杜建層 王秋菊 馮艷萍

子宮頸癌是最常見的女性生殖道惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率有上升及年輕化趨勢。其浸潤及轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡的重要原因。CD44v6是細(xì)胞表面黏附分子CD44的變異型之一。CD44v6的主要功能是與細(xì)胞骨架連接蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附，參與細(xì)胞偽足的形成及細(xì)胞的遷徙運(yùn)動(dòng);有利于腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散［1］。本研究通過檢測CD44v6在宮頸癌組織中的表達(dá)，進(jìn)一步探討CD44v6在子宮頸癌轉(zhuǎn)移中的作用，以期為腫瘤的生物靶向性治療、預(yù)測和改善子宮頸癌患者的預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2005至2010年河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院手術(shù)切除并經(jīng)病理組織學(xué)檢查證實(shí)的宮頸組織標(biāo)本95例，其中宮頸癌組織35例(有淋巴轉(zhuǎn)移者25例;無淋巴轉(zhuǎn)移者10例);宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)組織30例;正常宮頸組織或者伴有慢性宮頸炎組織30例，所有標(biāo)本術(shù)前均未經(jīng)過放療及化療。

1.2 方法 標(biāo)本均用10%甲醛固定，石蠟包埋，采用免疫組化法檢測CD44v6蛋白陽性表達(dá)水平。

1.3 結(jié)果判定 CD44v6蛋白陽性染色定位于細(xì)胞膜或者細(xì)胞質(zhì)中，呈棕黃色顆粒，按照顯色有無和陽性細(xì)胞數(shù)的多少將其分為三個(gè)等級:－:無陽性細(xì)胞;+:陽性細(xì)胞＜50%且顏色淺;++:陽性細(xì)胞≥50%且顏色深，其中強(qiáng)陽性(++)為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)及連續(xù)校正χ2檢驗(yàn)，兩類別四格表陽性率的比較采用Fisher精確概率法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD44v6的陽性分布 CD44v6在細(xì)胞膜中呈線性分布，并在細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)中呈棕黃色顆粒。CD44v6的陽性信號定位于宮頸癌細(xì)胞、宮頸上皮內(nèi)瘤變細(xì)胞或者正常宮頸組織細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)或胞膜中，呈棕黃色顆粒。

2.2 CD44v6的陽性表達(dá) CD44v6在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織中的表達(dá)率分別為82.9%(29/35)、46.7%(14/30)、10.0%(3/10)，3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);3組兩兩比較，差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，宮頸癌有淋巴轉(zhuǎn)移組陽性表達(dá)率為96.0%(24/25)顯著高于無淋巴轉(zhuǎn)移組50.0%(5/10)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

3.1 CD44v6的分子結(jié)構(gòu) 白細(xì)胞分化抗原44(cluster of differentiation 44;CD44)是細(xì)胞黏附分子家族，是一種細(xì)胞表面跨膜糖蛋白。CD44基因有19～20個(gè)高度保守的外顯子，被長短不一的內(nèi)含子所分隔，定位于11號染色體的短臂上(11p13)。CD44基因根據(jù)其外顯子表達(dá)方式的不同，可分為兩種類型:一種是V區(qū)變異性剪接外顯子，稱為變異型CD44(CD44v);另一種是由僅含組成型外顯子的CD44轉(zhuǎn)錄體編碼的蛋白質(zhì)，稱標(biāo)準(zhǔn)型CD44(CD44s)。10種不同的CD44拼接變異體CD44v，可在CD44s中按不同的順序插入10個(gè)變異型外顯子來產(chǎn)生。研究表明CD44v主要分布在上皮細(xì)胞中，CD44v與腫瘤分化類型及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且在許多類型的惡性腫瘤中均有不同程度的表達(dá)［2］。CD44v主要包括三種亞型:CD44v3、CD44v5、CD44v6。CD44V6與CD44s的結(jié)構(gòu)基本相似，但在細(xì)胞膜外區(qū)插入了34個(gè)由V6變異拼接型外顯子所編碼的不同序列的氨基酸殘基。

3.2 CD44v6的生物學(xué)功能 CD44v6為細(xì)胞表面跨膜糖蛋白分子之一，分布極為廣泛，其主要有以下生物學(xué)功能:(1)可以參與細(xì)胞偽足的形成;(2)與細(xì)胞骨架連接蛋白相結(jié)合;(3)與細(xì)胞的遷徙運(yùn)動(dòng)密切相關(guān);(4)可以識別并結(jié)合相應(yīng)的配體，參與腫瘤細(xì)胞、宿主細(xì)胞以及宿主基質(zhì)之間的黏附;(5)可以參與細(xì)胞與基質(zhì)、細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附作用;(6)其作為細(xì)胞基質(zhì)透明質(zhì)酸受體，可以改變腫瘤細(xì)胞表面黏附分子的功能和構(gòu)成，在腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散過程中起著非常重要的促進(jìn)作用［1］。

3.3 CD44v6與腫瘤轉(zhuǎn)移 CD44v6的過表達(dá)均與人體多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。CD44v6可以參與淋巴細(xì)胞的增殖、活化及再循環(huán)，主要介導(dǎo)循環(huán)中的淋巴細(xì)胞回歸定位于淋巴結(jié)中，其被稱為是淋巴結(jié)歸巢的受體［3］。表達(dá)CD44v6的腫瘤細(xì)胞離開原發(fā)灶進(jìn)入外周淋巴器官的過程有很強(qiáng)的侵襲行為，同淋巴細(xì)胞循環(huán)的運(yùn)行過程非常相似，都能在黏附接觸過程中進(jìn)行細(xì)胞遷移，在引流淋巴結(jié)中快速積聚以后大量的增殖，并通過外滲作用進(jìn)入周圍組織細(xì)胞，最后釋放到循環(huán)系統(tǒng)中。CD44v6作為細(xì)胞基質(zhì)透明質(zhì)酸受體，可以改變腫瘤細(xì)胞表面黏附分子的功能和構(gòu)成，有利于癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散［4］。Vizoso等［5］在直腸癌中的研究表明，CD44v6陽性表達(dá)者的復(fù)發(fā)率和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率顯著高于陰性表達(dá)者和無淋巴轉(zhuǎn)移者，該研究結(jié)果證實(shí)了CD44v6的過量表達(dá)與人體惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲以及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Guler等［6］在人喉上皮癌中研究發(fā)現(xiàn)，CD44v6在原位癌組織和發(fā)育不良組織中高表達(dá)，而且患者的預(yù)后差，生存期顯著縮短。Koopmen等［7］研究顯示，在宮頸鱗癌組織中，脈管神經(jīng)浸潤組CD44v6的陽性表達(dá)率明顯高于未浸潤組，低分化組中CD44v6的陽性表達(dá)率顯著高于高中分化組，提示腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移與CD44V6的陽性高表達(dá)率密切相關(guān)。李霞［8］在子宮頸癌中的研究發(fā)現(xiàn)，CD44v6陽性表達(dá)的腫瘤較陰性表達(dá)者惡性程度高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高、進(jìn)展快，提示CD44v6的陽性表達(dá)程度與癌組織的病期進(jìn)展及浸潤深度有關(guān)，其顯著的陽性表達(dá)預(yù)示著癌組織容易向周圍組織擴(kuò)散，具有更強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CD44v6分子在宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率(82.9%)顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組織(46.7%)及正常宮頸組織(10.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);在宮頸癌組織中，有淋巴轉(zhuǎn)移組CD44v6的陽性表達(dá)率(96.0%)顯著高于無淋巴轉(zhuǎn)移組(50%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致。本文認(rèn)為CD44v6在子宮頸癌組織中的陽性過度表達(dá)，促進(jìn)了宮頸癌細(xì)胞的增殖分化，CD44v6分子作為淋巴細(xì)胞的歸巢受體，介導(dǎo)了淋巴細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)合，使淋巴細(xì)胞穿過血管壁回到淋巴組織，從而逃避免疫識別和殺傷，與宮頸癌細(xì)胞的侵襲、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散密切相關(guān)。

1 郭亮，張敏，高潔凡.轉(zhuǎn)移相關(guān)基因蛋白CD44v6和nm23-H1在宮頸病變中的表達(dá)及意義.河北醫(yī)藥，2009，31:911-913.

2 王繁，呂杰強(qiáng).CD44v6和Ezrin在子宮內(nèi)膜癌中的研究進(jìn)展.實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2008，22:398-400.

3 Zhang JC，Wang ZR，Cheng YJ，et al.Expression of tumors and corresponding lumph nod metastases of colorectal carcinoma with dukes stage Cord world.J Gastroenterol，2003，9:1482.

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7 Koopmen G，Heider KH，Horst E，et al.Activated human lymphocytes and aggressive non-Hodykin’s lymphomas express ahomdogne of the rat metastasis-associated variant of CD44.J Exp Med，1993，177:897.

8 李霞.CD44V6與子宮頸癌預(yù)后關(guān)系的研究.實(shí)用腫瘤雜志，2004，19:51.