張海英 ，薛 潔 ，田 鋒

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830000;2.四川天然藥物研究所，四川 成都 610041)

阿魏膠囊由阿魏、拳參、厚樸、白茅根等藥材組方，功能軟堅(jiān)散結(jié)、消積導(dǎo)滯，用于治療高脂血癥的臨床療效顯著。前期研究證實(shí)[1-3]，阿魏膠囊能顯著降低高脂血癥模型大鼠血脂，改善血瘀證模型動(dòng)物的微循環(huán)和血液流變學(xué)，增強(qiáng)大鼠脂蛋白脂酶和肝脂酶活性，抑制羥甲基戊二酰輔酶A還原酶活性，提高載脂蛋白A4基因的轉(zhuǎn)錄水平，具有較強(qiáng)的調(diào)脂作用和調(diào)節(jié)脂蛋白代謝作用。為了對其安全性作出客觀、科學(xué)的評價(jià)，進(jìn)一步指導(dǎo)臨床用藥，筆者進(jìn)行了阿魏膠囊對小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

N 2 B 110型電子天平(奧豪斯國際貿(mào)易上海有限公司);ALC-210.2型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。羧甲基纖維素鈉(成都科龍化工試劑廠，批號(hào)為20071207);阿魏膠囊(由新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院提供，批號(hào)為20090421，含量為每1 g顆粒相當(dāng)于9.97 g生藥)，臨用前以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成最大質(zhì)量濃度的混懸液，每1 mL相當(dāng)于6.18 g生藥。KM小鼠，SPF級，雌雄各半，體重(20±2)g，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，合格證號(hào)為SCXK(滬)2007-0005;動(dòng)物房(等級)為四川省天然藥物研究所安全性評價(jià)中心SPF級動(dòng)物房，溫度20～26℃，相對濕度40% ～70%，通風(fēng)10～15次/h，光照條件為每12 h明暗交替，動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK(川)2008-005。

1.2 方法

1.2.1 半數(shù)致死量測定

取小鼠20只，雌雄各半，隨機(jī)均分為給藥組和對照組。給藥組以阿魏膠囊可供灌胃的最大質(zhì)量濃度(每1 mL含6.18 g生藥)、小鼠灌胃可承受的最大體積(每10 g體重0.4 mL，相當(dāng)于成人臨床用量的180倍)一次性給藥。灌胃前禁食12 h，不禁水，灌胃4 h后常規(guī)飼養(yǎng)，連續(xù)觀察7 d[4]。對照組以等體積的5%羧甲基纖維素鈉灌胃，方法同給藥組。

1.2.2 最大耐受量試驗(yàn)

取小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)均分為給藥組和對照組。給藥組以阿魏膠囊可供灌胃的最大質(zhì)量濃度(每1 mL含6.18 g生藥)、小鼠灌胃可承受的最大體積(每10 g體重0.4 mL)，1 d內(nèi)連續(xù)2次給藥(相當(dāng)于成人臨床日用劑量的360倍)，兩次給藥時(shí)間相隔4 h。灌胃前禁食12 h，不禁水，間隔期間不供食，末次給藥4 h后常規(guī)喂食，觀察14 d。對照組以等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉灌胃，方法同給藥組[5-6]。

1.2.3 觀察指標(biāo)

觀察小鼠一般形態(tài)外觀、行為活動(dòng)、飲食情況、糞便形狀等，填寫《單次給藥毒性試驗(yàn)觀察記錄表》，給藥后4 h內(nèi)連續(xù)觀察，第2～14天的上午、下午各觀察1次。給藥前、給藥后第7天、觀察期結(jié)束時(shí)分別測定體重。及時(shí)解剖死亡動(dòng)物，觀察臟器病變情況，取肉眼觀察到有病變的臟器進(jìn)行病理制片檢查;觀察期結(jié)束，頸椎脫臼處死全部動(dòng)物，系統(tǒng)解剖，取肉眼觀察到有病變的臟器進(jìn)行病理制片檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 半數(shù)致死量

給藥后連續(xù)觀察7 d，結(jié)果無一只動(dòng)物死亡，給藥后小鼠一般狀態(tài)、行為活動(dòng)、飲食情況、分泌物和排泄物等均未見明顯異常。因受試藥物質(zhì)量濃度和體積限制，無法測出受試藥物的半數(shù)致死量，故進(jìn)行了最大耐受量測定。

2.2 最大耐受量

給藥后連續(xù)觀察14 d，記錄小鼠中毒癥狀和死亡情況。結(jié)果部分小鼠在第2次給藥后約1 h逐漸出現(xiàn)困倦、豎毛、弓背等癥狀，第2次給藥后16小時(shí)28分時(shí)發(fā)現(xiàn)給藥組1只雌性小鼠死亡，死亡率為5.00%，其余小鼠在第2次給藥后16 h左右已基本恢復(fù)正常。對死亡小鼠進(jìn)行解剖，未見腹腔、胸腔、顱腔及其他臟器組織有明顯肉眼可見的病理變化。存活小鼠觀察結(jié)束后脫頸椎處死，解剖檢查，亦未見腹腔、胸腔、顱腔及其他臟器組織有明顯肉眼可見的病理變化。試驗(yàn)期間，存活小鼠體重增長基本正常，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各時(shí)點(diǎn)體重組間無顯著性差異(P＞0.05)。結(jié)果見表1。

表1 阿魏膠囊急性毒性試驗(yàn)對不同性別小鼠體重的影響(±s，g)

表1 阿魏膠囊急性毒性試驗(yàn)對不同性別小鼠體重的影響(±s，g)

組別 雌性 雄性對照組給藥組給藥前18.7±1.0 18.3±0.6給藥后7 d 27.8±1.8 27.8±1.0給藥后14 d 32.3±2.1 32.4±1.4給藥前19.3±0.7 19.0±0.7給藥后7 d 32.6±1.6 31.5±1.3給藥后14 d 37.7±1.9 37.4±1.8

3 討論

本研究未測出阿魏膠囊的半數(shù)致死量，小鼠在給藥后無死亡，一般狀態(tài)、行為活動(dòng)、飲食情況、分泌物和排泄物等均未見明顯異常，表明阿魏膠囊的毒性極低。

小鼠灌胃給藥的最大耐受量為494.4 g/kg(相當(dāng)于臨床成人擬用藥劑量的360倍)。在該劑量下，給藥前、給藥后的第7天和第14天，兩組小鼠體重比較無顯著性差異(P＞0.05)，說明阿魏膠囊對小鼠消化吸收功能的影響不大;給藥后個(gè)別小鼠出現(xiàn)困倦、豎毛、弓背等癥狀，對照組觀察指標(biāo)均示正常，說明滿負(fù)荷灌胃給藥對小鼠自主神經(jīng)系統(tǒng)有一定的刺激作用。第2次給藥后16 h左右有1只雌性小鼠死亡，但解剖無肉眼可見的病理變化，說明阿魏膠囊的急性毒性較小。

一般認(rèn)為，按體重計(jì)算，小鼠1 d內(nèi)最大給藥量相當(dāng)于成人臨床日用劑量的100倍以上是較安全的[7]。本研究通過灌胃給藥無法測出阿魏膠囊的半數(shù)致死量，其1 d最大給藥量相當(dāng)于9.888 g(494.4 g/kg)生藥，折合為成人臨床日用劑量的360倍。因此，阿魏膠囊的急性毒性較小，在常規(guī)劑量下服用是安全、可靠的。

[1]韓 榮，王 茜，張海英，等.阿魏膠囊對高脂血癥大鼠及家兔的預(yù)防作用[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，32(3):174-177.

[2]薛 潔，韓 榮，張海英.阿魏膠囊對模型動(dòng)物血脂、微循環(huán)及血液流變學(xué)的影響[J].中草藥，2009，40(2):271-275.

[3]薛 潔，王 茜，張海英.阿魏膠囊對高脂血癥大鼠血脂相關(guān)酶的影響[J].中草藥，2009，40(10):1 619-1 621.

[4]徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:366-369.

[5]毛和平，劉光斌，劉效栓，等.和胃散急性毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2009，6(6)22-23.

[6]靳洪濤，李 慧，李 晉，等.紫杉膠囊急性毒性和反復(fù)給藥毒性實(shí)驗(yàn)研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志，2009，11(5):12-14.

[7]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1994:112.