黃曲霉毒素，1993年被世界衛(wèi)生組織的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為1類致癌物。其中黃曲霉毒素B₁毒性和致癌性最強(qiáng)，而黃曲霉毒素M₁是黃曲霉毒素B₁的代謝物，主要存在于牛奶中。衛(wèi)生部官網(wǎng)一份有關(guān)食物中毒的說明文件指出，黃曲霉毒素主要損傷肝臟，致癌性很強(qiáng)，我國乳及乳制品中規(guī)定黃曲霉毒素M₁限量為0.5ttg／kg。

目前檢測黃曲霉毒素的方法通常為免疫親和層析凈化高效液相色譜法和酶聯(lián)免疫吸附法([uSA)這兩種方法。酶聯(lián)免疫吸附法(LllSA)操作簡單，快速，但靈敏度低且會(huì)出現(xiàn)假陽性，需使用免疫親和柱法進(jìn)行精確定性、定量，而免疫親和柱又存在使用繁瑣、價(jià)格昂貴、儲(chǔ)存條件苛刻，保存期短等缺點(diǎn)。

迪馬科技最新開發(fā)的快速ProElutTM固相萃取方法擁有與免疫親和柱法相當(dāng)?shù)母呔然厥章式Y(jié)果，但使用成本大大降低。ProElut_TM固相萃取法單個(gè)樣品的檢測成本為免疫親和柱法的1／4，酶聯(lián)免疫法的1／2，同時(shí)ProElut_TM固相萃取法簡單易操作、不需要專用的大型設(shè)備、對(duì)操作人員要求不高，特別適用于各種乳品生產(chǎn)企業(yè)及檢測機(jī)構(gòu)，將大大降低黃曲霉毒素的檢測成本。

1樣品準(zhǔn)備／提取

(1)牛奶、原料乳等液態(tài)奶制品

稱取5g樣品，加入5mL乙腈，渦旋混合1min：再加入10mL乙腈，渦旋混合1min：4000rpm離心5min，取上清液5mL，作為上樣液待凈化。

(2)奶粉、乳酪等固體奶制品

稱取2g樣品，加入5mL水，渦旋混合2min：加入5mL乙腈，渦旋混合1min：再加入1 0mL乙腈，渦旋混合1min：4000rpm離心5min，取上清液5mL，作為上樣液待凈化。

2SPE柱凈化——ProElutTM AFT黃曲霉毒素檢測專用柱1500mg／12mL(cat#65904)

(1)活化：10mL乙腈，流出液棄去：

(2)上樣：將上樣液加入柱中，接收流出液；

(3)洗脫：10mL乙腈洗脫，收集流出液。合并步驟(2)、(3)流出液：

(4)重新溶解：在40~C下用減壓蒸餾將流出液濃縮至大2mL，向旋蒸瓶中加,／XSmL無水乙醇，繼續(xù)減壓蒸餾近干，用10％乙腈水定容至0.5mL，供HPLC分析。

3分析條件

色譜柱：DiamonsiC18(2)，250mm×4.6mm×5um(Cat#99603)：

流速：1.0mL／min；

檢測器：熒光檢測器(Ex：365nm、Em：435nm)：

柱溫：30℃

進(jìn)樣量：20uL

流動(dòng)相：乙腈／水(25／75)。

4添加回收結(jié)果

(1)牛奶中黃曲霉毒素M1添加回收結(jié)果，見表1。

5結(jié)論

迪馬科技為乳制品檢測開發(fā)的新型，快速，低成本sPE法檢測乳制品中黃曲霉毒素M₁方法克服了免疫親和柱方法檢測費(fèi)用高、存儲(chǔ)條件苛刻、保質(zhì)期短等缺點(diǎn)，該方法具有操作簡單、結(jié)果重現(xiàn)性好、使用成本低、存儲(chǔ)方便等優(yōu)點(diǎn)，特別適合大中型乳品企業(yè)，乳品檢測機(jī)構(gòu)等采用。

迪馬科技ProElut_TM系列固相萃取柱能夠?qū)θ橹破坊|(zhì)進(jìn)行有效地提取和凈化，黃曲霉毒素M₁回收率高，重現(xiàn)性、穩(wěn)定性好，檢出限結(jié)果能夠滿足國標(biāo)對(duì)于黃曲霉毒素M₁的限量標(biāo)準(zhǔn)要求，值得作為種新型的乳制品中黃曲霉毒素M₁的檢測方法全面推廣。