趙 琦，張軍武，安國軍

（1.咸陽市衛(wèi)生學(xué)校，陜西 咸陽 712000；2.陜西中醫(yī)學(xué)院，陜西 咸陽 712046）

清熱解毒口服液是由石膏、金銀花、玄參、地黃、連翹、梔子、黃芩、龍膽、知母、麥冬等中藥制成的復(fù)方制劑，具有清熱解毒的功效，收載于2010年版一部《中國藥典》［1］。臨床上主要用于熱毒壅盛所致發(fā)熱面赤，煩躁口渴，咽喉腫痛等癥以及流感，上呼吸道感染及各種發(fā)熱疾病見上述證候者。為了加強對該品種的質(zhì)量控制，我們進行了一系列實驗研究，在原清熱解毒口服液標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了玄參的薄層色譜鑒別并改進了金銀花、連翹的鑒別方法，使其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可操作性更強，從而有效地控制該制劑的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（中國重慶銀河儀器有限公司）；超聲清洗儀，SB3200DT型（寧波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 試藥 硅膠G，化學(xué)純，薄層層析用；綠原酸對照品，批號：110753-200413（薄層層析用）；連翹苷對照品，批號：110821-200508（薄層層析用）；玄參對照藥材，批號：121008-200505。以上檢驗用對照品，均由中國藥品生物制品鑒定所提供。其他試劑均為分析純。清熱解毒口服液市售（自制）。

2 薄層鑒別

2.1 金銀花的薄層鑒別［2-3］取本品10 mL，蒸干，殘渣加乙醇5 mL使溶解，濾過，濾液濃縮至2 mL，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去金銀花藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取綠原酸對照品，加乙醇制成1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述三種溶液各10μL，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水 （2∶1∶1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與陰性對照色譜相應(yīng)位置上，未顯相同顏色的斑點。

2.2 連翹的薄層鑒別［4-5］取本品40 mL，加三氯甲烷20 mL回流萃取3次，每次20 min，收集三氯甲烷層，用10%氨水洗滌2次，每次40 mL，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去連翹藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取連翹苷對照品，加甲醇制成0.15 mg／mL的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］試驗，分別吸取上述3種溶液各10μL，點于同一硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸（17∶2∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；在與陰性對照色譜相應(yīng)位置上，未顯相同顏色的斑點。實驗的重現(xiàn)性和專屬性較好。

2.3 玄參的薄層鑒別［6］取本品20 mL，用水飽和正丁醇超聲提取2次，每次15 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加無水乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去玄參藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取玄參對照藥材2 g，加水適量，煎煮30 min，濾過，濾液同法制得對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］試驗，分別吸取上述溶液各10μL，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（5∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；在與陰性對照色譜相應(yīng)位置上，未顯相同顏色的斑點。實驗的重現(xiàn)性和專屬性較好。

3 討論

3.1 金銀花與玄參的薄層色譜 經(jīng)多次實驗，發(fā)現(xiàn)采用藥典中展開劑的比例，分離斑點不清晰，改變展開劑比例后能很好的鑒別綠原酸。玄參為方中的臣藥，具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津、瀉火解毒等功效；故建議藥典增加玄參藥材的鑒別項，以有效的控制藥品質(zhì)量［2-3］。

3.2 連翹的薄層色譜 在《中國藥典》2010年版一部［1］中提取本品20 mL，加乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加30%乙醇5 mL使溶解，通過 D101型大孔吸附樹脂柱（內(nèi)徑1 cm，柱高24 cm），用30%乙醇50 mL洗脫，棄去洗液，再用稀乙醇50 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。本方法節(jié)約時間，方便操作，專屬性較強［4-5］。

3.3 陰性對照組 增加了陰性對照試驗，通過陰性對照、供試品以及對照品的相互比較更能科學(xué)的說明其專屬性，達到準(zhǔn)確鑒別的目的［6］。

［1］中華人民共和國藥典委員會.中國藥典［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄VIB.

［2］李煥榮，崔健，宋玉環(huán).不同產(chǎn)地的金銀忍冬中綠原酸、異綠原酸的含量測定——雙波長薄層掃描法［J］.吉林中醫(yī)藥，1989，9（2）：21.

［3］廖婉，傅超美，李瑤，等.清熱解毒口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究［J］.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，31（2）：39-42.

［4］田云.清熱解毒口服液的質(zhì)量分析［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2004，27（4）：62.

［5］謝程，張?zhí)m杰，鄭平，等.婦炎康膠囊薄層色譜鑒別研究［J］.吉林中醫(yī)藥，2001，21（6）：59.

［6］劉翠艷，鄭玉光，石紅，等.清熱解毒口服液中梔子、玄參的薄層鑒別［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報，2005，20（2）：292-301.