王淑斐 許金成 程明剛

目前對(duì)亞健康狀態(tài)(sub-health，SH)的成因、診斷及治療的研究很多，但大多數(shù)研究局限于各種社會(huì)、生理、心理應(yīng)激因素所致的機(jī)體一系列的生物學(xué)改變［1］，而基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代分析技術(shù)的應(yīng)用研究卻較少，尤其對(duì)老年人SH的研究成果不多，老年人機(jī)體免疫功能下降，尤其在不良刺激下更明顯，提示SH可能影響機(jī)體的免疫功能。本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)測(cè)定45例SH老年人血漿白細(xì)胞介素18(IL-18)和血清白細(xì)胞介素10(IL-10)水平，旨在探討細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)在SH老年人中的作用及意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 老年SH組45例，男28例，女17例，年齡60～72歲，平均(66.5±8.9)歲，老年前期SH組42例，男27例，女15例，年齡50～59歲，平均(54.5±7.8)歲，均符合亞健康的診斷標(biāo)準(zhǔn)(Delphi法)［2］，即在1年時(shí)間內(nèi)持續(xù)≥1月出現(xiàn)以下癥狀中至少1項(xiàng)者:疲勞、頭痛或頭暈、耳鳴、肩或腿麻木僵硬、咽部有異物感、心煩意亂、孤獨(dú)感、注意力不集中、焦慮、多夢(mèng)或休息不好、記憶力差、活力減退、對(duì)周?chē)挛锊桓信d趣、情緒差、工作覺(jué)得吃力、同事關(guān)系緊張、容易感冒或其他病、感覺(jué)有病但未確診。健康老年對(duì)照組30例，男17例，女13例，年齡60～71歲，平均(63.8±9.2)歲，經(jīng)過(guò)統(tǒng)一體檢的方法排除心、肝、肺、腎、內(nèi)分泌性、腫瘤和感染性等疾病，以及血尿常規(guī)、血脂、血糖、肝腎功能、心電圖、胸部X線、B超等均正常的健康者。

1.2 方法

1.2.1 血液標(biāo)本的采集及試劑:清晨取肘靜脈血4 ml，室溫下分離血清和血漿后-20℃保存至同批測(cè)定。IL-18和IL-10 ELISA試劑盒由深圳晶美生物工程公司(進(jìn)口分裝)提供。

1.2.2 血漿IL-18和血清IL-10水平測(cè)定:采用雙抗體夾心法(ELISA)，具體操作步驟嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，IL-18以ng/L、IL-10以pg/ml表示。

2 結(jié)果

2.1 血漿IL-18和血清IL-10水平 老年SH組血漿IL-18水平顯著高于對(duì)照組 (t=6.612，P＜0.01)和老年前期SH組(t=2.188，P＜0.05);血清IL-10水平則顯著低于對(duì)照組(t=11.229，P＜0.01)和老年前期SH 組(t=1.795，P ＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 3組血漿IL-18和血清IL-10水平比較(±s)

表1 3組血漿IL-18和血清IL-10水平比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，＊＊P＜0.01;與老年前期SH組比較，△P＜0.05

組別 n IL-18(ng/L) IL-10(pg/ml)30 188.3±52.6 71.3±15.1老年前期SH組 42 304.1±115.5＊＊ 36.1±17.1＊＊老年SH組 45 373.6±176.7＊＊△ 29.7±16.1對(duì)照組＊＊△

2.2 血漿IL-18水平與血清IL-10水平的相關(guān)關(guān)系老年SH組、老年前期SH組血漿IL-18水平與血清IL-10水平之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.882、-0.842，P＜0.01)，對(duì)照組血漿IL-18水平與血清IL-10水平之間無(wú)相關(guān)關(guān)系(r=-0.0841，P＞0.05)。

3 討論

近年來(lái)對(duì)SH的研究，已經(jīng)成為一個(gè)由醫(yī)學(xué)、心理學(xué)、社會(huì)學(xué)、哲學(xué)和人文科學(xué)等多學(xué)科交叉的最前沿的有關(guān)人類(lèi)健康的邊緣學(xué)科，對(duì)其成因、診斷及治療的研究進(jìn)入了空前活躍的階段。研究表明，老年人機(jī)體免疫功能尤其是T淋巴細(xì)胞功能下降，易患感染、腫瘤和自身免疫性疾病，免疫老化可表現(xiàn)在整體、細(xì)胞、分子和基因水平［3］。許多學(xué)者研究表明，老年人T細(xì)胞免疫功能低下，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)發(fā)生復(fù)雜變化，炎性細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)、IL-12等產(chǎn)生增多，抑炎因子如 IL-10、IL-4等產(chǎn)生減少［4］。IL-18是新近發(fā)現(xiàn)的白細(xì)胞介素，能強(qiáng)烈誘導(dǎo)T細(xì)胞和 NK 細(xì)胞產(chǎn)生 γ-干擾素(interferon γ，INF-γ)，促進(jìn)IL-1等促炎因子的產(chǎn)生，在免疫應(yīng)答中起重要介導(dǎo)作用［5］。因此，明確SH老年人的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡狀態(tài)及其之間的關(guān)系，對(duì)進(jìn)一步明確SH的發(fā)病機(jī)制以及尋找新的治療途徑具有一定的臨床意義。

本研究發(fā)現(xiàn)，老年SH組血漿IL-18水平顯著高于健康老年人和老年前期SH組(P均＜0.01)，推測(cè)其可能機(jī)制是:(1)免疫系統(tǒng)隨年齡增長(zhǎng)而發(fā)生進(jìn)行性退變，這種改變的逐漸積累導(dǎo)致機(jī)體對(duì)感染和接種疫苗應(yīng)答能力的降低。同時(shí)人體自然衰老，機(jī)體器官開(kāi)始老化出現(xiàn)體力不支，免疫功能低下是SH發(fā)生的主要機(jī)制之一［6-7］，已有研究表明，老年人細(xì)胞免疫功能下降，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡，易患感染、腫瘤等疾?。?］，本組研究結(jié)果與此類(lèi)似。因此，通過(guò)對(duì)免疫功能的檢測(cè)來(lái)評(píng)價(jià)SH的程度可能較為客觀，同時(shí)，通過(guò)免疫學(xué)途徑來(lái)控制SH的發(fā)生發(fā)展也將成為可能，已有研究表明應(yīng)用應(yīng)激蛋白提高機(jī)體免疫力可能是免疫疫苗治療后的又一種新的提高免疫力方法［8］。(2)SH時(shí)發(fā)生基因表達(dá)異常可能是其發(fā)病機(jī)制之一［6］，部分促炎性細(xì)胞因子如TNF、IL-12、IL-18等可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞csis、c-myc和c-fos原癌基因的異常表達(dá)，導(dǎo)致DNA合成增加［5］。因而IL-18可能通過(guò)影響基因表達(dá)等途徑促進(jìn)SH的發(fā)生。(3)神經(jīng)內(nèi)分泌功能的改變?cè)赟H發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用［6］，血管內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞可分泌IL-18，在血管內(nèi)的炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)中起重要介導(dǎo)作用［9］，從而影響人體神經(jīng)內(nèi)分泌功能，可能導(dǎo)致SH的發(fā)生并進(jìn)而發(fā)展成為疾病。

另外，本組研究結(jié)果還表明，老年SH組血清IL-10水平顯著低于健康老年人，且與血漿IL-18水平成顯著負(fù)相關(guān)。IL-10是抑炎因子，具有抑制炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)的作用，并可抑制促炎因子的產(chǎn)生［9］，從而可能起保護(hù)作用。因而IL-18和IL-10之間，甚至與其他細(xì)胞因子之間互相作用，互相協(xié)調(diào)，共同參與SH的發(fā)生和發(fā)展，但其真正機(jī)制目前仍未十分清楚，有待進(jìn)一步探討。

總之，SH對(duì)人類(lèi)的威脅越來(lái)越大，已成為21世紀(jì)醫(yī)學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn)，老年人則是SH的高發(fā)和易發(fā)人群，而至今為止，有關(guān)SH的成因仍未明了，缺乏統(tǒng)一診斷標(biāo)準(zhǔn)，治療效果不理想。我們認(rèn)為，通過(guò)檢測(cè)血IL-18和IL-10等細(xì)胞因子水平，進(jìn)一步探討SH老年人的免疫功能，為利用現(xiàn)代生物學(xué)最新發(fā)現(xiàn)和各種生物檢測(cè)技術(shù)對(duì)機(jī)體的SH進(jìn)行科學(xué)評(píng)估，對(duì)不正常的代謝過(guò)程進(jìn)行適當(dāng)干預(yù)，使其恢復(fù)正常，并使SH轉(zhuǎn)化，提高老年人的健康素質(zhì)，促進(jìn)健康老齡化，具有重要的意義。

［1］呂慧瑜，呂元聰.亞健康狀態(tài)的研究現(xiàn)狀與防治策略［J］.廣西醫(yī)學(xué)，2010，32(6):721-724.

［2］陳青山，王聲，荊春霞，等.應(yīng)用Delphi法評(píng)價(jià)亞健康的診斷標(biāo)準(zhǔn)［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2003，19(12):1467-1468.

［3］Steinman L，Conlon P，Maki R，et al.The intricate interplay among body weight，stress，and the immune response to friend or foe［J］.J Clin Invest，2003，111(2):183-185.

［4］Plett A，Murasko PM.Genetic differences in the age-associated decrease in inducibility of nature killer cells by interferon-alpha［J］.Mech Aging DEV，2002，112(3):197-215.

［5］Esfandiari E，Mclnnes IB，Lindop G，et al.A proinflammatory role of IL-18 in the development of spontaneous autoimmune disease［J］.J Immunol，2001，167(9):5338-5347.

［6］楊水平，蔣家望，包海燕，等.亞健康狀態(tài)發(fā)生機(jī)制研究進(jìn)展［J］.中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué)，2010，19(6):525-526.

［7］許化溪.免疫衰老與老年疾?。跩］.實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，2010，24(3):1-4.

［8］Minowada G，Welch WJ.Clinical implications of the stress response［J］.J Clin Invest，1995，95(1):3-12.

［9］Natarajan R，Rosdahi J，Gonzales N，et al.Regulation of 12-lipoxygenase by cytokines in vascular smooth muscle cells［J］.Hypertension，1997，30(4):873-887.