鄧琳 逯軍

基金項目：海南省重點研發(fā)計劃項目（ZDYF2021SHFZ241）

引用本文：鄧琳，逯軍. RRM2B基因突變致線粒體DNA耗竭綜合征：兩例不同類型（8A和8B）患兒的臨床特點和基因分析［J］. 中國全科醫(yī)學(xué)，2024，27（29）：3704-3708. DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0520. ［www.chinagp.net］

DENG L，LU J. Mitochondrial DNA depletion syndrome caused by RRM2B gene mutation：clinical characteristics and genetic analysis of two cases with different types（8A and 8B）［J］. Chinese General Practice，2024，27（29）：3704-3708.

? Editorial Office of Chinese General Practice. This is an open access article under the CC BY-NC-ND 4.0 license.

【摘要】 RRM2B基因突變相關(guān)疾病根據(jù)遺傳方式和臨床表型可分為線粒體DNA耗竭綜合征8A型（MTDPS8A），線粒體DNA耗竭綜合征8B型（MTDPS8B），錐桿營養(yǎng)不良、感音神經(jīng)性耳聾和范可尼型腎功能障礙（RCDFRD），常染色體顯性進行性眼外肌麻痹伴線粒體DNA缺失5型（PEOA5）這4種類型。其中MTDPS8A、MTDPS8B均屬于線粒體DNA耗竭綜合征，遺傳方式相同，在疾病早期臨床表型復(fù)雜且具有異質(zhì)性，難以鑒別。本文通過系統(tǒng)回顧分析2例分別確診MTDPS8A、MTDPS8B患兒的臨床特點、基因檢測結(jié)果、診治經(jīng)過等病例資料，并復(fù)習(xí)相關(guān)文獻來總結(jié)這兩型的遺傳學(xué)特點，為今后遇到疑似病例提供診斷思路，進一步提高RRM2B基因突變相關(guān)線粒體腦肌病的臨床診斷率，也有助于評估預(yù)后情況。

【關(guān)鍵詞】 RRM2B基因；線粒體DNA耗竭綜合征8A型；線粒體DNA耗竭綜合征8B型；基因檢測；全外顯子測序

【中圖分類號】 R 725.9 【文獻標(biāo)識碼】 D DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0520

Mitochondrial DNA Depletion Syndrome Caused by RRM2B Gene Mutation：Clinical Characteristics and Genetic Analysis of Two Cases with Different Types（8A and 8B）

DENG Lin1，LU Jun1，2*

1.Department of Pediatrics，Central South University Xiangya School of Medicine Affiliated Haikou Hospital，Haikou 570208，China

2.Department of Pediatrics，Affiliated Hospital of Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，China

*Corresponding author：LU Jun，Professor/Chief physician/Doctoral supervisor；E-mail：Lu139762@163.com

【Abstract】 RRM2B gene mutation-related diseases can be divided into four types according to genetic pattern and clinical phenotype of mitochondrial DNA depletion syndrome 8A（MTDPS8A），mitochondrial DNA depletion syndrome 8B（MTDPS8B），rod-cone dystrophy，sensorineural deafness，and fanconi-type renal dysfunction（RCDFRD），progressive external ophthalmoplegia with mitochondrial and deletions，autosomal dominant 5（PEOA5）. Among them，MTDPS8A and MTDPS8B are both mitochondrial DNA depletion syndromes with the same genetic pattern，and the clinical phenotypes are complex and heterogeneous in the early stage，making it difficult to identify them. This paper systematically reviewed and analyzed the clinical characteristics，genetic test results，diagnosis and treatment process and other case data of two children diagnosed with MTDPS8A and MTDPS8B，and reviewed relevant literature to summarize the genetic characteristics of these two types，so as to provide diagnostic ideas for future suspected cases and further improve the clinical diagnosis rate of RRM2B mutation-related mitochondrial encephalomyopathy，which also helps to assess the prognosis.

【Key words】 RRM2B gene；Mitochondrial DNA depletion syndrome 8A；Mitochondrial DNA depletion syndrome 8B；Genetic testing；Whole-exome sequencing

RRM2B基因突變可導(dǎo)致多種遺傳性線粒體疾病，目前已報道的疾病類型包括線粒體DNA耗竭綜合征8A型（mitochondrial DNA depletion syndrome 8A，MTDPS8A），線粒體DNA耗竭綜合征8B型（mitochondrial DNA depletion syndrome 8B，MTDPS8B），錐桿營養(yǎng)不良、感音神經(jīng)性耳聾和范可尼型腎功能障礙（rod-cone dystrophy，sensorineural deafness，and fanconi-type renal dysfunction，RCDFRD），常染色體顯性進行性眼外肌麻痹伴線粒體DNA缺失5型（progressive external ophthalmoplegia with mitochondrial and deletions，autosomal dominant 5，PEOA5）［1-2］。RRM2B基因突變所致的綜合征中MTDPS8A、MTDPS8B、RCDFRD為常染色體隱性遺傳，而PEOA5為常染色體顯性遺傳，根據(jù)遺傳方式可初步鑒別各類綜合征［3］。本文通過描述2例攜帶RRM2B相同致病基因而分別出現(xiàn)MTDPS8A及MTDPS8B兩種不同臨床表型的患兒臨床資料，分析表型與基因型的相關(guān)性，以期提高臨床醫(yī)師對RRM2B基因突變相關(guān)疾病不同分型遺傳學(xué)的認識及診治水平。

1 病例簡介

患兒1，女，6個月，因“肌張力低下，豎頭無力，重癥肺炎”于2022-12-25入住三亞市婦幼保健院?；純河诟腥竞蟪霈F(xiàn)四肢肌張力低下，豎頭無力，伴呼吸困難，嗜睡，吃奶差，精神反應(yīng)差?；純合礕2P2，足月順產(chǎn)，出生時無窒息史及產(chǎn)傷史，既往體健，6月齡前生長發(fā)育同于正常同齡兒；有一胞兄，哥哥5月齡時發(fā)現(xiàn)先天性心臟?。ㄊ议g隔缺損），遂行室間隔缺損封堵術(shù)，術(shù)后哥哥病情加重，反復(fù)感染，四肢骨骼肌及呼吸肌無力，血乳酸值偏高，一直住院治療至1歲9月齡時因呼吸衰竭、心力衰竭死亡，住院期間完善全外顯子測序未發(fā)現(xiàn)與臨床表型高度相關(guān)且致病性證據(jù)充分的基因變異，在其他變異中發(fā)現(xiàn)哥哥8號常染色體上存在RRM2B基因c.125T>G、c.175G>C的復(fù)合雜合變異，但其臨床意義尚不明確；父母均體健，非近親婚配，母妊娠期無異常。查體：精神反應(yīng)差，頸軟，呼吸急促，三凹征陽性，雙肺呼吸音粗糙，可聞及濕性啰音，心律不齊，心音有力，未聞及病理性雜音；四肢肌力Ⅲ級，肌張力低下，余腹部及神經(jīng)系統(tǒng)未見異常。輔助檢查：血串聯(lián)質(zhì)譜示乙酰肉堿升高；尿有機酸分析示乳酸-2、2-羥基丁酸-2、丙酮酸-OX-2、3-羥基丁酸-2、乙酰乙酸-OX-2升高；血氣分析示乳酸3.38 mmol/L（參考范圍：1.0～1.4 mmol/L）；肝功能示丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶88.29 U/L（參考范圍：9～60 U/L），天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶161.72 U/L（參考范圍：15～45 U/L）；心肌酶譜示乳酸脫氫酶795.16 U/L（參考范圍：180～430 U/L），乳酸脫氫酶同工酶331.6 U/L（參考范圍：≤90 U/L），肌酸激酶557.81 U/L（參考范圍：<190 U/L），肌酸激酶-MB同工酶89.83 U/L（參考范圍：0～25 U/L）；腎功能示肌酐19.54 μmol/L（參考范圍：59～104 μmol/L），尿酸175.93 μmol/L（參考范圍：120～330 μmol/L）。尿常規(guī)、甲功五項、優(yōu)生五項、呼吸道病原學(xué)、顱腦MRI、心臟彩超未見異常。行全外顯子測序發(fā)現(xiàn)患兒第8號染色體上的RRM2B基因存在2個雜合突變，c.125T>G、c.175G>C構(gòu)成復(fù)合雜合變異。經(jīng)Sanger測序驗證，2個雜合突變分別遺傳自患兒父母。根據(jù)美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)與基因組學(xué)學(xué)會（ACMG）指南致病等級評估，c.125T>G為疑似致病變異，c.175G>C為臨床意義未明，考慮診斷為MTDPS8A。病初持續(xù)無創(chuàng)呼吸機輔助通氣，予以環(huán)磷腺苷營養(yǎng)心肌，聯(lián)合其他多種抗心力衰竭藥降低心肌耗氧量，復(fù)合輔酶、B族維生素補充能量，以及抗感染等對癥治療半月余，呼吸功能及心功能未見明顯好轉(zhuǎn)，家屬要求轉(zhuǎn)至上級醫(yī)院進一步治療，隨訪至2023-03-15，患兒由無創(chuàng)呼吸支持改為氣管切開機械通氣1個月后，呼吸費力較前改善，又調(diào)整為無創(chuàng)持續(xù)正壓通氣（CPAP），經(jīng)加拿大、美國等多國會診后加用單核苷酸調(diào)節(jié)細胞代謝，病情較平穩(wěn)，但仍需呼吸機維持支持治療。

患兒2，男，10個月，因“間斷腹瀉、嘔吐5月余，咳嗽3個月”于2020-07-28入住首都兒科研究所附屬兒童醫(yī)院?；純河谌朐呵?月余無明顯誘因出現(xiàn)腹瀉，解黃色稀便，6～8次/d，伴有嘔吐，3～5次/d，胃納差；近3個月出現(xiàn)咳嗽，喉中有痰鳴，偶有呼吸困難，1個月內(nèi)體質(zhì)量減輕1 kg?；純合礕1P1，足月順產(chǎn)，6月齡添加輔食，8月齡不會爬行，生長、運動發(fā)育落后于正常同齡兒，否認生后缺氧窒息史，家中未發(fā)現(xiàn)類似疾病史者。否認藥物、食物中毒史。體格檢查：嗜睡狀態(tài)，精神疲倦，易激惹，全身均勻性消瘦，重度營養(yǎng)不良，皮下脂肪菲薄，皮膚彈性欠佳，哭聲微弱，眼球稍凹陷，雙眼各向活動正常，雙側(cè)瞳孔等大等圓，對光反射靈敏，顱腦無畸形，全身皮膚及黏膜無黃染，頸軟無抵抗，舟狀腹，腹軟，無胃腸型及蠕動波，全腹無壓痛及反跳痛，肝脾肋下未捫及，腸鳴音6～8次/min，四肢肌力Ⅳ級，肌張力偏低。輔助檢查：血氣分析示乳酸4.0 mmol/L；電解質(zhì)示鈉離子125 mmol/L（參考范圍：137～147 mmol/L）；鉀離子3.3 mmol/L（參考范圍：3.5～5.3 mmol/L）；胸部CT、胸片均提示肺炎；血串聯(lián)質(zhì)譜、尿有機酸分析、大便常規(guī)、糞便培養(yǎng)及涂片、輪狀病毒、肝腎功能、心肌酶譜、血脂全項、自身抗體、類風(fēng)濕因子、腹部彩超及腹部CT未見異常。經(jīng)全外顯子測序發(fā)現(xiàn)患兒在第8號染色體上的RRM2B基因存在兩處雜合變異——c.420G>C和c.321+1G>A，家系驗證結(jié)果顯示此復(fù)合雜合變異分別來源于其父母。根據(jù)ACMG指南，c.420G>C為臨床意義未明，c.321+1G>A為疑似致病變異，考慮診斷為MTDPS8B。患兒曾于外院多次求診，完善相關(guān)檢查均未明確病因，予以深度水解蛋白奶粉喂養(yǎng)、益生菌調(diào)節(jié)腸道菌群紊亂等處理后仍反復(fù)腹瀉、嘔吐，體質(zhì)量增加不滿意。在本次住院期間，針對消化道癥狀積極給予止瀉、腸內(nèi)及腸外營養(yǎng)、抑酸護胃、維持電解質(zhì)平衡和酸堿平衡等治療；因呼吸肌無力合并感染，肺炎加重，甚至出現(xiàn)呼吸衰竭，予以無創(chuàng)呼吸機輔助通氣20余天及抗感染治療后，肺部體征逐漸好轉(zhuǎn)。隨后經(jīng)基因測序證實為線粒體疾病，予以補充輔酶Q10、B族維生素、左卡尼汀等能量合劑改善細胞代謝。出院后繼續(xù)口服能量合劑，隨訪至2023-05-06，腹瀉、嘔吐頻次較前減少，胃納尚可，仍易反復(fù)肺部感染，嚴重時使用家用呼吸機可有效改善通氣，體質(zhì)量9 kg（<-3 SD），生長發(fā)育緩慢，智力、運動發(fā)育稍落后。

對上述2例RRM2B基因突變患兒的對比分析見表1。本研究經(jīng)過中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)［倫理審查批件編號：2022-（倫審）-035］，并已獲得患兒父母的知情同意。

2 討論

MTDPS8A是由RRM2B基因純合或復(fù)合雜合突變引起的一類嚴重的腦肌病型線粒體DNA耗竭綜合征［4］。該病多于嬰幼兒期發(fā)病，病情進展快，死亡率高，臨床表現(xiàn)以肌無力、肌張力低下、中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損和腎小管病變?yōu)樘卣?。RRM2B基因突變患者中還可出現(xiàn)較為溫和的臨床表型，通常以頑固性腹瀉、嘔吐為首發(fā)癥狀，稱為MTDPS8B。其特征為胃腸運動障礙、惡病質(zhì)、眼肌麻痹、上瞼下垂、呼吸衰竭、周圍神經(jīng)病變和大腦MRI改變，與線粒體神經(jīng)胃腸腦肌?。╩itochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy，MNGIE）表型相似［5］。回顧國內(nèi)外文獻，截至目前全球共有16篇文獻報道了約39例MTDPS8A綜合征，國內(nèi)僅有4例報道；MTDPS8B綜合征更為罕見，國內(nèi)外各有1例報道，均為成年發(fā)病病例，本文患兒2為報道的年齡最小的病例。上述兩病例各含1個突變位點——c.125T>G、c.321+1G>A在國內(nèi)外數(shù)據(jù)庫中未見文獻報道，本文為全世界首次報道，擴大了MTDPS8A和MTDPS8B的基因譜。

MTDPS8A可導(dǎo)致多系統(tǒng)嚴重受累，除了常見的肌無力、肌張力低下和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損外，還表現(xiàn)為喂養(yǎng)困難、生長發(fā)育遲滯、呼吸衰竭以及伴腎小管疾病等［6］。若累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)可表現(xiàn)為精神運動發(fā)育遲滯、認知障礙、癲癇發(fā)作、聽力喪失、智力低下、步態(tài)共濟失調(diào)等，多出現(xiàn)于病程后期。若發(fā)生呼吸衰竭通常需要進行機械輔助通氣才能有所緩解。KOLLBERG等［7］描述了具有親緣關(guān)系的患有MTDPS8A綜合征的兄弟，表型嚴重，分別在3月齡和5月齡去世，均存在喂養(yǎng)困難、發(fā)育遲緩、嚴重的肌張力低下和高乳酸血癥的表現(xiàn)，其中哥哥還發(fā)展為腎小管疾病。根據(jù)病情的嚴重程度，可對與MTDPS8A具有相似臨床表型的MTDPS8B進行鑒別診斷，MTDPS8B型患者臨床異質(zhì)性更高，但普遍較MTDPS8A型患者癥狀輕，病程也相對較長，患者甚至可以成年期起病，多見有胃腸蠕動障礙、眼外肌麻痹和/或眼瞼下垂、周圍神經(jīng)病變等特異性表現(xiàn)［8］。不同于由TYMP基因?qū)е碌慕?jīng)典MNGIE綜合征，MTDPS8B患者顱腦MRI常無彌漫性腦白質(zhì)病變，而表現(xiàn)為斑片狀腦白質(zhì)病變或正常［9］。SHAIBANI等［5］在2009年報道了1名42歲的女性表現(xiàn)為MNGIE樣表型，其在30歲時出現(xiàn)反復(fù)惡心、嘔吐和體質(zhì)量減輕，37歲時眼球活動受限、眼肌無力、步態(tài)不穩(wěn)，最后基因測序發(fā)現(xiàn)RRM2B基因c.329G>A、c.362G>A復(fù)合雜合變異。早期癥狀不典型的MTDPS8B患者易被誤診為急性胃腸炎、食物蛋白過敏相關(guān)性直腸結(jié)腸炎、神經(jīng)性厭食、腸易激綜合征等而延誤診治。

病例1中具有親緣關(guān)系的兄妹先后發(fā)病，具有相似的臨床發(fā)展過程。妹妹于出生6個月先后出現(xiàn)肌張力低下、豎頭無力、喂養(yǎng)困難、重癥肺炎、呼吸衰竭等癥狀，血清中肌酸激酶、乳酸、?；鈮A升高，尿液中多種有機酸如乳酸、丙酮酸、三羧酸循環(huán)及脂肪酸β-氧化的中間代謝產(chǎn)物濃度增加，肝功能及心功能相關(guān)指標(biāo)也異常增高，提示患兒存在線粒體功能障礙。對比哥哥病史，哥哥于5月齡時手術(shù)創(chuàng)傷后感染導(dǎo)致發(fā)病，表現(xiàn)為肌無力及肌張力低下、乳酸酸中毒、反復(fù)肺部感染，對癥治療1年余后，因出現(xiàn)嚴重并發(fā)癥搶救無效去世。兄妹均在嬰兒期發(fā)病，在肌無力出現(xiàn)后伴隨病情的嚴重暴發(fā)，提示臨床醫(yī)生當(dāng)確診或疑似患者出現(xiàn)肌無力癥狀后，應(yīng)在早期積極提供呼吸支持和營養(yǎng)支持，以延緩疾病進展。由于兄妹發(fā)病較早，尚不能對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育進行評估，隨著妹妹逐漸成長，可能會并發(fā)腎小管病變、抽搐、眼外肌麻痹、聽力下降等新的臨床表現(xiàn)，這需要后期定期隨訪。從上述兄妹臨床表現(xiàn)來看，均符合MTDPS8A的典型表現(xiàn)，但若隨訪過程中出現(xiàn)新的異常表型提示其他綜合征，可能需要重新診斷評估。病例2患兒4月齡發(fā)病，以腹瀉、嘔吐起病，逐漸發(fā)展為營養(yǎng)不良導(dǎo)致惡病質(zhì)，完善腹部影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)異常，但患兒胃腸道動力障礙問題明顯并呈慢性進行性加重，無法單純以胃腸道感染性或器質(zhì)性疾病解釋，結(jié)合其嚴重的營養(yǎng)不良、低BMI、肌張力低下、肌無力等表現(xiàn)，不排除線粒體疾病可能是引起難治性腹瀉的重要原因。由于患兒年齡尚小，主要表現(xiàn)為胃腸道及呼吸道癥狀，缺乏眼肌麻痹或周圍神經(jīng)病癥狀，亦未進行肌肉活檢及顱腦MRI檢查，除了基因檢測外還需長期隨訪得到進一步證據(jù)支持診斷。出院后患兒長期線粒體雞尾酒療法效果較為滿意，強烈提示MTDPS8B的診斷。

MTDPS8A相關(guān)致病突變目前報道了4種突變類型，包括錯義突變、無義突變、缺失突變、剪接突變，以錯義突變多見［10］。國內(nèi)確診MTDPS8A患兒的基因型均為復(fù)合雜合變異，包括RRM2B基因c.16delA和c.175G>C突變，c.587A>G和c.424G>A突變，c.231delC和c.806C>G突變，c.456-2A>G和c.212T>C突變。病例1家系中哥哥先發(fā)病但行全外顯子測序未發(fā)現(xiàn)與表型相關(guān)的明確致病性變異，對于其他變異信息也未予特別關(guān)注，診斷不明。直到哥哥去世不久后妹妹也在感染后出現(xiàn)相同表型，這一巧合提示兩兄妹可能存在相同的致病基因，于是再次對妹妹進行全外顯子測序發(fā)現(xiàn)可疑變異——RRM2B基因存在c.125T>G和c.175G>C復(fù)合雜合變異，父母為無癥狀攜帶者。隨后對哥哥基因檢測結(jié)果進行回顧分析有了新的發(fā)現(xiàn)——在其非相關(guān)致病基因中，存在與妹妹相同的基因變異。結(jié)合臨床表現(xiàn)，可以證實該兄妹為同一種遺傳性疾病。上述2個突變位點均為錯義突變，c.125T>G為第125號核苷酸由胸腺嘧啶T突變?yōu)轼B嘌呤G的核苷酸變異，導(dǎo)致第42號氨基酸由苯丙氨酸變成半胱氨酸；該變異位于突變熱點區(qū)域，在正常人群數(shù)據(jù)庫中，其突變頻率未知，通過生物信息學(xué)蛋白功能預(yù)測軟件REVEL、SIFT、PolyPhen_2、MutationTaster、GERP+進行分析，均認為是有害變異，滿足致病性證據(jù)“中等致病性證據(jù)PM1+中等致病性證據(jù)PM2+支持致病性證據(jù)PP3”，可初步判斷為疑似致病性變異（LP）。c.175G>C為第175號核苷酸由鳥嘌呤G突變?yōu)榘奏的核苷酸變異，導(dǎo)致第59號氨基酸由丙氨酸變成脯氨酸，與c.125T>G存在相同的致病性證據(jù)“中等致病性證據(jù)PM2+支持致病性證據(jù)PP3”，因沒有位于熱點突變區(qū)域而缺少中等致病性證據(jù)PM1，致病變異等級初步判定為臨床意義未明（VUS）。王彥紅等［4］發(fā)現(xiàn)1例2月齡女患兒的RRM2B基因存在c.16delA和c.175G>C復(fù)合雜合致病突變并確診為MTDPS8A，利用了SWISS-MODEL軟件對c.175G>C突變位點進行分析，該位點發(fā)生的氨基酸變異p.Ala59Pro位于α螺旋結(jié)構(gòu)域上，突變后取代丙氨酸的脯氨酸亞氨基將缺少一個氫原子，分子即失去一個中心氫鍵，而α螺旋作為蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)是靠氫鍵維持穩(wěn)定，此外該位點在進化過程中高度保守，若發(fā)生突變將影響蛋白功能。BOURDON等［10］也建立了分子模型發(fā)現(xiàn)RRM2B基因突變通過改變分子內(nèi)相互作用破壞了蛋白質(zhì)的保守α螺旋區(qū)域，再次驗證了這一突變的破壞性。經(jīng)上述綜合分析，盡管目前缺乏基礎(chǔ)實驗支持，但通過對蛋白功能進行預(yù)測分析，c.125T>G和c.175G>C突變的致病性相對明確。

MTDPS8B目前國內(nèi)外僅報道過2種基因型——RRM2B基因c.329G>A和362G>A復(fù)合雜合變異、c.420G>C純合突變［5，11］。病例2患兒為c.420G>C和c.321+1G>A復(fù)合雜合變異，c.420G>C為第420號核苷酸由鳥嘌呤G突變?yōu)榘奏的核苷酸變異，導(dǎo)致第140號氨基酸由亮氨酸變成苯丙氨酸；該變異在正常人群數(shù)據(jù)庫中未見報道，REVEL軟件預(yù)測為有害，并且存在隱性遺傳模式，與另一疑似致病變異反式分布，綜合“中等致病性證據(jù)PM2+中等致病性證據(jù)PM3+支持致病性證據(jù)PP3”，初步判定為VUS。王建力等［11］建立了RRM2B基因c.420G>C純合突變細胞模型，研究發(fā)現(xiàn)突變細胞中RRM2B基因蛋白表達水平下調(diào)，線粒體DNA含量也顯著下降，證明了此突變會導(dǎo)致RRM2B基因功能受損，滿足“強致病性證據(jù)PS3”，因此可升級致病性證據(jù)為LP。c.321+1G>A為第321號氨基酸由鳥氨酸G突變?yōu)橄汆堰蔄的核苷酸變異，導(dǎo)致氨基酸發(fā)生5'端剪切變異，該變異在正常人群數(shù)據(jù)庫中也未見報道；c.321+1G>A為存在功能喪失（loss of function，LOF）致病機制的基因發(fā)生經(jīng)典剪切位點變異，綜合“非常強致病性證據(jù)PVS1+中等致病性證據(jù)PM2”，即可判定為LP。結(jié)合表型與基因型特點，病例2患兒MTDPS8B診斷明確。

RRM2B基因是定位于常染色體8q22.3區(qū)的核基因，該基因編碼核糖核苷酸還原酶（ribonucleotide reductase，RNR）的p53誘導(dǎo)型小亞基（p53R2）［12］和R2亞基。RNR是由結(jié)合底物和具有變構(gòu)效應(yīng)的同二聚體大亞基R1（由RRM1基因編碼）和含有高度保守的酪氨酸殘基的同二聚體小亞基R2或p53R2組成的一種異源四聚體酶［13］。RNR可以還原二磷酸核糖核苷酸（NDP）生成二磷酸脫氧核糖核苷酸（dNDP），催化三磷酸脫氧核糖核苷酸（dNTP）從頭合成的末端步驟，dNTP最后被定位到線粒體和細胞核以參與mtDNA的合成和nDNA的損傷后修復(fù)過程。p53R2蛋白可參與維持細胞有絲分裂過程，負責(zé)供應(yīng)dNTP以滿足細胞或器官功能所需，尤其對于不斷復(fù)制的mtDNA至關(guān)重要［14］。如果RRM2B基因發(fā)生突變，則p53R2蛋白功能受損，將干擾dNTPs庫的穩(wěn)定，影響mtDNA合成及修復(fù)，從而導(dǎo)致mtDNA拷貝數(shù)減少或多個mtDNA缺失積累而致病。TANAKA等［15］提出p53R2蛋白的失活導(dǎo)致RNR活性不足，直接干擾DNA損傷時的轉(zhuǎn)錄，無法進行正常的DNA修復(fù)；p53R2的錯誤調(diào)控也可能引起dNTP池失衡和DNA修復(fù)機制失調(diào)，從而增加突變的頻率。KIMURA等［16］培養(yǎng)了一批存在RRM2B基因缺陷的小鼠，這些小鼠在斷奶前發(fā)育正常，但此后出現(xiàn)生長遲緩和早期死亡，病理檢查顯示多器官衰竭。上述研究表明RRM2B基因所編碼的p53R2亞基在維持dNTP水平，以及修復(fù)DNA損傷方面具有關(guān)鍵作用，有助于明確臨床表型與潛在的遺傳缺陷之間的相關(guān)性。對于不同形式的線粒體DNA耗竭綜合征，已經(jīng)提出，通過補充脫氧核糖核苷酸繞過核苷挽救的缺陷步驟可能成為該疾病的治療策略。有研究者建立了另外一種致病基因TK2缺陷的小鼠模型，并得出結(jié)論口服補充的單磷酸脫氧胞苷（dCMP）和單磷酸脫氧胸苷（dTMP）可以延遲疾病發(fā)作和延長生存期［17］。對于RRM2B基因缺乏的治療，由于現(xiàn)有的動物模型無法充分概括人類疾病，因此尚未使用合適的動物敲除模型來進行體內(nèi)研究，補充脫氧核糖核苷酸的有效性還需要更深入的分子生物學(xué)基礎(chǔ)研究來進一步驗證?；純?已嘗試應(yīng)用單核苷酸治療，其療效待繼續(xù)隨訪評估。

綜上，RRM2B基因突變攜帶者的表型和基因型較為廣泛，正確鑒別分型及全面分析變異信息存在一定困難，尤其是MTDPS8A、MTDPS8B兩型極易被漏診或誤診。大多數(shù)MTDPS8A的預(yù)后不良，受影響的患者無法存活到成年，而MTDPS8B預(yù)后相對較好。目前臨床上針對RRM2B基因突變患者暫無特效治療，一般給予補充能量、維持器官功能等對癥治療以改善癥狀，但仍迫切需要新的治療方法。

作者貢獻：鄧琳進行文章的構(gòu)思與設(shè)計，病例資料及文獻的收集，撰寫和修訂論文；逯軍負責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，指導(dǎo)寫作，對文章整體負責(zé)，監(jiān)督管理。

本文無利益沖突。

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（收稿日期：2023-06-28；修回日期：2023-10-28）

（本文編輯：賈萌萌）