于 帥,杜 彬,楊越冬,王同坤
(河北科技師范學(xué)院園藝科技學(xué)院,河北 秦皇島,066600)
植物多酚是含有酚羥基和羧基的一類代謝產(chǎn)物成分,自然界中發(fā)現(xiàn)的酚酸類物質(zhì)的主要骨架類型有C6-C1型和C6-C3型,廣泛存在于蔬菜、水果、豆類、谷物類、茶等植物中[1]。多酚的獨(dú)特結(jié)構(gòu)使其具有很多的藥理功能,如:抗腫瘤、抗突變、抗變態(tài)反應(yīng)、抗氧化、抗動(dòng)脈硬化、防治冠心病與中風(fēng)等心腦血管疾病以及抗菌等[2~7],已廣泛應(yīng)用在食品、化妝品、日用化學(xué)品、醫(yī)藥以及保健品等領(lǐng)域[8]。
隨著天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)的逐漸興起,植物多酚因其在植物界分布的廣泛性、生理功能的多樣性以及來(lái)源豐富性等特點(diǎn),逐漸成為當(dāng)前天然產(chǎn)物化學(xué)研究的熱點(diǎn)[9]。近年來(lái),人們通過(guò)比較不同植物或不同品種植物中總多酚含量,試圖從食品或藥材中尋找富含多酚的植物材料,以便進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用多酚[10~12],目前研究較多的有蘋果多酚,茶多酚,葡萄多酚,柑橘多酚等[13,14]。筆者在此重點(diǎn)討論植物多酚的提取、分離及測(cè)定方法。
目前對(duì)植物多酚的提取工藝研究較多,植物多酚的提取技術(shù)已經(jīng)由傳統(tǒng)的提取法逐漸轉(zhuǎn)向新提取技術(shù)[15,16]。其中傳統(tǒng)的提取法有溶劑浸提法和金屬離子沉淀法,近幾年來(lái)出現(xiàn)了一些新的方法,如:樹(shù)脂吸附法、微波提取法、超聲波提取法及超臨界流體萃取法等。
溶劑浸提法屬于傳統(tǒng)的多酚提取方法。常用的溶劑有水、甲醇水溶液、乙醇水溶液、丙酮水溶液、乙酸乙酯等。根據(jù)相似相溶原理,多酚易溶于這些溶劑,溶劑浸提法還是目前工業(yè)化生產(chǎn)的主要方法[17]。
該方法提取過(guò)程比較簡(jiǎn)單,但在生產(chǎn)過(guò)程中要用到多種有機(jī)溶劑,且有機(jī)溶劑的用量大;工序多,需多次蒸餾,工藝繁瑣復(fù)雜;加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng),多酚易氧化;操作不夠安全。
金屬離子沉淀法是利用多酚能與某些金屬離子絡(luò)合成結(jié)晶性沉淀物的特點(diǎn),使其從浸提液中分離出來(lái),實(shí)現(xiàn)與其它雜質(zhì)的初步分離。常用的金屬離子有Al3+,Ca2+,F(xiàn)e2+,Mg2+,Zn2+等。其中,Zn2+,Al3+是較適宜的弱酸性沉淀劑[18]。
該方法的特點(diǎn)是經(jīng)熱水浸提后,加入沉淀劑即可得到多酚與金屬離子的結(jié)晶性沉淀物,不必濃縮浸提液,可在一定程度上降低能耗。同時(shí),由于這些沉淀的選擇性較高,產(chǎn)品的純度相對(duì)較好。但在其后的稀酸轉(zhuǎn)溶過(guò)程中多酚損失較大,而且沉淀劑有的是有一定毒性的金屬離子,有的偏堿性易造成多酚的氧化。因此,在產(chǎn)品的純度、收率、成本及安全性上仍不能完全令人滿意。另外,由于該方法使用了重金屬作沉淀劑,其產(chǎn)品是食品和醫(yī)藥行業(yè)所不能接受的。
樹(shù)脂吸附法提取多酚是利用樹(shù)脂能對(duì)多酚發(fā)生吸附—解吸作用的特性來(lái)實(shí)現(xiàn)多酚與其它浸提物組分之間的分離。根據(jù)所采用的樹(shù)脂類型的不同可分為吸附柱分離法、離子交換柱分離法和凝膠柱分離法;按其極性大小和所選用的單體分子結(jié)構(gòu)不同,可分為非極性大孔吸附樹(shù)脂、中等極性大孔吸附樹(shù)脂和極性大孔吸附樹(shù)脂。徐向群等[19]、董文賓等[20]研究了用大孔吸附樹(shù)脂制備茶多酚精品的工藝,得出了最優(yōu)的吸附條件。
利用樹(shù)脂吸附法提取多酚,技術(shù)路線簡(jiǎn)單,操作方便,能耗較低;操作條件溫和,可避免有效成分的失活,產(chǎn)品收率和純度好。尤其是整個(gè)過(guò)程中使用的有機(jī)溶劑主要是乙醇,具有回收容易、無(wú)毒等優(yōu)點(diǎn),而且可連續(xù)性生產(chǎn),有利于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
微波輔助提取(Microwave-Assisted Extraction)技術(shù)是近年來(lái)興起的生物活性物質(zhì)提取技術(shù),基本原理是利用微波場(chǎng)中分子發(fā)生高頻的運(yùn)動(dòng),擴(kuò)散速率增大,使多酚等浸提物在微波的輻射作用下快速浸取出來(lái)。通常研究提取劑、提取劑濃度、料液比、微波功率、提取時(shí)間等實(shí)驗(yàn)因素對(duì)多酚類物質(zhì)提取的影響[21,22]。
利用微波輔助提取所需時(shí)間短,因此大大減少了多酚在高溫下的氧化,提高了產(chǎn)品的品質(zhì)與收率。其具有投資少、設(shè)備簡(jiǎn)單、使用范圍廣、重復(fù)性好、操作時(shí)間短、溶劑用量少、效率高且物料受熱均勻等優(yōu)點(diǎn)。從報(bào)道的研究結(jié)果表明,利用微波提取法,多酚的提取率明顯高于回流提取法及超聲波提取法[23,24]。但由于微波的溫度較高,其反應(yīng)比較劇烈,易沸騰,操作要小心。
超聲波提取法利用超聲波的機(jī)械破碎和空化作用,加速多酚等浸提物向溶劑的擴(kuò)散速率,縮短浸提時(shí)間。通常研究浸提劑濃度、提取時(shí)間、料液比、提取溫度及提取次數(shù)對(duì)多酚提取效果的影響,并運(yùn)用正交試驗(yàn)對(duì)多酚的提取條件進(jìn)行優(yōu)化[25,26]。
該方法有操作簡(jiǎn)便,儀器設(shè)備便捷,提取效率高,溫度要求低,萃取速度快,萃取完全,適應(yīng)性廣等優(yōu)點(diǎn)。超聲波提取方法優(yōu)于普通的溶劑提取法[27]。但是也存在一些不足,如:超聲波提取通常持續(xù)工作時(shí)間較長(zhǎng),消耗溶劑量大。
超臨界流體萃取(supercritical fluid extraction)技術(shù)是一種正處于積極開(kāi)發(fā)階段的新型分離技術(shù),在較低溫度下,不斷增加氣體的壓力時(shí),氣體會(huì)轉(zhuǎn)化成液體,當(dāng)溫度增高時(shí),液體的體積增大,對(duì)于某一特定的物質(zhì)而言總存在一個(gè)臨界溫度(Tc)和臨界壓力(Pc),高于臨界溫度和臨界壓力后,物質(zhì)不會(huì)成為液體或氣體,這一點(diǎn)就是臨界點(diǎn)。在臨界點(diǎn)以上的范圍內(nèi),物質(zhì)狀態(tài)處于氣體和液體之間,這個(gè)范圍之內(nèi)的流體成為超臨界流體(SF)。從固體或液體中萃取某種高沸點(diǎn)和熱敏性成分、以達(dá)到分離和提純的目的。超臨界流體萃取技術(shù)為多酚的深度開(kāi)發(fā)提供了技術(shù)基礎(chǔ)[28]。
超臨界流體粘度低、擴(kuò)散性高,具有更高的傳質(zhì)效率,基本可以實(shí)現(xiàn)定量萃取和完全萃取。其選擇分離效果好,提取率高,產(chǎn)物沒(méi)有有機(jī)溶劑殘留,有利于熱敏性物質(zhì)和易氧化物質(zhì)的萃?。?9]。超臨界流體萃取所得多酚的純度很高,這是其它工藝所不能達(dá)到的。超臨界流體萃取以無(wú)毒無(wú)害的二氧化碳作為超臨界溶劑,特別適合于醫(yī)藥、食品添加劑等產(chǎn)品的提取,可作為通用高效的分離技術(shù)而應(yīng)用。王朝瑾等[30]通過(guò)對(duì)綠茶茶葉的浸提試驗(yàn),確定了超臨界二氧化碳萃取茶多酚的最佳工藝條件,并通過(guò)與溶劑法萃取茶多酚的比較,確定超臨界二氧化碳萃取茶多酚的可行性。但超臨界萃取法提取多酚尚有一定的技術(shù)障礙,主要表現(xiàn)為一次的提取率很低,分離過(guò)程在高壓下進(jìn)行,設(shè)備一次性投入大。
關(guān)于多酚的測(cè)定方法近年來(lái)有很多報(bào)道,根據(jù)多酚的結(jié)構(gòu)特性、絡(luò)合性能等理化性質(zhì),目前應(yīng)用于多酚類化合物的測(cè)定方法主要有高錳酸鉀滴定法、光譜分析測(cè)定法、色譜分析測(cè)定法等。
本方法是傳統(tǒng)的測(cè)定方法,具有一定的代表性。它是利用多酚類化合物中酚羥基的還原性,以1.0 g/L靛紅溶液為指示劑測(cè)定食品中的多酚類物質(zhì)含量。高錳酸鉀是強(qiáng)氧化劑,被測(cè)溶液中的還原性物質(zhì)一般均能被氧化,所以用這種方法測(cè)定選擇性不高。李思睿等[31]對(duì)該方法所使用的各種藥劑性狀及其穩(wěn)定性做了研究,以便在檢測(cè)中更合理地使用各種藥劑,減少誤差的產(chǎn)生。
2.2.1 可見(jiàn)分光光度法 多酚是一類具有多酚羥基的物質(zhì),在一定條件下可與金屬離子發(fā)生顯色反應(yīng)用于定量。光譜分析測(cè)定法多以福林-肖卡(Folin-Ciocalteu)比色法、分光光度法、流動(dòng)注射法和紅外吸收光譜法等分析技術(shù)來(lái)測(cè)定樣品中多酚的總量。
(1)福林肖卡比色法 此法是我國(guó)測(cè)定茶多酚的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。作為衡量天然產(chǎn)物中總酚含量的方法[32],最大吸收峰為765 nm。Folin-Ciocalteu試劑是一種強(qiáng)氧化劑,其還原型為藍(lán)色,多酚的量與藍(lán)色的深淺成正比[33,34]。目前國(guó)際上均采用沒(méi)食子酸(GA)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[35],用來(lái)定量多酚的含量,是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要試劑[36]。福林肖卡在實(shí)際中應(yīng)用較廣[37~39],如李巨秀、王柏玉[37]以桑椹為原料,沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究了用福林-肖卡比色法測(cè)定桑椹提取液中多酚類物質(zhì)含量的最適反應(yīng)條件;李靜等[40]對(duì)Folin-Denis法(即福林-酚法,水果及其制品中測(cè)定多酚含量的另一種方法)和Folin-Ciocalteus法測(cè)定水果及其制品中總多酚含量進(jìn)行了研究。Folin-Ciocalteus法比Folin-Denis法更加穩(wěn)定、靈敏和準(zhǔn)確。并且此法簡(jiǎn)單、敏感、精確,對(duì)特異性和標(biāo)準(zhǔn)化的測(cè)定十分有利,能在一定程度上克服植物性材料中一些限制性和多變性因素,適宜樣品總多酚含量的測(cè)定。但其測(cè)出的是多酚類化合物相對(duì)總量,受多酚類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)影響較大[41]。故在試驗(yàn)中,應(yīng)對(duì)結(jié)果中干擾性物質(zhì)進(jìn)行修正。
(2)酒石酸亞鐵分光光度法 1953年,Roux等建立植物多酚的酒石酸亞鐵545 nm分光光度測(cè)定法,其原理是在一定條件下,食品或植物組織中的多酚類物質(zhì)能與酒石酸亞鐵形成藍(lán)紫色絡(luò)合物,絡(luò)合物的吸光度值在一定的濃度范圍內(nèi)與多酚類物質(zhì)的濃度成正比[42]。此后回瑞華等[43],采用三波長(zhǎng)-光譜法消除隨濃度不同發(fā)生的本底漂移及吸收峰不對(duì)稱給定量分析造成的影響,建立了酚類物質(zhì)酒石酸亞鐵分光光度測(cè)定法。酒石酸亞鐵分光光度法是多酚類化合物測(cè)定中引用最多的快速分析方法,也是我國(guó)測(cè)定茶多酚的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。
雷昌貴等[44]發(fā)現(xiàn)由于測(cè)定方法本身存在的局限性。分光光度法測(cè)定多酚含量時(shí)存在吸收峰不對(duì)稱給定量帶來(lái)的影響,回瑞華等[45]在此基礎(chǔ)上采用三波長(zhǎng)分光光度法來(lái)彌補(bǔ)吸收峰不對(duì)稱這一不足,取得了較好結(jié)果。
(3)其他顯色方法 除了以上幾種顯色反應(yīng)外,還有KFe[Fe(CN)6]法[46],此方法較適用于食品中微量多酚類化合物的測(cè)定。原理是利用多酚類物質(zhì)在堿性條件下能與鐵氨離子生成深紅色絡(luò)合物。鉬酸銨分光光度法,依據(jù)的是多酚類物質(zhì)在酸性條件下與鉬酸銨生成黃色鉬酸酯的顯色反應(yīng)[47]。另外還有多酚在酸性條件下與磷鉬酸銨結(jié)合形成磷鉬酸酯的反應(yīng)等[48]。這些方法各有利弊,在此不再贅述。
2.2.2 原子吸收分光光度法 原子吸收分光光度法測(cè)定多酚的含量與可見(jiàn)分光光度法的不同之處在于后者測(cè)定的是絡(luò)合體系中絡(luò)合物含量,而前者是多酚與金屬離子的反應(yīng),然后通過(guò)測(cè)定絡(luò)合體系上清液金屬離子或剩余的金屬離子量而間接測(cè)定之。廖曉玲等[49]采用原子吸收分光光度間接測(cè)定法,利用茶多酚與堿式乙酸鉛絡(luò)合反應(yīng),產(chǎn)生難溶于水的黃色沉淀,將絡(luò)合體系離心后,用原子吸收法測(cè)定上清液中過(guò)量的鉛離子,間接測(cè)定茶多酚的含量。
原子吸收分光光度法選擇性比高錳酸鉀滴定法要高,但增加了沉淀離心分離步驟,操作比較繁瑣。與Folin-Ciocalteu試劑法相比,本方法更適合于測(cè)定食品中的高分子量的多酚類化合物,且干擾要比后者要小。
2.2.3 紅外光譜法 近紅外光譜的波長(zhǎng)范圍為780~2 526 nm,其信息主要是分子結(jié)構(gòu)中的C-H,OH,C-O等基團(tuán)的倍頻吸收及其伸縮振動(dòng)、彎曲振動(dòng)的合頻和差頻產(chǎn)生的吸收峰。在特定波長(zhǎng)處,不同樣品的吸收值差異反映樣品中酚組分含量的不同[50],可定量快速檢測(cè)總兒茶素在茶多酚中的含量[51,52]。
2.2.4 流動(dòng)注射法 流動(dòng)注射分析法以其高精度、高效率及裝置簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用。此方法測(cè)定的是還原型多酚的含量,因此對(duì)樣品的測(cè)定結(jié)果較標(biāo)準(zhǔn)法偏低。余宇燕等[53]建立了流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定茶飲料中的茶多酚的新方法。
測(cè)定多酚的多種組分含量,需采用能夠進(jìn)行組分分離的色譜法來(lái)定量分析測(cè)定。分離后的成分能夠與一定的顯色劑作用,然后比色定量。色譜法是近代分析化學(xué)中發(fā)展最快、應(yīng)用最廣的分離分析技術(shù)。在化學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。20世紀(jì)50~60年代紙色譜(PC)和薄層色譜(TLC)開(kāi)始應(yīng)用于茶多酚的分析。隨著工業(yè)的發(fā)展出現(xiàn)了現(xiàn)在廣泛使用的氣相色譜法(GC)和高效液相色譜法(HPLC)、超臨界流體色譜(SFC)、毛細(xì)管電泳測(cè)定法(HPCE)等[54]。由于這些方法專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好,可同時(shí)用于多酚的分離和測(cè)定,已廣泛應(yīng)用于商品茶多酚、茶葉或茶飲料、化妝品等實(shí)際樣品的含量測(cè)定。
薄層色譜法由Stahl于1958年建立,具有設(shè)備簡(jiǎn)單、成本低、操作方便、分離速度快、靈敏度及分辨率高等優(yōu)點(diǎn),已成為一般實(shí)驗(yàn)室必不可少的分離分析手段[55]。并廣泛應(yīng)用于中藥有效成分的分離、提取和研究及藥物和毒物的鑒定。通過(guò)適當(dāng)?shù)剡x擇吸附劑,既可用于吸附色譜法,也可用于分配色譜法。薄層色譜法的分辨率高于同固定相的柱色譜,為進(jìn)一步進(jìn)行HPLC流動(dòng)相的分析提供依據(jù)。因此,不失為初步定性檢測(cè)的一種較理想的方法。缺點(diǎn)是其分離多酚組分不多且定量也不夠準(zhǔn)確。
氣相色譜法是一種極為有效的分離方法,可以分離、分析復(fù)雜的多組分混合物,但一般用于分離弱極性、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性高的有機(jī)物。高效能的色譜柱、高靈敏度的檢測(cè)器以及計(jì)算機(jī)處理技術(shù),使其在食品工業(yè)、生物技術(shù)、農(nóng)副產(chǎn)品等領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用。但植物多酚是強(qiáng)極性、不易揮發(fā)且結(jié)構(gòu)復(fù)雜的有機(jī)物,分子量在500~3 000 u之間,分子量越高,熱穩(wěn)定性越弱。為了降低植物多酚的極性和提高揮發(fā)性,常常需要加入硅烷化試劑使其衍生化。
高效液相色譜法(HPLC)于1960年后期開(kāi)始應(yīng)用。是色譜法中的一個(gè)重要分支,據(jù)估計(jì),自然界70%以上的化合物均可用這種方法分析。試驗(yàn)中確定色譜條件包括:色譜柱的確定,適宜的固定相為未修飾的C18填料,如Spherisorb ODS1;檢測(cè)波長(zhǎng)的確定;流動(dòng)相及比例的確定,洗脫溶劑為水-甲醇/乙醇、水-乙腈體系,通常加入乙酸或磷酸鹽緩沖液來(lái)抑制羧基和酚羥基的電離;流速對(duì)分離度的影響;溫度對(duì)分離度的影響;進(jìn)樣量等[56,57]。
目前,高效液相色譜法是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最廣泛、最有效的分離分析技術(shù)之一,具有分辨率高、分析速度快、重復(fù)性好、定量分析精確度高等優(yōu)點(diǎn),并可用作實(shí)驗(yàn)室小量色譜純樣品的制備,所以發(fā)展特別迅速。在短短的幾年時(shí)間內(nèi),已被廣泛應(yīng)用于食品中多酚類化合物等非揮發(fā)性成分的分離鑒定。
高速逆流譜[58]、高效液相色譜-化學(xué)發(fā)光法及多種儀器聯(lián)用新方法的建立[59],將進(jìn)一步提高酚酸檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。高速逆流色譜作為一種不需要固態(tài)載體的液-液分配色譜,現(xiàn)已在天然產(chǎn)物分離純化領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。與傳統(tǒng)柱層析法相比,它具有分離速度快、樣品吸附低、分離重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)[60]。KumarN S[61]以正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水為溶劑,通過(guò)高速逆流色譜分離茶葉提取物中的7種兒茶素,EGCG,ECG與EGC的純度可達(dá)91% ~99%。
SFC一般用CO2做流動(dòng)相,既可分析GC難以處理的高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定的樣品,又比HPLC的柱效高、分析時(shí)間短。SFC可以使用GC和LC檢測(cè)器,也可與MS-IR等在線聯(lián)接,進(jìn)行簡(jiǎn)便、快速的定性定量分析。但是由于流動(dòng)相較貴,該技術(shù)適宜于萃取高價(jià)值的油脂(包括天然功能性油脂)、精油、內(nèi)酯等極性較低的天然產(chǎn)物有效成分,應(yīng)用受到限制。
毛細(xì)管電泳測(cè)定法(HPCE)是測(cè)定多酚含量的電化學(xué)分析方法,是指溶質(zhì)以電場(chǎng)為推動(dòng)力,在毛細(xì)管中按淌度和分配行為的差異而實(shí)現(xiàn)的高效快速分離的新技術(shù)[57]。HPCE是近十幾年來(lái)發(fā)展很快的一種高效分離技術(shù),具有靈敏、高效、快速、進(jìn)樣體積小、成本低,溶劑消耗少和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn)。而且與HPLC法相比溶劑無(wú)毒性。
毛細(xì)管電泳方法是一種連續(xù)快速分離茶葉中兒茶素組分的新方法,可在8 min內(nèi)完成一個(gè)樣品全分離,進(jìn)樣量少、無(wú)環(huán)境污染問(wèn)題。魏泱等[62]報(bào)道,在采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳分析綠茶時(shí),高壓液相法在準(zhǔn)確性和靈敏性方面比毛細(xì)管區(qū)帶電泳法更有優(yōu)勢(shì),而且高壓液相法可用于樣品的制備和半制備;但毛細(xì)管區(qū)帶電泳法的分離效率更高,可解決反相高壓液相法分離多酚化合物出現(xiàn)的峰展寬現(xiàn)象,而且由于所需樣品少,分析速度快,在樣品分析中更具有實(shí)用性和經(jīng)濟(jì)性。
近年來(lái),國(guó)內(nèi)對(duì)植物多酚的研究比較活躍,如何充分、合理、科學(xué)地利用我國(guó)豐富的植物多酚這一綠色資源已經(jīng)成為一項(xiàng)重要課題。在提取方面,傳統(tǒng)的溶劑提取法及沉淀分離方法制備多酚,產(chǎn)品在顏色、純度和溶劑殘留等方面不能滿足國(guó)內(nèi)外用戶日益提高的要求,尤其是在工藝中使用大量易燃易爆的有機(jī)溶劑,有的甚至使用有毒的氯仿,金屬離子等溶劑,致使安全性差,質(zhì)量差,綜合成本高。微波、超聲波萃取技術(shù)和超臨界流體萃取技術(shù)具有提取率高、產(chǎn)品純度好、流程簡(jiǎn)單、能耗低等優(yōu)點(diǎn),正在得到廣泛應(yīng)用。在總量測(cè)定方面,雖然有很多方法提出,但其操作過(guò)程還不夠成熟,在摸索過(guò)程中,應(yīng)用較多的還是經(jīng)典的可見(jiàn)分光光度法。在分離測(cè)定方法中,高效液相色譜法已經(jīng)逐步代替薄層色譜法,其具有分辨率高、分析速度快、定量分析精確度高等優(yōu)點(diǎn),是正在崛起的方法,得到了廣泛的應(yīng)用。隨著科學(xué)的發(fā)展,我們應(yīng)該在改進(jìn)傳統(tǒng)經(jīng)典方法的基礎(chǔ)上,廣泛地開(kāi)發(fā)和應(yīng)用新技術(shù)。這樣既可生產(chǎn)出高質(zhì)量的多酚,又可解決傳統(tǒng)工藝的一些弊端,將會(huì)有很好的發(fā)展前景。
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