陳　鳳　蘇芝軍

[摘要] 目的:分析血液分析儀與手工法對兒童血小板計數(shù)產(chǎn)生的誤差。方法:用兩種血液分析儀及手工顯微鏡計數(shù)法對600例血液標本進行血小板計數(shù),并進行對比分析。結(jié)果:成人血小板值高于正常參考上限(300×109/L)的比率低于兒童,兩種血細胞分析儀測的兒童血小板值無顯著性差異(P>0.05),血液分析儀分析時出現(xiàn)異常報警(URI),直方圖尾部有異常升高的血小板值與顯微鏡計數(shù)的結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)。結(jié)論:使用血液分析儀計數(shù)兒童血小板時如出現(xiàn),計數(shù)有警示信號(URI);MCV<70 fl,且RBC直方圖顯示有<50 fl的小紅細胞存在,血小板直方圖出現(xiàn)尾部升高的表現(xiàn)或血小板直方圖曲線呈齒狀等以上情況時要進行手工顯微鏡計數(shù)儀得到準確的結(jié)果。

[關(guān)鍵詞] 血液分析儀;血小板計數(shù);兒童;顯微鏡計數(shù)

[中圖分類號]R55 [文獻標識碼] B[文章編號] 1673-7210(2009)08(c)-143-02

隨著醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展及各種高科技技術(shù)在細胞生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用,血液分析儀已經(jīng)成為各級醫(yī)療機構(gòu)常規(guī)實驗診斷中不可缺少的儀器,具有快速、方便、所測項目多等諸多優(yōu)點,但由于設(shè)計原理的問題,某些情況下易造成結(jié)果的假性增高或減低。在日常工作中發(fā)現(xiàn),血細胞分析儀計數(shù)的兒童血小板(platelet,PLT)值高于正常參考范圍的較成人偏多。我們隨機分析了日常工作中使用MEK-6108型血液分析儀測得的600例血小板值,其中,成人(14歲以上)400例,兒童(14歲及以下)200例。并對兒童的標本同時用KX-21型血細胞分析儀和手工光學(xué)顯微鏡法計數(shù)血小板值。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

血液分析儀采用日本光電公司生產(chǎn)的MEK-6108型和日本東亞醫(yī)用電子株式會社生產(chǎn)的KX-21型;稀釋液、溶血劑等均使用各自配套試劑;光學(xué)顯微鏡計數(shù)血小板稀釋液由實驗室自配。

1.2 標本的采集

采用EDTA-2K抗凝的真空管,嚴格按規(guī)定要求(抗凝劑與血液比例嚴格控制、血流要順暢)采集靜脈血,標本要求無凝塊和溶血。采集后在15 min～1 h測試完畢。

1.3 方法

400份成人標本只用MEK-6108型分析儀測定。200份兒童標本分別用兩種儀器進行測定,且各測定兩次取其平均值,同時用光學(xué)顯微鏡法計數(shù)其血小板值,每份標本計數(shù)兩次取其平均值。各儀器操作嚴格按說明書要求,手工法采用改良許汝法,按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求進行。

2 結(jié)果

MEK-6108型血細胞分析儀所測的400例成人血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占6%,200例兒童血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占21%,兒童高于成人。

MEK-6108和KX-21兩種血細胞分析儀測得的兒童血小板值分別為(204.0±80.5)×109/L、(194.0±71.2)×109/L,兩者經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,無顯著性差異(P>0.05)。MEK-6108測得的值[(204.0±80.5)×109/L]與手工顯微鏡計數(shù)值[(190.0±65.3)×109/L]比較,無顯著性差異(P>0.05)。

將MEK-6108血液分析儀分析時出現(xiàn)異常報警(URI)的28例標本的血小板值[(486.0±98.7)×109/L]與顯微鏡計數(shù)的結(jié)果[(279.0±76.5)×109/L]進行比較,有顯著性差異(P<0.05)。

3 討論

不同的血液分析儀雖然有不同的生產(chǎn)廠家,且分析原理及試劑有所不同,但在分析時只要按其要求操作,所取標本合格、操作時間控制在一定范圍內(nèi)(15～60 min),所得的血小板結(jié)果無明顯差異[1],筆者的結(jié)論也與之相符。

血液分析儀所測得的血小板值高于正常參考上限的兒童多于成人,考慮可能有以下幾方面原因:①某些疾病如肺炎、支氣管炎、溶血性貧血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息發(fā)作期、腎病綜合征等疾病可引起血小板增高,這可能與血小板活化參與其發(fā)病機制有關(guān)[2],而這幾種疾病兒童的發(fā)病幾率要大于成人。②在采集兒童靜脈血液時由于兒童與工作人員難以很好地配合,采集到的標本很容易造成紅、白細胞破壞形成碎片。由于血液分析儀對血小板的測定是與紅細胞在同一個計數(shù)池中進行,其原理是在一定體積(2～24 fl)范圍內(nèi)的顆粒被計數(shù)為血小板[3]。當所測標本中有大量小紅細胞或紅、白細胞碎片,其體積進入血小板計數(shù)范圍的被誤認為血小板,使血小板計數(shù)假性增高[4]。③兒童多有厭食、偏食等不良飲食習(xí)慣,易發(fā)生營養(yǎng)不良性小細胞貧血,如缺鐵性貧血。④有少數(shù)兒童在生理狀況及操作因素的影響下其血小板本身就高于正常。

因血球計數(shù)儀具有“浮動界標”糾正功能,并非只要當血液標本中存在小紅細胞時就可以使計數(shù)的血小板值偏高于實際值,即使其體積<20 fl,也不至于影響血小板計數(shù),只有當多量的小紅細胞存在時,超出其功能糾正范圍才出現(xiàn)錯誤結(jié)果[4],并且當出現(xiàn)此類錯誤時儀器一般會有URI報警提示,URI報警即提示小紅細胞或紅細胞碎片會對血小板計數(shù)有影響而造成計數(shù)誤差,血小板直方圖也會出現(xiàn)異常的表現(xiàn),其曲線尾部并不是呈下降趨勢與橫坐標相交,而是呈上升走勢。

平均紅細胞體積(MCV)是反映體內(nèi)紅細胞大小的一項指標,當血液內(nèi)小紅細胞數(shù)量增多時,MCV值就會低于正常參考值,而小紅細胞數(shù)量增多到一定數(shù)量時又會影響血球計數(shù)儀對血小板計數(shù)的準確性,故而MCV值也可間接判斷血球計數(shù)儀所計數(shù)血小板值的準確與否。和強等[2]報道MCV<70 fl時對血小板計數(shù)有影響,我們所分析的28例異常血小板直方圖標本中有26例MCV<70 fl,與報道的基本一致。

鑒于上述結(jié)果,筆者建議在使用血細胞分析儀計數(shù)兒童血小板值時,并不需要每一標本都進行手工顯微鏡計數(shù),即使其結(jié)果高于正常參考范圍。但只要當出現(xiàn)下列情況之一時,就必須用人工顯微鏡計數(shù)加以補充,以得到準確的結(jié)果:①血小板計數(shù)有警示信號(URI);②MCV<70 fl,且RBC直方圖顯示有<50 fl的小紅細胞存在;③血小板直方圖曲線呈齒狀,表示有血小板聚集,此時血小板計數(shù)儀器法測得的結(jié)果偏低。

[參考文獻]

[1]章文,徐剛,陳月生.血液分析儀計數(shù)小兒血小板升高因素淺析[J].國外醫(yī)學(xué):臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊,2005,26(3):188-191.

[2]和強,廖志勤,虞靖虹.哮喘患兒血小板計數(shù)與平均血小板容積水平變化的臨床觀察[J].中國小兒血液,2002,7(2):54-55.

[3]張軍力,高健鋼.現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用指南[M].呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社,2001:12-44.

[4]叢玉隆.當代血液分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:97-100.

(收稿日期:2009-03-11)