張明子，玄龍洙，劉 匯

(吉林省延邊州食品藥品檢驗所，吉林 延吉 133000)

復(fù)方熊膽乙肝膠囊質(zhì)量標準收載于《國家藥品標準·新藥轉(zhuǎn)正標準(第三十四冊)》，原質(zhì)量標準中柴胡藥材的薄層色譜鑒別方法背景干擾較大，現(xiàn)象不甚明顯。為更有效的控制該制劑的質(zhì)量，筆者進行了修訂，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

CQX25－06型超聲波清洗器;硅膠G板(青島海洋化工廠生產(chǎn))。柴胡對照藥材(中國藥品生物制品檢定所，批號為0992－200001);復(fù)方熊膽乙肝膠囊(吉林敖東藥業(yè)集團延吉股份有限公司，批號分別為090201，090702，100201);試驗用水為純化水，其他化學試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備[1－2]

2.1.1 對照藥材溶液制備

取柴胡對照藥材1 g，加甲醇15 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，棄去乙醚液;再用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次10 mL，合并正丁醇提取液，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為對照藥材溶液。

2.1.2 供試品溶液制備

制備方法一:原標準方法為取本品內(nèi)容物2 g，加甲醇20 mL，回流提取1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，棄去乙醚液;再用水飽和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。

制備方法二:取本品內(nèi)容物10粒(4.5 g)，加甲醇30 mL，超聲提取30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加40%甲醇溶液10 mL分次溶解加在預(yù)先處理好的中性氧化鋁柱(100～200目，5 g，內(nèi)徑10～15 mm)上，用40%甲醇溶液100 mL洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，棄去乙醚液;再用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨試液40 mL洗滌1次，棄去氨試液;正丁醇液再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次40 mL，取正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。

制備方法三:取本品內(nèi)容物3 g，加甲醇25 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次15 mL，棄去乙醚液;再用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，用氨試液40 mL洗滌1次，棄去氨試液;正丁醇液再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次40 mL，取正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。

2.1.3 陰性對照品溶液制備

取不含柴胡的陰性樣品，按供試品溶液制備方法三制備陰性對照品溶液。

2.2 供試品制備方法選擇

照薄層色譜法[2005年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種供試品溶液、對照藥材溶液和陰性對照品溶液各3 μL，分別點于硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。結(jié)果制備方法一在與對照藥材色譜主斑點相應(yīng)的位置上，背景干擾較大，斑點顏色不太清晰;制備方法二較方法三稍微清晰，但上中性氧化鋁柱，洗脫較慢。故供試品溶液的制備選擇方法三(見圖1和圖2)。

圖1 制備方法一與制備方法三的比較(溫度27℃、相對濕度50%)

圖2 制備方法二與制備方法三的比較(溫度26℃、相對濕度62%)

2.3 展開劑選擇[1－2]

曾采用《國家藥品標準·新藥轉(zhuǎn)正標準(第三十四冊)》中的展開劑三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)與2005年版《中國藥典(一部)》中的展開劑乙酸乙酯－乙醇－水(8∶2∶1)進行比較，結(jié)果原標準展開劑比藥典展開劑斑點更清晰，且分離效果好。故對展開劑未作改進(見圖3和圖4)。

圖3 原標準展開劑薄層色譜圖

圖4 藥典展開劑薄層色譜圖

3 討論

原標準要求在同一展開劑下展開2次，修訂后因供試品提純，減少了雜質(zhì)干擾，只需1次展開也可見清晰的斑點。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業(yè)出版社，2005:198.

[2]國家藥典委員會.國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準·新藥轉(zhuǎn)正標準[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2003，34，92.