

3結(jié)論

田間試驗(yàn)結(jié)果表明，氟環(huán)唑在葡萄中的半衰期分別為17.2 d（北京）和15.9 d（杭州），與在香蕉（半衰期為7.2～9.9 d）、蘋果[7]中（半衰期為8.2～11.5 d）相比，半衰期相對(duì)較長(zhǎng)，主要原因可能與試驗(yàn)期間降雨量大小、次數(shù)以及光照條件等環(huán)境因素有關(guān)。

目前，日本規(guī)定谷類中氟環(huán)唑最高殘留限量值為0.5 mg/kg；澳大利亞規(guī)定梨中氟環(huán)唑最高殘留允許量值為0.5 mg/kg，香蕉中氟環(huán)唑最高殘留允許量值為1.0 mg/kg；新西蘭規(guī)定水果中氟環(huán)唑最高殘留允許量值為0.1 mg/kg；中國(guó)尚未制定氟環(huán)唑在葡萄中的最高殘留允許量值。因此，在本試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，參考世界各國(guó)對(duì)氟環(huán)唑的最高殘留允許量值，建議設(shè)立葡萄上氟環(huán)唑的最高殘留限量為0.5 mg/kg。

參考文獻(xiàn)：

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[3] 張秀珍.氟環(huán)唑在我國(guó)的登記情況[J].山東農(nóng)藥信息，2012（2）：10.

[4] 孫海濱，劉艷，劉景梅.氟環(huán)唑在香蕉和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥，2011，50（3）：206-208.

[5] 汪紅，李瑾，許超，等.氣相色譜測(cè)定蔬菜水果中氟環(huán)唑的殘留量[J].食品工業(yè)科技，2009，30（12）：270-275.

[6] 沈偉健，桂茜雯，余可垚，等.氣相色譜-負(fù)化學(xué)離子源質(zhì)譜測(cè)定大豆和玉米中12種三唑類殺菌劑的殘留量[J].色譜，2009，27（1）：91-95.

[7] 劉良柱，許應(yīng)明，黃永春，等.氟環(huán)唑在蘋果及土壤中的殘留動(dòng)態(tài)研究[J].現(xiàn)代科學(xué)儀器，2007（1）：61-63.