趙楠 吳南

(內(nèi)蒙古血液中心 呼和浩特 010070)

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展,以及對造血干細(xì)胞的研究和臨床移植應(yīng)用的進(jìn)展,造血干細(xì)胞采集與移植應(yīng)用不斷增加,應(yīng)用范圍也在不斷拓寬,取得的臨床治療效果得以肯定,并且外周血造血干細(xì)胞采集技術(shù)的日趨成熟與簡捷,給很多病人帶來了重生的希望。

1 造血干細(xì)胞采集與移植分類

造血干細(xì)胞是各種血細(xì)胞與免疫細(xì)胞的起源細(xì)胞,可以增殖分化成為各種淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板及白細(xì)胞等,并且造血干細(xì)胞具有不斷自我更新與多向分化增殖能力,造血干細(xì)胞在體內(nèi)形成干細(xì)胞池,其自我更新與多向分化之間保持動(dòng)態(tài)平衡,致使造血干細(xì)胞數(shù)量相對穩(wěn)定。

目前造血干細(xì)胞采集與移植分為骨髓移植(BMT)、外周血造血干細(xì)胞移植(PBSCT)和臍血造血干細(xì)胞移植,根據(jù)供者不同又分為自體和異體造血干細(xì)胞采集與移植,其中異體和自體外周血造血干細(xì)胞采集最容易被捐獻(xiàn)者接受,是目前國內(nèi)外應(yīng)用最多的一種采集與移植方式。我國1995年底首例異基因外周血造血干細(xì)胞采集與移植,并獲得成功。外周血造血干細(xì)胞移植與骨髓移植相比,具有采集方便、捐獻(xiàn)者容易接受、造血恢復(fù)快、可短期進(jìn)行多次采集等優(yōu)點(diǎn),因此得到了快速的發(fā)展。我國規(guī)定,凡年齡在18～45周歲,身體健康,經(jīng)血液檢查ALT≤25單位,H B s A g陰性,抗-H C V陰性,抗-H I V陰性,梅毒試驗(yàn)陰性者都可成為異體造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者。正常情況下,人體內(nèi)的造血干細(xì)胞具有很強(qiáng)的再生能力,造血干細(xì)胞采集后1～2周供者體內(nèi)的血細(xì)胞可恢復(fù)到原來水平。與異體B M T、異體P B S C T相比,自體MBT和自體P B S C T不需要額外供者,無移植物排斥反應(yīng),移植相關(guān)死亡率低,對患者年齡也較異體移植寬;此外,我國白血病發(fā)病率為2.76/10萬,其中以兒童和35歲以下人居多,但由于我國捐獻(xiàn)造血干細(xì)胞人數(shù)不多,獨(dú)生子女沒有親兄弟姐妹(一般來講,親兄弟姐妹中有25%HLA基因完全相同,可選擇供者),所以給異體造血干細(xì)胞采集與移植帶來了不便。因此自體造血干細(xì)胞采集與移植成為國內(nèi)外廣泛研究的課題。

目前,對于血站來講,外周血造血干細(xì)胞采集所用的設(shè)備主要是百特CS-3000血細(xì)胞分離機(jī)。

2 外周血造血干細(xì)胞的特性

大量的臨床實(shí)驗(yàn)研究證明,與骨髓造血干細(xì)胞相比,外周血造血干細(xì)胞移植后,重建免疫功能早,淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、T、B細(xì)胞計(jì)數(shù)、血清中IgM、IgA水平,淋巴細(xì)胞對ConA刺激后的反應(yīng)等指標(biāo)比骨髓移植恢復(fù)的快,外周血造血干細(xì)胞對輻射敏感性低,在受體內(nèi)植入率高。學(xué)者Scott等研究發(fā)現(xiàn),PBSCT和BMT即使輸入相同數(shù)量的CFU-GM,PBSCT的造血恢復(fù)速度明顯優(yōu)于BMT。此外有的學(xué)者提出PBSCT早期恢復(fù)造血的原因還有:在PBSC中含有大量的造血輔助細(xì)胞,對移植后造血重建有一定支持作用;PBSC中干細(xì)胞對BM基質(zhì)細(xì)胞的負(fù)調(diào)控效應(yīng)不敏感;PBSC干細(xì)胞在增值中的系列偏倚特性,使其產(chǎn)生更多的CFU-GM,從而加快了造血的恢復(fù)。

在正常生理?xiàng)l件下,外周血造血干細(xì)胞數(shù)量比骨髓少的多,難以滿足造血干細(xì)胞移植的需要,但它容易受多種因素的影響而起伏很大,表現(xiàn)較強(qiáng)的機(jī)動(dòng)性,從而為采集外周血造血干細(xì)胞提供了有利條件。迄今發(fā)現(xiàn)影響外周血造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞數(shù)量的因素有。

2.1 造血干細(xì)胞動(dòng)員劑

包括聚陰離子化合物、抗癌細(xì)胞毒劑、腎上腺皮質(zhì)激素、生物制劑,如粒細(xì)胞集落刺激因子等,可使外周血造血干細(xì)胞增加20～30倍,以滿足采集和移植需要。

作為動(dòng)員劑應(yīng)具備以下條件:動(dòng)員效果好,提高外周血中干細(xì)胞倍數(shù)高,動(dòng)員出的造血干細(xì)胞有重建造血的功能,毒、副作用小,動(dòng)員作用應(yīng)持續(xù)數(shù)小時(shí)以上,便于采集分離。

2.2 失血

血液采集后的失血狀態(tài),可反饋性引起粒細(xì)胞集落刺激因子增加,從而可刺激骨髓中造血干細(xì)胞大量向外周血移動(dòng)。

2.3 晝夜變化

一般1d內(nèi)外周血中粒細(xì)胞集落刺激因子數(shù)量呈時(shí)相性變化,上午9點(diǎn)最高峰,下午3點(diǎn)至夜間3點(diǎn)最低,其數(shù)量分別為1d平均值的150%和65%。此外,采集前體育運(yùn)動(dòng)也可增加外周血造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞的數(shù)量。

3 外周血造血干細(xì)胞移植治療下肢動(dòng)脈栓塞癥應(yīng)用

外周血造血干細(xì)胞移植已廣泛應(yīng)用于臨床,不但能夠治療白血病、淋巴瘤,各種癌癥、免疫性疾病和遺傳性疾病。而且在治療下肢動(dòng)脈栓塞癥有一定療效。

筆者于2007年至2008年與內(nèi)蒙古醫(yī)院心血管科合作開展外周血造血干細(xì)胞采集與移植19例(其中自體外周血造血干細(xì)胞移植18例,異體外周血造血干細(xì)胞移植1例)用于治療下肢動(dòng)脈栓塞導(dǎo)致的下肢壞死癥,取得了一定的療效。使瀕于截肢的患者找到了非手術(shù)治療的明顯效果。接受自體外周血造血干細(xì)胞采集和移植的患者年齡60～80歲,均有糖尿病史;移植前癥狀19例患者單下肢或雙下肢均明顯因缺血出現(xiàn)壞死,疼痛劇烈,經(jīng)采集的外周血造血干細(xì)胞沿下肢動(dòng)脈走向多點(diǎn)皮下注射,3d后多數(shù)患者疼痛明顯減輕或消失,2周后下肢壞死變黑的皮膚出現(xiàn)血液供應(yīng)跡象,1個(gè)月后皮膚變紅,免除了截肢。干細(xì)胞主要存在于骨髓造血中樞,在外周血中含量很少。造血干細(xì)胞含有能分化成內(nèi)皮祖細(xì)胞的(EPC)幼稚細(xì)胞,已證實(shí):在體外,骨髓細(xì)胞CD34+細(xì)胞的某一亞群能分化成血管內(nèi)皮細(xì)胞;在體內(nèi),能被誘導(dǎo)形成小血管的內(nèi)表面;而且造血干細(xì)胞能分泌堿性成纖維細(xì)胞生長因子。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),將骨髓單個(gè)核細(xì)胞植入梗死肢體后可促進(jìn)局部的血管形成,并肯定了植入的內(nèi)皮祖細(xì)胞參與了新的毛細(xì)血管的生成。因此,造血干細(xì)胞可能是促進(jìn)局部缺血部位血管生成的高效物質(zhì)。應(yīng)用人類自體骨髓、PBSC和EPC治療缺血性下肢血管病成為一種嶄新的療法治療機(jī)理可能是外周血造血干細(xì)胞可誘發(fā)或具有血管再造功能。骨髓干細(xì)胞移植也有細(xì)胞來源不受限制,新生組織細(xì)胞和毛細(xì)血管可以實(shí)現(xiàn)功能上的融合等特點(diǎn),為臨床治療栓塞性疾病提供了一條除介入、血管旁路移植以外的另一條新的非創(chuàng)傷性治療途徑。

總之,隨著臨床治療方法不斷延伸與發(fā)展,外周血造血干細(xì)胞移植應(yīng)用越來越受到重視,治療效果也更加明顯。

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