祁成年,雷 紅,姜鋒韜

(1.塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,新疆 阿拉爾 843300;2.塔里木畜牧科技兵團重點實驗室,新疆 阿拉爾 843300;3.喀什地區(qū)畜牧技術(shù)推廣中心)

血液蛋白多態(tài)性可以作為一個遺傳標記因子來反映動物的遺傳變異情況。不同品種間的不同位點血液蛋白具有一定差異,所以由多種血液蛋白多態(tài)性所標記的多基因型,可用來標記品種特征(張細權(quán),1997)。本研究利用血液蛋白多態(tài)性,對塔里木盆地周邊的策勒黑羊、和田羊、卡拉庫爾羊3個綿羊品種進行遺傳多樣性分析,對種質(zhì)資源保護和科學(xué)開發(fā)利用以及品種的起源、進化研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 選擇3個品種176只成年健康綿羊作為試驗動物。其中策勒黑羊60只,來自新疆和田策勒縣;和田羊56只,來自新疆和田策勒縣;卡拉庫爾羊60只,來自新疆阿克蘇農(nóng)一師十三團卡拉庫爾羊養(yǎng)殖中心。以系統(tǒng)隨機抽樣方法采集。將羊只保定,用消毒過的12號注射針頭從羊頸靜脈處采血10 mL,裝入預(yù)先加入1%肝素鈉1～2滴作為抗凝劑的消毒青霉素瓶中。并反復(fù)輕輕倒置,使抗凝劑與血液混勻。帶回實驗室,在 3 000 r/min離心20 min,吸取上層血清,標記放入冰箱-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 方法

1.2.1 電泳方法 垂直板高pH不連續(xù)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,測定血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)。

1.2.2 血清蛋白的判型 參照鈴木正三的《比較血型學(xué)》進行辨認分型。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理

1.2.3.1 血清蛋白基因型頻率、基因頻率[1]計算

基因型頻率=該基因型個體數(shù)/被測個體總數(shù)

基因頻率(Gi)=Gii+Gij/2

式中:Gi表示基因頻率,Gii、Gij分別表示i基因純合子與雜合子的基因型頻率。

1.2.3.2 基因純合度、雜合度、平均預(yù)期雜合度的計算

jk=∑(xi)2,hk=1-jk,H=∑hk/r

式中:jk表示某一位點基因純合度,xi表示群體中k位點第i個等位基因的頻率;hk表示某一位點基因雜合度;H表示平均位點基因雜合度,r為基因座數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種綿羊血清蛋白基因位點的基因型頻率和基因頻率

2.1.1 3種綿羊血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)的基因型頻率和基因頻率 由表1可見,策勒黑羊血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)位點檢測出6種基因型;和田羊血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)位點檢測出5種基因型,缺少AB型;卡拉庫爾羊血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)位點檢測出4種基因型,缺少BB型和AB型。在基因型頻率上,3種綿羊都以TfCC為優(yōu)勢基因型。在基因頻率上,3種綿羊都以TfC為優(yōu)勢基因。

表1 Tf的基因型頻率和基因頻率

2.1.2 3種綿羊前白蛋白(Pr)的基因型頻率和基因頻率 由表2可見,策勒黑羊、和田羊、卡拉庫爾羊前白蛋白(Pr)位點檢測出3種基因型。在基因型頻率上,3種綿羊都以PrSS為優(yōu)勢基因型。在基因頻率上3種綿羊都以PrS為優(yōu)勢基因。

表2 Pr的基因型頻率和基因頻率

2.1.3 3種綿羊血清白蛋白(Alb)的基因型頻率和基因頻率 由表3可見,策勒黑羊血清白蛋白(Alb)位點檢測出6種基因型,缺少WV型和DS型;和田羊血清白蛋白(Alb)位點檢測出6種基因型,缺少WV型和DS型;卡拉庫爾羊血清白蛋白(Alb)位點檢測出6種基因型,缺少FF型和SS型。在基因型頻率上,3種綿羊都以AlbSW為優(yōu)勢基因型。在基因頻率上,3種綿羊都以AlbW為優(yōu)勢基因,策勒黑羊和和田羊缺少AlbV和AlbD基因。

表3 Alb的基因型頻率和基因頻率

2.2 策勒黑羊、和田羊、卡拉庫爾羊遺傳變異性 由表4可見,策勒黑羊、和田羊、卡拉庫爾羊在血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)3個位點的預(yù)期基因平均雜合度較高。

表4 Nei氏預(yù)期基因平均雜合度(H)

3 討論

基因雜合度(H)又稱基因多樣度,反映各群體在n個位點上的遺傳變異。一般認為它是度量群體遺傳變異的一個最適參數(shù)[4]。本研究結(jié)果表明:策勒黑羊、和田羊、卡拉庫爾羊在血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)、前白蛋白(Pr)、血清白蛋白(Alb)3個位點的預(yù)期基因平均雜合度分別為0.531 8、0.542 3、0.512 4,基因平均雜合度較高。其中和田羊和策勒黑羊群體的預(yù)期基因平均雜合度相對較高,說明了和田羊和策勒黑羊群體基因型一致性差,遺傳變異大,因此認為和田羊和策勒黑羊的遺傳多樣性豐富,具有較大的遺傳潛力,為今后和田羊和策勒黑羊的定向培育新類型提供了理論依據(jù)。

[1]Li C C.群體遺傳學(xué)[M].吳仲賢,譯.北京:農(nóng)業(yè)出版社,1981:1-10.

[2]牛榮,商海濤,魏泓,等.版納小耳豬近交系5家系35個微衛(wèi)星位座的遺傳分析[J].遺傳學(xué)報,2001,28(6):518-526.