王錦支,程姍姍,馮琳琳,蔣紅梅△

(1.貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生化科,貴陽 550004;2.貴陽醫(yī)學(xué)院臨床微免教研室,貴陽 550004)

52例2型糖尿病患者氧化應(yīng)激狀況分析*

王錦支1,程姍姍2,馮琳琳2,蔣紅梅2△

(1.貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院生化科,貴陽 550004;2.貴陽醫(yī)學(xué)院臨床微免教研室,貴陽 550004)

目的探討氧化應(yīng)激在2型糖尿病(T2DM)發(fā)生?發(fā)展中的作用?方法 選擇2010年6月至2011年2月貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的T2DM患者52例為治療組,取同期健康志愿者35例為對照組?采用比色法測定兩組總抗氧化能力(TAOC)?谷胱甘肽(GSH)?超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)指標(biāo),對兩組檢測指標(biāo)進(jìn)行比較?結(jié)果與對照組相比,治療組患者血清SOD?GSH及MDA水平明顯增高(P0.05)?與對照組相比,伴各種并發(fā)癥的T2DM患者血清GSH和MDA水平均明顯增高(P0.01);存在任何一種并發(fā)癥的T2DM患者?并發(fā)周圍神經(jīng)病變的T2DM患者?并發(fā)視網(wǎng)膜病變的T2DM患者及并發(fā)腎病的T2DM患者血清中SOD水平均高于無并發(fā)癥的T2DM患者(P0.05);并發(fā)腎病的T2DM患者較未并發(fā)腎病的T2DM患者血清MDA水平明顯增高(P0.05)?T2DM患者空腹血糖值與血清T-AOC?SOD?GSH?MDA水平均無明顯相關(guān)性(P0.05)?結(jié)論T2DM發(fā)生?發(fā)展過程中存在氧化應(yīng)激紊亂,提示高氧化水平可能在糖尿病腎病的發(fā)生?發(fā)展中起著重要的作用?

糖尿病,2型;氧化性應(yīng)激;糖尿病并發(fā)癥

近年來的研究提示,糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者體內(nèi)可能存在不同程度的氧化應(yīng)激紊亂[1-2],但目前詳細(xì)機(jī)制尚不明確?氧化應(yīng)激是體內(nèi)活性氧化物產(chǎn)生多于清除的氧化還原反應(yīng)失衡的病理狀態(tài),主要通過損傷的DNA堿基?蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物及脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物等參與許多慢性進(jìn)行性疾病的發(fā)生和發(fā)展[3]?糖尿病高血糖狀態(tài)下,一方面機(jī)體活性氧(reactive oxygen species,ROS)產(chǎn)生增多,形成過多氧自由基引起脂質(zhì)過氧化,使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,對核酸堿基及蛋白質(zhì)氨基酸進(jìn)行氧化修飾,使DNA和(或)蛋白質(zhì)損傷[4]?同時(shí),ROS還可以誘導(dǎo)產(chǎn)生內(nèi)皮素-1(endothelin,ET-1)?血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)?白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等炎性細(xì)胞因子及免疫標(biāo)志物,加重炎性細(xì)胞反應(yīng),進(jìn)而這些炎癥細(xì)胞因子反過來可以提高β細(xì)胞對自由基的敏感性,刺激炎癥細(xì)胞及β細(xì)胞產(chǎn)生更多的自由基,從而造成惡性循環(huán)[5]?現(xiàn)將本研究中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的檢測指標(biāo),如總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)?谷 胱 甘 肽 (glutathione,GSH)?超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的氧化應(yīng)激在糖尿病發(fā)生?發(fā)展中的作用報(bào)道如下?

1 資料與方法

1.2.1 一般資料 選擇2010年6月至2011年2月貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的T2DM患者52例為治療組,其中男32例,女20例;年齡46～80歲,平均63.10歲;葡萄糖氧化酶法測得血糖值為(10.36±4.27)mmol/L?所有患者均符合1999年WHO提出的糖尿病診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)[6]?根據(jù)眼底?尿微量清蛋白檢查,以及是否有糖尿病微血管并發(fā)癥對所有患者進(jìn)行分類?其中無糖尿病并發(fā)癥6例;糖尿病并發(fā)酮癥酸中毒13例,并發(fā)周圍神經(jīng)病變29例,并發(fā)腎病30例,并發(fā)視網(wǎng)膜病變28例,部分患者同時(shí)存在兩種或兩種以上并發(fā)癥?所有患者均予以藥物和(或)胰島素治療,不伴有腫瘤及其他自身免疫性疾病?取同期健康志愿者35例為對照組,其中男6例,女29例;年齡22～80歲,平均38.8歲;經(jīng)檢查血糖及其他生化指標(biāo)正常?

1.2 試劑與儀器 GSH?T-AOC?MDA?SOD檢測試劑盒購于南京建成生物公司,使用721型分光光度計(jì)進(jìn)行檢查?

1.3 指標(biāo)檢測 采集空腹靜脈血3～5mL,分離血清進(jìn)行測定?T-AOC采用Fe3+/Fe2+還原法測定,SOD采用黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶法測定,GSH采用5,5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)法[5,5-dithiobis(2-nitrobenzoic acid),DTNB]測定,MDA采用硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)測定?操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行?

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料以±s表示,組間比較采用t檢驗(yàn),以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?

2 結(jié) 果

2.1 T2DM患者血清氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測結(jié)果 與對照組相比,治療組患者血清SOD?GSH及 MDA水平明顯增高(P0.05);兩組血清T-AOC水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),見表1?

表1 兩組患者血清氧化應(yīng)激指標(biāo)比較(±s)

表1 兩組患者血清氧化應(yīng)激指標(biāo)比較(±s)

*:P0.05,與對照組比較?

組別 n T-AOC(U/mL)SOD(U/mL)GSH(g/L)MDA(nmol/mL)治療組 52 26.35±17.29 97.23±21.02* 15.25±4.33* 4.49±2.93*對照組 35 22.50±7.13 88.67±7.41 8.43±3.75 2.00±0.41

2.2 伴各種并發(fā)癥的T2DM患者血清各指標(biāo)分析 與對照組相比,伴各種并發(fā)癥的T2DM患者血清GSH和MDA水平均明顯增高(P0.01);存在任何一種并發(fā)癥的T2DM患者?并發(fā)周圍神經(jīng)病變的T2DM患者?并發(fā)視網(wǎng)膜病變的T2DM患者及并發(fā)腎病的T2DM患者血清中SOD水平均高于無并發(fā)癥的T2DM患者組(P0.05);并發(fā)腎病的T2DM患者較未并發(fā)腎病的T2DM患者血清MDA水平明顯增高(P0.05)?

2.3 T2DM患者空腹血糖值與各種檢測指標(biāo)的相關(guān)性分析T2DM患者空腹血糖值與血清T-AOC?SOD?GSH?MDA水平均無明顯相關(guān)性(P0.05),見表2?

表2 T2DM患者空腹血糖值與各種檢測指標(biāo)相關(guān)分析

3 討 論

葡萄糖在細(xì)胞線粒體中的代謝過程中可產(chǎn)生氧自由基[7],而糖尿病是一種葡萄糖代謝異常的疾病,可以導(dǎo)致組織細(xì)胞中氧自由基產(chǎn)生異常[8]?有學(xué)者認(rèn)為,經(jīng)典的糖尿病并發(fā)癥的多元醇途徑?糖基化終末產(chǎn)物途徑?蛋白激酶途徑和氨基己糖途徑均是高糖環(huán)境下線粒體呼吸鏈中氧自由基生成過多的結(jié)果,即高糖損傷的共同基礎(chǔ)——氧化應(yīng)激[9]?

關(guān)于糖尿病氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測結(jié)果文獻(xiàn)報(bào)道差異較大,Abou-Seif等[10]研究認(rèn)為,T2DM 患者SOD?過氧化氫酶活性降低,GSH含量減少?又有文獻(xiàn)報(bào)道,T2DM患者GSH含量明顯增加,SOD?GSH 活性顯著降低,T-AOC水平明顯減少[11]?本文對T2DM患者4項(xiàng)氧化應(yīng)激指標(biāo)進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示,T2DM患者反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度的MDA水平較健康人顯著增高(P0.05),尤其是并發(fā)腎病的T2DM患者該指標(biāo)增高更為明顯(P0.05),與文獻(xiàn)[12]相符?結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),T2DM患者體內(nèi)存在明顯的氧化應(yīng)激過程,可能在糖尿病腎病并發(fā)癥的發(fā)生?發(fā)展中起著重要的作用;T2DM患者血清T-AOC水平與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),GSH?SOD水平明顯高于對照組(P0.05),存在任何一種并發(fā)癥的T2DM患者?并發(fā)周圍神經(jīng)病變的T2DM患者?并發(fā)視網(wǎng)膜病變的T2DM患者及并發(fā)腎病的T2DM患者血清中SOD水平均高于無并發(fā)癥的T2DM患者組(P0.05),與文獻(xiàn)[13-14]不符?可見對于T2DM氧化應(yīng)激的研究文獻(xiàn)報(bào)道存在很大差異,可能與患者所處病程不同,接受的治療措施和藥物不同有關(guān)?有學(xué)者認(rèn)為,糖尿病患者服用磺脲類降糖藥(如瑞格列奈)或雙胍類降糖藥(如二甲雙胍),可降低游離脂肪酸和氧化產(chǎn)物(MDA等)水平,同時(shí)使抗氧化指標(biāo)SOD?GSH等水平增高[15]?本研究中T2DM患者多數(shù)已經(jīng)過一段時(shí)間的降糖或抗炎等治療,且大部分T2DM患者病情穩(wěn)定,使得體內(nèi)氧化應(yīng)激紊亂可能得到不同程度的改善,致使其抗氧化指標(biāo)表現(xiàn)為正?；虼鷥斝栽龈?

本研究結(jié)果還顯示,T2DM患者空腹血糖與各氧化指標(biāo)之間均無明顯相關(guān)關(guān)系,提示患者體內(nèi)氧化和抗氧化紊亂可能不是由于短期血糖波動的結(jié)果,而是一個(gè)長期慢性的過程?

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10.3969/j.issn.1671-8348.2012.18.024

B

1671-8348(2012)18-1850-02

* 基金項(xiàng)目:國家級教學(xué)團(tuán)隊(duì)資金資助項(xiàng)目[教高函(2009)18號];2008年度貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)基金資助項(xiàng)目(gzwkj2008-1-004)?△

,Tel:13608582902;E-mail:wjzdyx2009@126.com?

2011-06-15

2011-12-27)

?經(jīng)驗(yàn)交流?