陳 嫻 劉國華 劉 宏

(中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所，北京 100081)

磷是家禽必需的主要營養(yǎng)物質(zhì)，它參與機體骨骼的生長發(fā)育、神經(jīng)信號傳導以及幾乎所有物質(zhì)和能量的代謝。家禽飼料中的磷主要來源于生物利用率較高的含磷礦物質(zhì)飼料添加劑和動物性飼料原料，以及生物利用率較低的植物性飼料原料。通常磷酸氫鈣(CaHPO4)等含磷礦物質(zhì)原料可提供30% ～50%的有效磷，其余50% ～70%的有效磷由植物性飼料原料提供，因此了解植物性飼料原料中有效磷的含量對于精準配方、提高飼糧磷的利用效率具有重要意義。

目前植物性飼料原料中有效磷數(shù)據(jù)還處于估測狀態(tài)，一般將植物性飼料原料總磷含量的1/3或非植酸磷的含量作為有效磷，然而已有研究表明這種估測是不準確的［1－2］，因此有必要采用消化(代謝)試驗實測各種植物性飼料原料中有效磷含量。

常用評定植物性飼料原料有效磷的方法有斜率比法、單一飼料原料強飼法、體外法、差量法、梯度回歸法和套算法。其中，套算法具有簡單快捷、試驗過程最為接近動物正常生理狀態(tài)、高通量等特點，因此被廣泛應(yīng)用于飼料原料磷生物學效價評定中。方熱軍等［3］用套算法評定了生長豬對若干植物性飼料原料磷的真消化率。鄭樹貴等［2］用套算法評定了肉仔雞對幾種植物性飼料原料的磷真利用率。但有關(guān)肉鴨對飼料原料中磷的真利用率測定尚未見報道。本試驗擬用套算法評定6種肉鴨常用植物性飼料原料有效磷參數(shù)，以期為肉鴨的飼糧配制提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 待測飼料原料

選取玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、小麥麩這6種肉鴨常用植物性飼料原料作為待測飼料原料。待測飼料原料樣品來源于北京天農(nóng)飼料有限公司，其概略養(yǎng)分含量見表1。

表1 待測飼料原料概略養(yǎng)分含量(風干基礎(chǔ))Table 1 Approximate nutrient contents of tested feedstuffs(air-dry basis) %

1.2 試驗飼糧

參照NRC(1994)，以玉米、豆粕為基礎(chǔ)原料，添加礦物質(zhì)、維生素等配成低磷基礎(chǔ)飼糧。以玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、小麥麩與低磷基礎(chǔ)飼糧分別按 75∶25、60∶40、45∶55、45∶55、60∶40和55∶45的比例混合配制成6種試驗飼糧，保證試驗飼糧中總磷的65%以上來自待測飼料原料。各飼糧中均添加0.40%二氧化鈦(TiO2)作為外源指示劑?；A(chǔ)飼糧和試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平分別見表2和表3。

1.3 試驗動物分組與飼養(yǎng)管理

選取體重相近的21日齡雄性櫻桃谷肉鴨336只，隨機分成7個處理，每個處理設(shè)6個重復，每個重復8只鴨。試驗動物采用常規(guī)免疫，21～24日齡為預(yù)試期，自由采食商品肉鴨顆粒飼料，25～30日齡為正試期，從25日齡開始，各組肉鴨分別飼喂相應(yīng)飼糧。試驗期間試驗鴨自由飲水，24 h人工光照。

1.4 樣品采集與前處理

于28～30日齡期間采用活動糞盤連續(xù)收集排泄物，用電吹風吹走羽毛和皮屑，將收集的排泄物轉(zhuǎn)移入塑料桶，并噴灑少量10%HCl，充分攪拌均勻，采集總糞重的10%于不銹鋼盒內(nèi)，65℃烘干，回潮24 h，粉碎，過40目篩制成風干樣品。

1.5 指標測定

參照楊勝等［4］的方法測定風干飼糧樣及糞樣中總磷和待測飼料原料中植酸磷含量。采用鄧雪娟等［5］的方法測定風干飼糧樣和糞樣中TiO2含量。按下式計算待測飼料原料真有效磷含量(g/kg DM)和總磷真利用率(%)。內(nèi)源磷數(shù)據(jù)采用本實驗室在相同試驗條件下采用梯度回歸法測得的數(shù)據(jù)，即0.37 g/kg DM［6］。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

表3 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))Table 3 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

1.6 計算公式

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件 One-way ANOVA程序?qū)?shù)據(jù)進行方差分析，并用LSD法進行多重比較，數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示，顯著性水平設(shè)為 P ＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 肉鴨植物性飼料原料真有效磷含量

由表4可知，菜籽粕飼糧真有效磷含量顯著高于玉米飼糧、豆粕飼糧、棉籽粕飼糧和小麥麩飼糧(P＜0.05);花生粕飼糧和豆粕飼糧真有效磷含量顯著高于玉米飼糧和棉籽粕飼糧(P＜0.05)。6種植物性飼料原料玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、小麥麩的真有效磷含量分別為1.74、2.83、4.27、2.45、3.35 和 2.84 g/kg DM。其中，菜籽粕真有效磷含量最高，顯著高于其他5種待測飼料原料(P＜0.05);花生粕、豆粕、小麥麩真有效磷含量顯著高于玉米和棉籽粕(P＜0.05);玉米真有效磷含量最低，顯著低于其他5種待測飼料原料(P ＜0.05)。

2.2 肉鴨植物性飼料原料總磷真利用率

由表5可知，肉鴨對玉米飼糧和豆粕飼糧的總磷真利用率顯著高于其他4種試驗飼糧(P＜0.05);對菜籽粕飼糧、花生粕飼糧、小麥麩飼糧的總磷真利用率顯著高于棉籽粕飼糧(P＜0.05)。6種植物性飼料原料玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、小麥麩的總磷真利用率分別為65.98%、45.10%、40.44% 、20.32%、46.93% 和 38.59%。其中，玉米總磷真利用率最高，顯著高于其他5種待測飼料原料(P＜0.05);棉籽粕總磷真利用率最低，顯著低于其他5種待測飼料原料(P＜0.05)。

表4 飼糧和待測飼料原料真有效磷含量Table 4 True available phosphorus content of diets and tested feedstuffs g/kg DM

表5 飼糧和待測飼料原料總磷真利用率Table 5 True availability of total phosphorus of diets and tested feedstuffs %

3 討論

3.1 植物性飼料原料有效磷的評定方法

目前，評定植物性飼料原料有效磷的方法有斜率比法、體外法、單一飼料原料強飼法、差量法、梯度回歸法和套算法等。斜率比法是通過待測磷源1種或多種試驗指標與1種標準磷酸鹽的斜率比來確定待測飼料原料磷相對生物學利用率的方法。該方法雖然在礦物元素生物學利用率評定中應(yīng)用較為廣泛，但存在著缺乏統(tǒng)一的操作規(guī)范、不同試驗的得出的數(shù)據(jù)之間可比性不強和試驗成本較高等缺點。體外法包括溶解度法和體外透析法，其中體外透析法所測定的透析率與真消化率有較高的相關(guān)性，且經(jīng)濟快捷，但其測定值比實際真消化率低［7－9］。單一飼料原料強飼法是 Sibbald［10］首創(chuàng)的用于測定雞飼料原料真代謝能的方法，目前也是研究成年家禽飼料原料生物學利用率的重要方法之一，但由于泄殖腔手術(shù)和禁飼－強飼－排空過程中的應(yīng)激，使試驗動物處于非正常生理狀態(tài)下，影響測定結(jié)果的準確性。梯度回歸法和差量法則能克服強飼法的缺點，得到了較為廣泛的應(yīng)用［11－13］，但測定一種原料所用的試驗動物數(shù)量較多，工作量大，成本也較高。而套算法則以可利用養(yǎng)分參數(shù)具有可加性為假設(shè)前提，與上述方法相比具有試驗動物生理狀態(tài)基本正常、經(jīng)濟快捷、可同時測定多種飼料原料的優(yōu)點。陳嫻等［14］試驗證明肉鴨不同飼料原料的真有效磷是具有可加性的，因此本試驗采用套算法測得的飼料原料磷真利用率是準確可靠的。

3.2 影響飼料原料中總磷真利用率的因素

本試驗用套算法測得的玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕和小麥麩的總磷真利用率分別為65.98%、45.10%、40.44%、20.32% 、46.93% 和38.59%，而周中華等［15］用強飼法測得的玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕的總磷真利用率分別為32.20%、33.44% 、36.41%和 28.84%。上述 2 種方法測定結(jié)果有所不同，可能是由于強飼法對生長肉鴨的應(yīng)激所造成的。鄭樹貴等［2］用套算法測得的肉仔雞對玉米、豆粕、小麥麩的總磷真利用率分別為16.42%、28.34%和 46.48%，與本試驗相比，似乎肉仔雞對玉米、豆粕磷的總真利用率低于肉鴨，而其對小麥麩的總磷真利用率則高于肉鴨，這顯然與2種動物消化生理的差異有關(guān)。此外，不同來源樣品的植酸含量可能也是影響磷利用率的因素，如Peter等［16］用斜率比法測得肉仔雞對低植酸玉米磷的生物學利用率是普通玉米的2倍。

3.3 套算法測定磷真利用率試驗條件的控制

多種因素，包括試驗飼糧磷水平、鈣磷比、套算比例等都可能影響套算法測定磷真利用率的準確性。

Jongbloed［17］認為內(nèi)源磷的損失與飼糧磷含量有關(guān)，如果飼糧有效磷的攝入低于動物對磷的需要量，內(nèi)源磷的損失很低。方熱軍等［13］研究表明，生長豬飼糧有效磷低于或接近其需要量時，內(nèi)源磷的排泄量較為穩(wěn)定。因此，只有當飼糧有效磷含量低于或接近動物營養(yǎng)需要量時，內(nèi)源磷排泄量較小且相對穩(wěn)定，飼糧磷真利用率最高。周中華等［15］報道，櫻桃谷肉鴨前期非植酸磷需要量為0.45%，而本試驗各種試驗飼糧非植酸磷水平均低于0.30%，基本保證了磷真利用率估測的準確性。

套算比例是影響試驗準確性的另一個重要影響因素。套算比例越高，試驗誤差就越小。試驗設(shè)計時待測飼料原料總磷應(yīng)占試驗飼糧總磷的百分比不同的研究者得出的結(jié)果有所不同，Jongbloed 等［18］認為應(yīng)在 50%以上，Ammerman 等［19］認為應(yīng)在80%以上，而Rodehutscord等［20］認為應(yīng)在75%以上。鄭樹貴等［2］認為用套算法測定肉仔雞飼料原料磷真利用率時，待測飼料原料中的磷應(yīng)占試驗飼糧總磷的70%以上。綜合考慮前人所做的研究結(jié)果以及肉鴨試驗飼糧的適口性等因素，本試驗設(shè)計的各試驗飼糧總磷的65%以上來自待測飼料原料。

A l-masri［21］以 14 ～ 29 日齡肉仔雞為研究對象，進行了鈣磷比對磷吸收的影響研究，試驗結(jié)果表明飼糧磷利用率隨著鈣磷比的提高而降低。Qian等［22］研究認為飼糧中鈣磷比過大會降低飼糧中植酸磷的活性和維生素D3的利用效果，在低磷飼糧中，這種負作用更大，而飼糧中鈣磷比在(1.1∶1)～ (1.4∶1)的范圍內(nèi)肉仔雞植酸酶和維生素D3的利用效果最好。而在實際的試驗操作中，由于植物性原料本身鈣磷比合理性較差，很難控制在上述范圍內(nèi)。本試驗鈣磷比在(1.97∶1)～(4.72∶1)，明顯高于上述范圍。

Jongbloed等［23］研究表明，在80℃時磷的利用率降低10%以上，含植酸酶活性高的飼料原料磷利用率的降幅更為顯著?？赡茉蚴侵屏r的高溫會降低飼料原料中內(nèi)源植酸酶的活性。但也有研究表明，飼料加工過程時的高溫同時也會分解部分植酸，從而提高磷的利用率，目前對飼料加工過程對飼糧磷利用率影響結(jié)果說法不一，需要進一步的研究。

4 結(jié)論

用套算法測得肉鴨對玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、花生粕、小麥麩的總磷真利用率分別為65.98%、45.10%、40.44%、20.32% 、46.93% 和38.59%，其真有效磷含量分別為 1.74、2.83、4.27、2.45、3.35 和 2.84 g/kg DM。

［1］ 余順祥.生長雞對植酸鹽中磷的利用率的測定［J］.中國畜牧雜志，1983，(4):829.

［2］ 鄭樹貴，欒新紅，董維國.不同肉雞用植物性飼料總磷真利用率的測定［J］.畜牧與獸醫(yī)，2007，39(2):14－17.

［3］ 方熱軍，王康寧，印遇龍，等.生長豬植物性飼料可消化磷預(yù)測模型的研究［J］.動物營養(yǎng)學報，2006，18(2):74－79.

［4］ 楊勝.飼料分析與飼料質(zhì)量檢測技術(shù)［M］.北京:北京農(nóng)業(yè)大學出版社，1993.

［5］ 鄧雪娟，劉國華，蔡輝益，等.分光光度計法測定家禽飼料和食糜中二氧化鈦［J］.飼料工業(yè)，2008，29(2):57－58.

［6］ 陳嫻，劉國華，劉宏.不同方法測定肉鴨內(nèi)源磷排泄量的比較研究［J］.動物營養(yǎng)學報，2011，23(3):403－409.

［7］ 方熱軍，王康寧，印遇龍，等.體外透析法評定飼料磷的透析率及其可透析磷預(yù)測模型研究［J］.廣西農(nóng)業(yè)生物科學，2004，23(4):265 －269.

［8］ LIU JZ，LEDOUX D R，VEUM T L，etal.In vitro prediction of phosphorus availability in feed ingredi-ents for sw ine［J］.Journal of Agricultural and Food Chem istry，1998，46:2678－2681.

［9］ WOLTERS M G E，SCHREUDER H A W，VAN DEN HEUVEL G，et al.A continuous in vitro method for estimation of the bioavailability ofm inerals and trace elements in foods:application to breads varying in phytic acid content［J］.British Journal of Nutrition，1993，69:849－861.

［10］ SIBBALD IR.A bioassay for truemetabolizable energy in feedstuffs［J］.Poultry Science，1976，55:303－308.

［11］ 羅發(fā)洪.不同類型植酸酶對肉仔雞生產(chǎn)性能和內(nèi)源磷排泄量的影響［D］.碩士學位論文.北京:中國農(nóng)業(yè)科學院，2007.

［12］ 王順祥，印遇龍，李鐵軍，等.回歸法測定生長豬內(nèi)源磷排泄量及磷真消化率研究［J］.西北農(nóng)林科技大學學報，2007，35(7):33 －38.

［13］ 方熱軍，王康寧，范明哲，等.不同方法測定生長豬內(nèi)源磷排泄量及磷真消化率的比較研究［J］.畜牧獸醫(yī)學報，2005，36(2):137 －143.

［14］ 陳嫻，劉國華，劉宏.肉鴨常用植物性飼料原料有效磷評定及可加性研究［J］.動物營養(yǎng)學報，2010，22(4):917－922.

［15］ 周中華，饒竹.櫻桃谷肉鴨適宜鈣磷水平研究［J］.中國飼料，1995(15):17－19.

［16］ PETER C M，BAKER D H.Bioavailability of phosphorus in corn gluten feed derived from conventional and low-phytate maize［J］.Animal Feed Science Technology，2002，95:63－71.

［17］ JONGBLOED A W.Phosphorus in the feeding of pigs:Effect of diet on the absorption and retention of phosphorus by grow ing pigs ［D］.Ph.D.thesis.Netherlands:Wageningen Agricultural University，1987.

［18］ JONGBLOED A W，KEMME PA.Apparentdigestible phosphorus in the feeding of pigs in relation to availability，requirement and environment.1.Digestible phosphorus in feedstuffs from plantand animalorigin［J］.Netherland Journal of Agriculture Science，1990，38:567－575.

［19］ AMMERMAN C B，BAKER D H，LEW IS A J，et al.Bioavailability of nutrients for animals:am ino acids，m inerals，and vitam ins［M］.San Diego，CA:Academ ic Press，1995.

［20］ RODEHUTSCORD M，F(xiàn)AUSTM，LORENZ H.Digestibility of phosphorus contained in soybean meal，barley and different varieties of wheat，w ithout and w ith supplemental phytase fed to pigs and additivity of digestibility in a wheat-soybean-meal diet［J］.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，1996，75:40－48.

［21］ AL-MASRIM R.Absorption and endogenous excretion of phosphorus in grow ing broiler chicks，as influenced by calcium and phosphorus ratios in feed［J］.British Journal of Nutrition，1995，74:407－415.

［22］ QIAN H，KORNEGAY E T，DENBOW D M.U tilization of phytate phosphorus and calcium as influenced by m icrobial phytase，cholecalciferol，and the calcium:total phosphorus ratio in broiler diets［J］.Poultry Science，1997，76:37－46.

［23］ JONGBLOED A W，KEMME P A.Effect of pelleting m ixed feeds on phytase activity and the apparent absorbability of phosphorus and calcium in pigs［J］.Animal Feed Science and Technology，1990，28(4):233－242.