李良昌 周憲春 延光海 崔春吉 金東洙

[摘要] 目的 探討大豆異黃酮對非酒精性脂肪肝病模型大鼠抗氧化能力的影響。方法 將50只SD大鼠隨機分成5組:正常組,模型組,大豆異黃酮低劑量組,大豆異黃酮中劑量組,大豆異黃酮高劑量組;除正常組外,其余各組以高脂飲食誘導建立大鼠脂肪肝模型,測定肝組織中MDA、SOD和T-AOC水平,對肝臟進行病理學檢查,觀察大豆異黃酮對該模型的影響。結(jié)果 大豆異黃酮可降低脂肪肝大鼠MDA,提高SOD和T-AOC水平,并能明顯改善模型動物肝組織的病理損傷。結(jié)論 大豆異黃酮提高非酒精性脂肪肝病大鼠的抗氧化能力,利于脂肪肝的治療。

[關(guān)鍵詞] 非酒精性脂肪肝病;抗氧化;大鼠

[中圖分類號] R575[文獻標識碼] A[文章編號] 1004-8650(2009)05-01-02

Efects of Soybean Isoflavones on the Antioxidant Activity of Fatty Liver Model in Rats

Liangchang-Li1, Xianchun-Zhou2, Guanghai-Yan2﹡, Cuichun-Ji2,Dongzhu-Jin1

(1.Yanbian University college of basic medicine;2 .Department of Gastroenterology, the Affiliated Hospital of Yanbian University Yanji 133000, Jilin Province, China)

[Abstract] Objective To evaluate the protective efects of Soybean Isoflavones on the antioxidant activity of nonalcoholic fatty liver diseases in rats. Methods 50 SD rats were randomly divided into 5 groups: nomal control group, model group, low dose of Soybean Isoflavones treatment group, intermediate dose of Soybean Isoflavones treatment group and high dose of Soybean Isoflavones treatment group. The fatty liver model of rats were induced by oral administration with high fat diet. Live tissue in animal was extracted to tested the MDA、SOD and T-AOC, Histopathologic examination of the liver tissues was also performed. Results Soybean Isoflavones was found to reduce the level of MDA and increase SOD and T-AOC levels in the liver tissues of fatty liver model, Soybean Isoflavones also markedly ameliorated the pathological injury in the liver tissue. Conclusion Soybean Isoflavones can exert a significant protective effect on nonalcoholic fatty liver diseases in rats by icrease their ability of antioxidant activity.

[Key words] nonalcoholic fatty liver diseases; antioxidant; rat

近年來非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver diseases,NAFLD)發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。NAFLD的發(fā)病機制較復雜,有廣泛的因素參與,迄今尚未完全闡明,其中氧化應激相關(guān)性損害是其重要的病理環(huán)節(jié)。大豆異黃酮(Soybean Isoflavones,SI)具有很強的抗氧化活性,如清除超氧陰離子、羥自由基和過氧自由基或單線態(tài)氧[1]。本研究旨在觀察大豆異黃酮對大鼠高脂飲食性脂肪肝模型的抗氧化作用。

1材料與方法

1.1實驗動物

成年SD大鼠,雌雄各半,體重180-200g 由延邊大學醫(yī)學部實驗動物中心提供。

1.2試劑和儀器

大豆異黃酮系天然提取物,由成都牧甫生物科技有公司提供。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒購于南京建成試劑公司。752型紫外光柵分光光度計為上海第三分析儀器廠產(chǎn)品;236HK臺式冷凍離心機為德國HERMLE產(chǎn)品;德國Sartarius的BP211D電子天平。

1.3實驗方法

1.3.1 動物處理SD大鼠50只,隨機分為五組,每組大鼠10只,正常組:大鼠喂飼基礎(chǔ)飼料;高脂模型組:大鼠喂飼高脂飼料(88%基礎(chǔ)飼料,10%豬油,2%膽固醇);SI低劑量組:大鼠喂飼高脂飼料+SI(30mg/kg/d);SI中劑量組:大鼠喂飼高脂飼料+SI(100mg/kg/d);SI高劑量組:大鼠喂飼高脂飼料+SI(300mg/kg/d),大鼠連續(xù)喂養(yǎng)6周。

1.3.2 標本采集及處理用5%戊巴比妥鈉麻醉后處死動物,立刻剖開腹腔,暴露肝臟,觀察肝臟顏色及質(zhì)地,取肝右葉同部位組織1.0g,4℃研磨制備成肝組織勻漿,按試劑盒方法測定肝組織中SOD、MDA和T-AOC。

1.4統(tǒng)計學處理

采用SPSS11.5軟件包,進行多組數(shù)據(jù)計量資料單因素方差分析(ONE-WAY ANOVA),以均數(shù)±標準差(±s)表示;等級資料用Ridit分析,均以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1肝臟肉眼觀察

麻醉后打開動物腹腔,觀察實驗動物肝臟,發(fā)現(xiàn)正常組大鼠肝臟肉眼觀察呈鮮紅色,邊緣銳利,表面光滑,質(zhì)地柔軟,無異常變化;模型組大鼠肝臟呈黃褐色,邊緣圓鈍,包膜緊張,表面不光滑,可見局灶性黃白色斑點,質(zhì)地較軟,肝臟體積明顯增大;SI高劑量組大鼠肝臟顏色淡紅,邊緣銳利,表面光滑,質(zhì)地柔軟,稍有腫大;SI中劑量組大鼠肝臟顏色變暗,邊緣稍鈍,表面不平,質(zhì)地柔軟,有腫大;SI低劑量組大鼠肝臟顏色微黃,邊緣鈍,肝臟表面呈沙粒樣改變,質(zhì)地較軟,體積增大。

2.2大豆異黃酮對NAFLD大鼠肝組織MDA、SOD和T-AOC水平的影響。

模型組肝組織內(nèi)MDA明顯高于正常組(P<0.01),而SOD和T-AOC則明顯低于正常組(P<0.01),應用SI低劑量治療對MDA、SOD和T-AOC水平?jīng)]有明顯影響(P>0.05),應用SI中、高劑量治療均能影響肝組織MDA、SOD和T-AOC水平(P<0.05,P<0.05)見表1。

3討論

肝臟是脂質(zhì)代謝的重要器官,肝脂肪變性可在短期內(nèi)發(fā)展為不可逆的肝損害,預后不容樂觀[2]。研究對脂肪肝有效的藥物已經(jīng)成為目前的熱點。脂質(zhì)過氧化在NAFLD中廣泛存在,氧化應激在NAFLD發(fā)病機制中的作用不可忽視。即肝中氧化抗氧化平衡失調(diào),可能是其重要機制[3]。本試驗通過建立大鼠高脂飲食性脂肪肝模型觀察大豆異黃酮的作用,結(jié)果顯示SI高、中劑量可降低模型組肝組織內(nèi)MDA濃度,提高SOD和T-AOC水平,改善肝組織病理變化。我們的研究結(jié)果表明大豆異黃酮能明顯提高NAFLD模型大鼠體內(nèi)的抗氧化能力,并在治療脂肪肝過程中發(fā)揮一定的作用。

參考文獻:

[1] 李燕.大豆異黃酮的抗氧化作用及其防治疾病作用[J].國外醫(yī)學衛(wèi)生學分冊,2001,28(2):100-103.

[2] Bacon BR,Farachvash MJ,Janney CG,el a1.Nonalcoholic steatoheatitis:an expanded clinical entity (see comments)[J].Gastroenterology,1994,107(4): 1103-1109.

[3] Koruk M,Taysi S,Savas MC,et a1.Oxidative stress and enzymatic antioxidant status in Patients with nonalcoholic steatohepatitis.Ann ClinLab Sci,2004,34(1):57-62.

(收稿日期2009-4-21)