許建嬌,張瀚文,陳煥文,周俊華,王美惠,石鵬,楊青山,項(xiàng)嘉建,宇佳

摘要：為探究長(zhǎng)林小蠹對(duì)不同生理狀態(tài)黑松（Pinus thunbergii）揮發(fā)物的選擇偏好性，利用動(dòng)態(tài)頂空吸附法，分別收集健康和不同受害程度的黑松樹(shù)干和樹(shù)根的揮發(fā)物，通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）對(duì)收集的揮發(fā)物進(jìn)行鑒定與分析，采用觸角電位儀（Electroantennagraphy，EAG）和Y形嗅覺(jué)儀，分析鑒定到的黑松中主要揮發(fā)物及其他人鑒定到的黑松中主要揮發(fā)物對(duì)長(zhǎng)林小蠹的電生理和行為影響。結(jié)果表明，健康和不同受害程度的黑松樹(shù)干、樹(shù)根的揮發(fā)物在組成和含量上部分差異顯著（P＜0.05）。樹(shù)干中主要化合物（1R）-（+）-α-蒎烯的相對(duì)含量由健康木轉(zhuǎn)向萎蔫木階段呈下降趨勢(shì)，在萎蔫木到枯死木階段相對(duì)含量上升。而樹(shù)根由健康木階段轉(zhuǎn)向?yàn)l死木階段時(shí)（1R）-（+）-α-蒎烯的相對(duì)含量逐漸減少，在枯死木階段其相對(duì)含量有所上升。EAG測(cè)試結(jié)果顯示，在測(cè)定的10種揮發(fā)物中，有9種引發(fā)的雌成蟲(chóng)和雄成蟲(chóng)EAG反應(yīng)值之間有顯著差異。其中，雌蟲(chóng)對(duì)0.1 mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯的反應(yīng)值最高，雄蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的羅勒烯反應(yīng)值最高。Y形嗅覺(jué)儀行為反應(yīng)結(jié)果顯示，不同質(zhì)量濃度的揮發(fā)物對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)的作用不同。0.01 ～ 100 mg/mL的α-蒎烯、100 mg/mL的α-松油烯、10? mg/mL和100? mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯、 （1R）-（+）-α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄成蟲(chóng)都有較強(qiáng)的吸引作用，10 mg/mL的（-）-β-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄成蟲(chóng)都有較強(qiáng)的驅(qū)避作用。由此，0.01 ～ 100 mg/mL的α-蒎烯；100? mg/mL的α-松油烯、10? mg/mL和100 mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯、 （1R）-（+）-α-蒎烯可以作為長(zhǎng)林小蠹雌雄成蟲(chóng)引誘劑成分，10? mg/mL的（-）-β-蒎烯可作為長(zhǎng)林小蠹成蟲(chóng)驅(qū)避劑成分。

關(guān)鍵詞：長(zhǎng)林小蠹；揮發(fā)性化合物；GC-MS；觸角電位；行為反應(yīng)

中圖分類號(hào)：S763.38; S791.256文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1006-8023（2024）03-0101-14

Electrophysiological and Behavioral Responses of Hylurgus ligniperda?to Pinus thunbergii Volatiles

XU Jianjiao， ZHANG Hanwen， CHEN Huanwen， ZHOU Junhua， WANG Meihui， SHI Peng，?YANG Qingshan， XIANG Jiajian， YU Jia*

（College of Forestry， Northeast Forestry University， Harbin 150040， China）

Abstract：To explore the selectivity of the H.ligniperda to volatiles from Pinus thunbergii in different physiological states， the dynamic headspace adsorption was used to collect volatiles from healthy and harmed main trunks and roots of P. thunbergii in different damage degrees. The collected volatile samples were identified and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）， and the electrophysiological and behavioral responses of H. ligniperda to the main volatiles identified in this paper （or published paper） from P.thunbergii were analyzed by electroantennography （EAG） recording system and Y-type olfactory apparatus. The results showed that there were significant differences （P＜0.05） in the composition and content of volatiles in trunks and roots of P. thunbergii with different degrees of damage between healthy and different degree of damage. The relative content of the main compound （1R）-（+）-α-Pinene in the trunk decreased from healthy to wilted tree， and increased slightly in the wilted to dead standing tree stage. The relative content of （-）-β-Pinene increased significantly from the healthy stage to weakened tree， and gradually decreased in the weakened stage to dead standing tree. The relative content of （1R）-（+）-α-Pinene in the roots gradually decreased during the transition from healthy tree to dying tree stage， and its relative content increased in the dead standing tree. EAG test results showed that among those 10 tested volatiles， there were 9 substances triggered significant different EAG response values between female and male adults of H. ligniperda. Females had the highest response value to （1S）-（-）-α-Pinene at 0.1 mg/mL， and males had the highest response?value to 0.01 mg/mL Ocimene. The behavioral response results of Y-type olfactory apparatus showed that different concentrations of volatiles had different effects on male and female H. ligniperda. 0.01 - 100 mg/mL α-Pinene， 100 mg/mL α-Terpinene， 10 mg/mL and 100 mg/mL （1S）-（-）-α-Pinene， （1R）-（+）-α-Pinene had a strong attractive effect on both male and female adults H. ligniperda， and 10 mg/mL（-）-β-Pinene had a strong repellent effect on both male and female adults H. ligniperda. Thus， 0.01-100 mg/mL α-Pinene， 100 mg/mL of α-Terpinene， 10 mg/mL and 100 mg/mL of （1S）-（-）-α-Pinene， （1R）-（+）-α-Pinene could be used as an attractant component for male and female adults H. ligniperda， and 10 mg/mL of （-）-β-Pinene could be used as an repellent component for adults H. ligniperda.

Keywords：Hylurgus ligniperda Fabricius; volatile compounds; GC-MS; antennal potential; behavioral responses

0引言

長(zhǎng)林小蠹（Hylurgus ligniperda），又名紅毛小蠹[1]，屬鞘翅目（Coleoptera）象蟲(chóng)科（Curculionidae）林小蠹屬（Hylurgus），主要危害松屬（Pinus）植物，寄主樹(shù)種達(dá)20余種。現(xiàn)階段，長(zhǎng)林小蠹在我國(guó)的膠東半島危害較為嚴(yán)重，主要對(duì)瀕死或衰弱的黑松（Pinus thunbergii）、華山松（P. armandii）以及赤松（P. densiflora）等林木進(jìn)行危害[2-3]，其危害部位主要為樹(shù)干、樹(shù)干基部或裸露的根部。研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)林小蠹也可穿過(guò)土壤對(duì)林木的根部進(jìn)行危害[2]。目前，我國(guó)對(duì)于長(zhǎng)林小蠹的研究主要停留在形態(tài)特征和分子鑒定技術(shù)方面，并未探明不同樹(shù)勢(shì)的寄主是否對(duì)長(zhǎng)林小蠹具有一定的趨避或引誘作用。但已有研究表明，寄主植物揮發(fā)物對(duì)昆蟲(chóng)的行為具有一定的調(diào)控作用，特別是在寄主定位、取食、產(chǎn)卵、聚集和傳播等方面 [4-5]。而小蠹主要通過(guò)其嗅覺(jué)的特異性來(lái)識(shí)別某些化合物，進(jìn)而將其作為對(duì)寄主搜尋的信號(hào)[6]。研究發(fā)現(xiàn)，亞健康和衰弱樹(shù)木易釋放出特有的化學(xué)氣味物質(zhì)，使部分小蠹蟲(chóng)對(duì)其產(chǎn)生趨向行為[7]。如部分小蠹蟲(chóng)對(duì)衰弱樹(shù)木中產(chǎn)生的乙醇有一定的趨性[8]；縱坑切梢小蠹（Tomicus piniperda）對(duì)受傷的歐洲赤松（P. sylvestris）油脂中的單萜有強(qiáng)烈的反應(yīng)[9]。而黑松中也一定存在某些化學(xué)物質(zhì)來(lái)影響長(zhǎng)林小蠹的寄主定位。

植物的不同部位所產(chǎn)生的化合物種類及含量有顯著差異[10]，而相同部位在不同生理時(shí)期所產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)也有很大區(qū)別[11]。在不同的生理狀態(tài)下，寄主揮發(fā)物的組分差異對(duì)昆蟲(chóng)的行為會(huì)有一定影響[12]。如衰弱的云南松（P. yunnanensis）對(duì)縱坑切梢小蠹的引誘效果就顯著高于健康樹(shù)[13]；榆小蠹（Hylurgopinus rufipes）會(huì)利用榆樹(shù)在瀕臨死亡時(shí)釋放出與健康株有差異的物質(zhì)，來(lái)尋找合適的寄主進(jìn)行繁殖[14]。研究發(fā)現(xiàn)，黑松健康木、機(jī)械損傷木中的揮發(fā)物隨著時(shí)間的改變其種類發(fā)生變化[15]。郝德君等[16]在健康的黑松中鑒定出27種組分，在松材線蟲(chóng)危害木中鑒定出32種組分。而黑松在被長(zhǎng)林小蠹危害后的衰敗過(guò)程中化學(xué)成分物質(zhì)以及含量發(fā)生的變化，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。

小蠹對(duì)不同寄主揮發(fā)物的行為反應(yīng)研究常通過(guò)觸角電位進(jìn)行探究，篩選出能影響小蠹趨性的寄主揮發(fā)物，從而對(duì)小蠹進(jìn)行監(jiān)測(cè)和防治。小蠹對(duì)不同種類、不同質(zhì)量濃度的揮發(fā)物有不同的反應(yīng)。例如，嚴(yán)廣等[17]研究發(fā)現(xiàn)云南切梢小蠹（T. yunnanensis）對(duì)初侵害的云南松松針中的α-蒎烯、β-蒎烯和γ-萜品烯有觸角電位反應(yīng)；華山松大小蠹（Dendroctonus armandi）雌雄成蟲(chóng)對(duì)不同質(zhì)量濃度、不同種類華山松針葉、韌皮部揮發(fā)性物具有不同的觸角電位反應(yīng)[18]。在1 mg/mL質(zhì)量濃度下，橡膠樹(shù)揮發(fā)物中的P-傘花烴、長(zhǎng)葉烯等對(duì)橡膠材小蠹（Xyleborus affinis）具有引誘作用；而鄰苯二甲酸二乙酯、棕櫚酸甲酯等化合物對(duì)橡膠材小蠹蟲(chóng)均具有趨避作用[19]。目前，利用寄主植物揮發(fā)物進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)及防治成為了一種避免蟲(chóng)害爆發(fā)的方法。梁傳和等[20]使用α- 蒎烯配合信息素監(jiān)測(cè)縱坑切梢小蠹的發(fā)生規(guī)律，監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確率達(dá)到了100%。李麗莎等[21]利用寄主植物化合物制備的引誘劑對(duì)林間縱坑切梢小蠹實(shí)施了有效的監(jiān)測(cè)，準(zhǔn)確掌握了縱坑切梢小蠹的種群動(dòng)態(tài)。寄主植物揮發(fā)物不僅能有效監(jiān)測(cè)害蟲(chóng)對(duì)林木的侵害，而且能有效減少害蟲(chóng)對(duì)寄主的選擇。例如，張維平[22]通過(guò)使用華山松中的α-蒎烯和 β-石竹烯做誘芯懸掛誘捕器，明顯減輕了華山松大小蠹對(duì)華山松的危害。還有利用植物源引誘劑誘殺云杉八齒小蠹（Ips typographus）、毛束小蠹（Scolytus intricatus ）、重齒小蠹（I. duplicatus）、紅脂大小蠹（Dendroctonus valens）、南部松齒小蠹（I. grandicollis）以及云南縱坑切梢小蠹（T. piniperda） [23-26]的報(bào)道，都證明了研究昆蟲(chóng)對(duì)寄主植物揮發(fā)物的選擇機(jī)制，可以有效監(jiān)測(cè)和預(yù)防蟲(chóng)害的發(fā)生及蔓延，為防治蟲(chóng)害發(fā)生提供了有效的防治手段。

本研究利用氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，研究了5種不同生理狀態(tài)下黑松樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物化學(xué)成分及相對(duì)含量，鑒定并選擇差異化合物對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄成蟲(chóng)的電生理和行為反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定，可為不同生理狀態(tài)、部位所釋放揮發(fā)物成分的系統(tǒng)研究提供借鑒，也為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)長(zhǎng)林小蠹植物源引誘劑奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1供試蟲(chóng)源

2021年11月從山東省煙臺(tái)市利用誘捕器收集揚(yáng)飛期長(zhǎng)林小蠹成蟲(chóng)，收集的長(zhǎng)林小蠹放置在裝有被害木樹(shù)皮的紗網(wǎng)籠中。測(cè)試時(shí)要用手輕輕擠壓其腹部末端，根據(jù)其是否發(fā)聲辨別雌雄蟲(chóng)，發(fā)聲的為雄蟲(chóng)，不發(fā)聲的為雌蟲(chóng)[27]，雌蟲(chóng)重復(fù)鑒定3次。

1.2儀器與設(shè)備

氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀（6890N，5975C安捷倫科技有限公司，美國(guó)）；氣相色譜－觸角電位聯(lián)用儀（7890A，安捷倫科技有限公司，美國(guó)）；HP-5MS安捷倫毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm filmthickness）數(shù)據(jù)采集控制器TDAC-4；氣味刺激控制裝置CS-55。大氣采樣儀QC-1S型（北京勞動(dòng)保護(hù)科學(xué)研究所）；吸附劑管（內(nèi)填充吸附劑，長(zhǎng)11 cm，內(nèi)徑0.4 cm）；活性炭管（長(zhǎng)20 cm，直徑1.5 cm）；聚四氟乙烯管。

1.3黑松受害等級(jí)劃分

參照黑松受害木的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[28-33]，劃分了健康木、衰弱木、萎蔫木、瀕死木和枯死木5個(gè)害木等級(jí)見(jiàn)表1，對(duì)每個(gè)危害等級(jí)的樹(shù)隨機(jī)選取3株作為樣本。

1.4揮發(fā)物收集與分析鑒定

收集樹(shù)干揮發(fā)物時(shí)，在待測(cè)黑松距地面1.3 m處，選取樹(shù)皮完好的部位，用毛刷將樹(shù)皮表面附屬物清理干凈后，用裝有閥門的聚四氟乙烯薄膜包裹。具體參考方法根據(jù)解丹等[34]的研究改進(jìn)。收集樹(shù)根揮發(fā)物時(shí)先選取平直無(wú)機(jī)械損傷的樹(shù)根，將所選樹(shù)根鋸成1 m長(zhǎng)的木段，斷截面用濕棉花包裹避免失水，用毛刷清理表面浮土，再用裝有閥門的聚四氟乙烯薄膜包裹樹(shù)根段中部，包裹方式同上。

抽氣時(shí)，先用聚四氟乙烯軟管將大氣采樣儀進(jìn)氣口與采樣桶的出氣口連接，再依次打開(kāi)出氣口閥門與大氣采樣儀開(kāi)關(guān)，如圖1（a）所示。 對(duì)采樣桶進(jìn)行抽氣，直到采樣桶完全貼合到樹(shù)皮上停止抽氣，然后依次關(guān)閉出氣口閥門和大氣采樣儀開(kāi)關(guān)。充氣時(shí)，用聚四氟乙烯軟管依次連接大氣采樣儀出氣口、活性炭管和采樣桶的進(jìn)氣口，隨后打開(kāi)進(jìn)氣口閥門與大氣采樣儀，當(dāng)采樣桶中的空氣達(dá)到其容量的70%時(shí)停止充氣，如圖1（b）所示。然后進(jìn)行循環(huán)采氣，循環(huán)采氣時(shí)將采樣桶的進(jìn)氣口與活性炭管和大氣采樣儀的出氣口連接；采樣桶的出氣口與吸附劑采樣管和另一臺(tái)大氣采樣儀的進(jìn)氣口依次相連，如圖1（c）所示。最后打開(kāi)采樣桶的進(jìn)氣口與出氣口閥門，同時(shí)啟動(dòng)與兩閥門相連的大氣采樣儀進(jìn)行循環(huán)采氣。在揮發(fā)物采集5 h后，將采樣系統(tǒng)關(guān)閉，然后將吸附管迅速取下，并用鋁箔紙和封口膜封住兩端，低溫帶回試驗(yàn)室。在室內(nèi)環(huán)境下，連續(xù)3次用0.5 mL的色譜級(jí)正己烷進(jìn)行洗脫，洗脫液裝入2 mL的棕色進(jìn)樣瓶中，做好標(biāo)記后放在-4 ℃冰箱中備用。

利用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析鑒定，通過(guò)譜庫(kù)檢索和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照、復(fù)合，確定化合物的具體成分。氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀條件為進(jìn)樣口溫度為250 ℃，以5 ℃/min升溫至120 ℃，再以15 ℃/min升到280 ℃，并保持5 min，以高純氮?dú)庾鳛檩d氣，氫氣流量為40 mL，空氣流量為450 mL/min，氣譜接口溫度為250 ℃，氣譜－質(zhì)譜接口溫度250 ℃，EI離子源，掃描范圍30～500 m/z，離子源和四級(jí)桿溫度分別為250 ℃和150 ℃，以高純氦氣作為載氣，掃描頻率為5次/s。

1.5電生理以及行為測(cè)定

1.5.1供試揮發(fā)物

本試驗(yàn)選取10種黑松揮發(fā)的萜烯類化合物進(jìn)行觸角電位和行為學(xué)試驗(yàn)，見(jiàn)表2。其中α-蒎烯、（-）-β-蒎烯、α-松油烯、莰烯、月桂烯、3-蒈烯、（1S）-（-）-α-蒎烯、（1R）-（+）-α-蒎烯為本研究從黑松樹(shù)干和樹(shù)根中所鑒定到的，檜烯和羅勒烯分別由王海濤[15]、郝德君等[16]從黑松中鑒定得到。以液體石蠟為溶劑，將各樣品均配制成0.01、0.1、1.0、10、100 mg/mL的5個(gè)質(zhì)量濃度梯度的溶液。

1.5.2觸角電位測(cè)定

將切下的觸角通過(guò)毛細(xì)玻璃管連接在電極上，在巴斯德管中揮發(fā)物載體滴加樣品10 μL，將其滴管末端連接氣體刺激控制裝置。待基線穩(wěn)定后給予刺激，每個(gè)樣品平均刺激6次；2次刺激的中間需用凈化空氣吹2 min，以減少氣味分子在觸角附近堆積。以液體石蠟作為對(duì)照，相同樣品按質(zhì)量濃度自低向高進(jìn)行檢測(cè)。

1.5.3Y形嗅覺(jué)儀中行為測(cè)定

利用Y形嗅覺(jué)儀測(cè)定長(zhǎng)林小蠹對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)的生物活性。氣味源為2 cm×0.5 cm的濾紙，滴加10 μL樣品，以液體石蠟作對(duì)照。從Y形嗅覺(jué)儀主臂管口引入試蟲(chóng)，試蟲(chóng)在Y形管分叉處做出選擇，趨向不同的側(cè)臂。每頭蟲(chóng)爬過(guò)側(cè)臂1/3且停留1 min以上記為對(duì)該揮發(fā)性氣味物質(zhì)有選擇，反之記為對(duì)該氣味無(wú)選擇。10頭蟲(chóng)為一組，試驗(yàn)重復(fù)3次，每測(cè)15頭調(diào)換Y形管兩臂的位置，每次重復(fù)后更換濾紙條，以消除管臂位置和揮發(fā)物質(zhì)殘留對(duì)試蟲(chóng)行為可能產(chǎn)生的影響。

1.6數(shù)據(jù)分析

利用SPSS Statistics 25.0以單因素方差分析長(zhǎng)林小蠹的EAG 反應(yīng)相對(duì)值，利用鄧肯檢驗(yàn)（Duncan's test）檢驗(yàn)其差異顯著性。同時(shí)，使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，來(lái)檢驗(yàn)雌雄樣本間的差異性。對(duì)Y形嗅覺(jué)儀測(cè)出的結(jié)果處理后進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。

2結(jié)果與分析

2.1不同受害等級(jí)黑松揮發(fā)物成分及相對(duì)含量比較

通過(guò)GC-MS分析，黑松的樹(shù)干和樹(shù)根中共檢測(cè)出25種揮發(fā)性化合物，均為萜烯類化合物，主要由單萜和倍半萜2類組成。樹(shù)干揮發(fā)物中有12種單萜，8種倍半萜，見(jiàn)表3；樹(shù)根揮發(fā)物中有11種單萜，8種倍半萜，見(jiàn)表4。單萜主要為（1R）-（+）-α-蒎烯、（-）-β-蒎烯、莰烯和β-月桂烯等組分，倍半萜主要為長(zhǎng)葉烯、（+）-長(zhǎng)葉環(huán)烯、（+）-α-長(zhǎng)葉蒎烯和（+）-環(huán)苜蓿烯等組分。

由表3和表4可知，黑松由健康到枯死整個(gè)衰敗過(guò)程中，其樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物的成分以及相對(duì)含量均發(fā)生了一定的變化，其中（1R）-（+）-α-蒎烯為黑松樹(shù)干和樹(shù)根的主要揮發(fā)物，在健康木中其相對(duì)含量均超過(guò)80%，隨著受害程度的加重，（1R）-（+）-α-蒎烯仍為樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物的主要成分，且其相對(duì)含量在各危害等級(jí)間的樹(shù)干和樹(shù)根中無(wú)顯著差異（P>0.05）；（-）-β-蒎烯為所測(cè)黑松樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物的另一主要成分，其相對(duì)含量較（1R）-（+）-α-蒎烯少，（-）-β-蒎烯在樹(shù)干揮發(fā)物中，從健康木到衰弱木階段相對(duì)含量增加，并在衰弱木中的相對(duì)含量達(dá)到最高為29.55%±15.96%，而衰弱木直至枯死木階段其相對(duì)含量逐漸減少，但無(wú)顯著差異（P>0.05）；（-）-β-蒎烯在樹(shù)根揮發(fā)物中同樣呈現(xiàn)出健康木到衰弱木階段其相對(duì)含量增加，同樣在衰弱木中相對(duì)含量達(dá)到最高為11.18%±4.30%，由衰弱木到瀕死木階段相對(duì)含量小幅減少，在枯死木階段其相對(duì)含量少量上升；在樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物中均存在莰烯，其相對(duì)含量隨危害等級(jí)的加重，相對(duì)含量也逐漸增加，并在枯死木中達(dá)到最大值，其相對(duì)含量在樹(shù)干中可以從3.00%±0.20%升至11.98%±8.44%，樹(shù)根中可以從2.25%±0.06%升至5.51%±1.22%；長(zhǎng)葉烯在樹(shù)干中的相對(duì)含量由健康木到萎蔫木階段呈現(xiàn)小幅增加的趨勢(shì)，由萎蔫木到枯死木階段相對(duì)含量下降，樹(shù)根揮發(fā)物中的長(zhǎng)葉烯相對(duì)含量在健康木到衰弱木階段小幅下降，由衰弱木到萎蔫木階段其相對(duì)含量上升，由萎蔫木到瀕死木階段其相對(duì)含量下降，在枯死木階段完全消失。長(zhǎng)葉烯相對(duì)含量在樹(shù)干和樹(shù)根中均在萎蔫木中達(dá)到峰值，分別為7.52%±1.97%和7.00%±4.00%；其他揮發(fā)物的相對(duì)含量均較小，在樹(shù)干揮發(fā)物中，（1S）-（-）-α-蒎烯、松油烯、異長(zhǎng)葉烯、（-）-反式石竹烯和（-）-α-蒎烯均在瀕死木和枯死木中消失，別羅勒烯、4-蒈烯、（-）-α-蒎烯均為受害后產(chǎn)生并最終消失，在樹(shù)根揮發(fā)物中松油烯、（+）-α-長(zhǎng)葉蒎烯、（+）-苜蓿烯和長(zhǎng)葉烯均在枯死木中消失，（+）-3-蒈烯和香樹(shù)烯為受害后產(chǎn)生并最終消失，（-）-α-古蕓烯、葑烯和佛術(shù)烯只在枯死木中存在。

2.2長(zhǎng)林小蠹對(duì)10種不同質(zhì)量濃度植物揮發(fā)物的EAG反應(yīng)

本研究選用10種不同質(zhì)量濃度的揮發(fā)性化合物進(jìn)行EAG反應(yīng)測(cè)定。其中（1R）-（+）-α-蒎烯、（-）-β-蒎烯、莰烯是黑松的主要揮發(fā)物，另有研究表明松樹(shù)在受害后出現(xiàn)了β-月桂烯和3-蒈烯，且黑松受害后α-松油烯、羅勒烯的含量上升[35]，所以也將這些揮發(fā)物作為供試物質(zhì)；除此之外還挑選了針葉樹(shù)中對(duì)多種小蠹蟲(chóng)均有活性的檜烯、α-蒎烯以及（1S）-（-）-α-蒎烯進(jìn)行試驗(yàn)[36]。長(zhǎng)林小蠹雌雄成蟲(chóng)對(duì)所選的揮發(fā)物均產(chǎn)生一定程度的EAG反應(yīng)值，見(jiàn)表5。長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)10 mg/mL的羅勒烯、1 mg/mL的（-）-β-蒎烯、0.01 mg/mL的β-月桂烯、0.01 mg/mL的α-蒎烯、0.01 mg/mL莰烯、0.01 mg/mL 3-蒈烯、0.1 mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯反應(yīng)值較高，其反應(yīng)值分別為（1.156±0.488）、（0.937±0.217）、（0.935±0.675）、（1.041±0.645）、（1.450±0.423）、（1.040±0.324）、（2.778±0.709）mV。長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的羅勒烯、0.01 mg/mL的（-）-β-蒎烯、10? mg/mL的檜烯的反應(yīng)值均較高，其反應(yīng)值分別為（1.921±0.458）、（0.879±0.227）、（0.752±0.437）mV。而雄蟲(chóng)對(duì)各質(zhì)量濃度的β-月桂烯、α-松油烯、α-蒎烯和莰烯的反應(yīng)值均較低。

長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)10 mg/mL的羅勒烯與0.01 mg/mL和1 mg/mL的羅勒烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（1.156±0.488）mV；雄蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的羅勒烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（1.921±0.458） mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)1 mg/mL的（-）-β-蒎烯與0.01、10、100 mg/mL的（-）-β-蒎烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.937±0.217）mV；雄蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的（-）-β-蒎烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.879±0.227）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)β-月桂烯的EAG反應(yīng)值隨質(zhì)量濃度的降低而升高，并在0.01 mg/mL達(dá)到最大值，其反應(yīng)值為（0.935±0.675）mV；雄蟲(chóng)對(duì)1 mg/mL和10 mg/mL的β-月桂烯與0.01、0.1、100 mg/mL的β-月桂烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.329±0.070）mV和（0.317±0.067）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)1 mg/mL的α-松油烯與0.01 mg/mL和100 mg/mL的α-松油烯相比有顯著差異（P＜0.05），其反應(yīng)值為（0.513±0.092）mV，雄蟲(chóng)對(duì)100 mg/mL的α-松油烯與0.1、1、 10 mg/mL的α-松油烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.289±0.074）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的α-蒎烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（1.041±0.645）mV，雄蟲(chóng)對(duì)10 mg/mL的α-蒎烯與0.01? mg/mL和100 mg/mL的α-蒎烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.407±0.255）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的檜烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.602±0.230）mV；雄蟲(chóng)對(duì)10 mg/mL的檜烯與0.01 mg/mL和100 mg/mL的檜烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.752±0.437）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的莰烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（1.450±0.423）mV；雄蟲(chóng)對(duì)10 mg/mL的莰烯與0.01 mg/mL和1 mg/mL的莰烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.540±0.139）mV；長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的3-蒈烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（1.040±0.324）mV；雄蟲(chóng)對(duì)0.1 mg/mL的3-蒈烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.610±0.227）mV。長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)0.1 mg/mL的（1S）-（-）- α-蒎烯較其他4個(gè)質(zhì)量濃度相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（2.778±0.709）mV，雄蟲(chóng)對(duì)100 mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯與1 mg/mL的（1S）-（-）-α-蒎烯相比有顯著差異（P<0.05），其反應(yīng)值為（0.218±0.044）mV。長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)對(duì)（1R）-（+）-α-蒎烯所選的5個(gè)質(zhì)量濃度的電生理反應(yīng)值之間均無(wú)差異（P>0.05）。

獨(dú)立t檢驗(yàn)結(jié)果表明，長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)對(duì)0.01 mg/mL的羅勒烯，1 mg/mL的（-）-β-蒎烯、α-松油烯、α-蒎烯、（1S）-（-）-α-蒎烯、檜烯以及0.1 mg/mL的檜烯和10 mg/mL的莰烯有極顯著的EAG性別差異（P<0.01）。對(duì)0.01 mg/mL的（-）-β-蒎烯、檜烯、莰烯、3-蒈烯，0.1 mg/mL的α-松油烯、3-蒈烯、（1S）-（-）-α-蒎烯，1 mg/mL的β-月桂烯、3-蒈烯和10 mg/mL的羅勒烯、β-月桂烯、α-松油烯以及100 mg/mL的莰烯有顯著的EAG性別差異（P<0.05）。除此之外，長(zhǎng)林小蠹成蟲(chóng)對(duì)同一化合物在某一特定質(zhì)量濃度下的EAG反應(yīng)不存在性別差異性。

2.3長(zhǎng)林小蠹對(duì)10種不同質(zhì)量濃度植物揮發(fā)物的行為反應(yīng)

本研究采用5種質(zhì)量濃度的10種單體化合物進(jìn)行Y形嗅覺(jué)儀的生物測(cè)定。由圖2可知，100 mg/mL （1R）-（+）-α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)表現(xiàn)極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率為86.7%；0.1、10、100 mg/mL（1R）-（+）-α-蒎烯對(duì)雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著引誘作用（P<0.01），引誘率分別為76.7%、73.3%、83.3%；10 mg/mL（P<0.05）（1S）-（-）-α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)均表現(xiàn)出顯著的引誘作用，引誘率均為80.0%；100 mg/mL（P<0.01）（1S）-（-）-α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用，引誘率分別為83.3%和86.7%；1 mg/mL的羅勒烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)均表現(xiàn)出極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率為76.7%；0.01 mg/mL羅勒烯對(duì)雄蟲(chóng)均表現(xiàn)出極顯著引誘作用（P<0.01），引誘率為86.7%；0.01 mg/mL和10 mg/mL的3-蒈烯對(duì)雌蟲(chóng)均表現(xiàn)出顯著引誘作用（P<0.05），引誘率分別為80.0%、70.0%；0.1 mg/mL的3-蒈烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)表現(xiàn)出顯著的引誘作用（P<0.05），引誘率為70.0%；100 mg/mL β-月桂烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率為90.0%；1 mg/mL和10 mg/mL的β-月桂烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率分別為76.7%、80.0%；1 mg/mL（P<0.01）莰烯對(duì)雌蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著引誘作用，引誘率為73.3%；100 mg/mL的莰烯對(duì)雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著引誘作用（P<0.01），引誘率為83.3%；100 mg/mL的α-松油烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)表現(xiàn)出顯著的引誘作用（P<0.05），引誘率為86.7%；0.1 mg/mL（P<0.05）和100 mg/mL（P<0.01）α-松油烯對(duì)雄蟲(chóng)表現(xiàn)出顯著或極顯著引誘作用，引誘率分別為60.0%、73.3%； 0.1 mg/mL的（-）-β-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著引誘作用（P<0.01），引誘率為76.7%；10 mg/mL的（-）-β-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)表現(xiàn)出顯著驅(qū)避作用（P<0.05），驅(qū)避率為66.7%；0.1 mg/mL的（-）-β-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)表現(xiàn)出顯著的引誘作用（P<0.05），引誘率為70.0%；0.1 mg/mL和10 mg/mL的檜烯對(duì)雌蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率分別為76.7%和83.3%；0.01、0.1、1、100 mg/mL的檜烯均對(duì)長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率分別為83.3%、76.7%、86.7%、80.0%；10 mg/mL的α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌成蟲(chóng)具有顯著的引誘作用（P<0.05），0.01、0.1、1、100 mg/mL的α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌成蟲(chóng)均具有極顯著的引誘作用（P<0.01），引誘率分別為77.30%、83.30%、96.70%、93.30%；0.01 mg/mL（P<0.01）、100 mg/mL（P<0.01）的α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雄蟲(chóng)表現(xiàn)出極顯著的引誘作用，引誘率分別為73.3%、90.0%。

3討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，黑松揮發(fā)物主要由單萜和倍半萜構(gòu)成。所測(cè)黑松樹(shù)干的主要揮發(fā)物為（1R）-（+）-α-蒎烯、莰烯、（-）-β-蒎烯、β-月桂烯、3-蒈烯和長(zhǎng)葉烯，部分學(xué)者對(duì)黑松樹(shù)干、枝條、松針?lè)謩e做過(guò)研究報(bào)道，（1R）-（+）-α-蒎烯、莰烯、（-）-β-蒎烯、β-月桂烯均為主要揮發(fā)性成分[15-16，37]，但是主成分的相對(duì)含量以及相對(duì)含量低的物質(zhì)成分上存在明顯差異。本研究樹(shù)干揮發(fā)物只測(cè)出20種萜烯類化合物，而王海濤[15]所測(cè)的黑松松針揮發(fā)物共檢測(cè)出95種化合物，大部分是萜烯類化合物，同時(shí)還檢測(cè)出5種醇類、5種酯類以及1種酸類和2種醚類；郝德君等[16]利用水蒸氣蒸餾裝置從黑松健康木中鑒定出了27種組分，單萜主要為α-蒎烯、β-蒎烯、莰烯、β-水芹烯和α-異松油烯等組分，倍半萜主要為異長(zhǎng)葉烯、紫穗槐烯和反式-石竹烯等組分，研究結(jié)果不一致可能是取樣部位、采樣時(shí)間、提取方式、色譜條件以及種源和植物所處環(huán)境等多方面因素所造成的。伍蘇然等[38]研究發(fā)現(xiàn)，云南松在衰弱狀態(tài)下的α-蒎烯相對(duì)含量顯著低于其健康狀態(tài)下的含量；而本試驗(yàn)測(cè)出被長(zhǎng)林小蠹危害后的黑松樹(shù)干中的（1R）-（+）-α-蒎烯相對(duì)含量在萎蔫木階段比健康木階段含量低，這證明了（1R）-（+）- α-蒎烯的相對(duì)含量與隨著受害程度加深而降低。而（1R）-（+）-α-蒎烯在萎蔫木到枯死木階段其相對(duì)含量上升，這或許是由于黑松被長(zhǎng)林小蠹危害后產(chǎn)生的抗性生理反應(yīng)所造成的。在本研究中，黑松樹(shù)干內(nèi)的（-）-β-蒎烯在健康木轉(zhuǎn)向衰弱木階段其相對(duì)含量大幅增加，這是由于 β-蒎烯作為植物體防御機(jī)制有關(guān)的有機(jī)物成分[35，39]，在黑松受到長(zhǎng)林小蠹危害時(shí)，自身會(huì)釋放出更多的（-）-β-蒎烯對(duì)其進(jìn)行防御；而衰弱木轉(zhuǎn)向枯死木階段其 （-）-β-蒎烯的相對(duì)含量逐漸降低，這可能是由于小蠹危害導(dǎo)致樹(shù)干韌皮部和木質(zhì)部輸導(dǎo)組織被切斷，影響樹(shù)體生長(zhǎng)，進(jìn)而導(dǎo)致釋放的化合物相對(duì)含量也降低。伍蘇然等[40]研究發(fā)現(xiàn)云南松由健康轉(zhuǎn)向衰弱過(guò)程中其莰烯的含量相對(duì)增加；而本研究中樹(shù)干內(nèi)的莰烯在健康木轉(zhuǎn)向枯死木的階段中其相對(duì)含量也逐步增加，推測(cè)莰烯可能是影響長(zhǎng)林小蠹取食和產(chǎn)卵的關(guān)鍵性物質(zhì)。本研究發(fā)現(xiàn)， （-）-α-蒎烯只存在于萎蔫木階段，而（1S）-（-）-α-蒎烯、松油烯、異長(zhǎng)葉烯和（-）-反式石竹烯均未出現(xiàn)在瀕死木和枯死木階段，雖然這些物質(zhì)的含量很低但也不能被忽略，或許正是微量成分的比例變化為長(zhǎng)林小蠹的寄主選擇、取食、產(chǎn)卵提供了化學(xué)信息。而黑松樹(shù)根的主要揮發(fā)物略不同于樹(shù)干，但其健康木轉(zhuǎn)向枯死木的過(guò)程中物質(zhì)的變化也是存在一定差異的。樹(shù)根的主要成分為（1R）-（+）-α-蒎烯、莰烯、（-）-β-蒎烯、松油烯和長(zhǎng)葉烯。黑松樹(shù)根由健康木階段轉(zhuǎn)向?yàn)l死木時(shí) （1R）-（+）-α-蒎烯的相對(duì)含量逐漸減少，在枯死木階段其相對(duì)含量有所上升；而（-）-β-蒎烯的相對(duì)含量在健康木轉(zhuǎn)向衰弱木的過(guò)程中上升，由衰弱木轉(zhuǎn)向萎蔫木的過(guò)程中相對(duì)含量下降，而在萎蔫木轉(zhuǎn)向枯死木的過(guò)程中相對(duì)含量逐步上升；松油烯、（+）-α-長(zhǎng)葉蒎烯、（+）-苜蓿烯和長(zhǎng)葉烯均在枯死木樹(shù)根中消失。樹(shù)干、樹(shù)根揮發(fā)物的成分和相對(duì)含量的變化不同可能是由于二者所處的環(huán)境條件、采樣條件造成的。小蠹類害蟲(chóng)常常有聚集危害的特點(diǎn)，在侵入成功以后，刺激寄主植物或者自身利用寄主植物化合物產(chǎn)生釋放出大量聚集的化學(xué)信號(hào)，促使更多同類入侵[41]。而研究發(fā)現(xiàn)，黑松樹(shù)干和樹(shù)根均在萎蔫木中萜類化合物的種類最多，故推測(cè)由于長(zhǎng)林小蠹的入侵造成健康木到萎蔫木階段的黑松釋放出聚集信息化合物，吸引了更多的長(zhǎng)林小蠹危害，隨著寄主受害程度的加重，瀕死木和枯死木階段黑松樹(shù)勢(shì)衰弱，所釋放的揮發(fā)物種類和含量降低。

王茹琳等[41]研究發(fā)現(xiàn)，華山大小蠹雌蟲(chóng)觸角對(duì)低劑量的寄主揮發(fā)物的EAG反應(yīng)值顯著高于雄蟲(chóng)，閆爭(zhēng)亮等[42]對(duì)紅脂大小蠹的研究也表明雌蟲(chóng)對(duì)α-蒎烯、3-蒈烯的EAG靈敏度要高于雄蟲(chóng)。而本研究通過(guò)EAG和Y形嗅覺(jué)儀的結(jié)果表明，長(zhǎng)林小蠹成蟲(chóng)對(duì)不同質(zhì)量濃度的（1R）-（+）-α-蒎烯、（1S）-（-）-α-蒎烯、檜烯、（-）-β-蒎烯、α-松油烯、莰烯、β-月桂烯、3-蒈烯、羅勒烯、α-蒎烯均表現(xiàn)出不同程度的電生理反應(yīng)和行為反應(yīng)。所選揮發(fā)物的質(zhì)量濃度對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)觸角的EAG反應(yīng)具有直接的影響。在刺激劑量為0.01 mg/mL時(shí)，長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)對(duì)β-月桂烯、α-蒎烯、檜烯、莰烯、3-蒈烯均有顯著的觸角電位反應(yīng)，且引起的觸角電位反應(yīng)相對(duì)值要明顯高于雄蟲(chóng)，證明了長(zhǎng)林小蠹在較低劑量氣味刺激下，雌蟲(chóng)觸角比雄蟲(chóng)觸角更為敏感，這可能是由于不同性別的昆蟲(chóng)個(gè)體在尋找寄主、繁殖后代等行為中所起的作用并不相同。

行為反應(yīng)測(cè)定結(jié)果表明，α-蒎烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)均有較強(qiáng)的引誘作用，檜烯、羅勒烯、（1S）-（-）-α-蒎烯均對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)有較強(qiáng)的引誘作用；3-蒈烯、（1R）-（+）-α-蒎烯對(duì)雄蟲(chóng)有引誘作用；低質(zhì)量濃度的β-月桂烯對(duì)長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)有驅(qū)避作用，而高質(zhì)量濃度β-月桂烯對(duì)雌蟲(chóng)有顯著的吸引作用。這可能是由于寄主揮發(fā)性物質(zhì)的質(zhì)量濃度對(duì)昆蟲(chóng)的行為有一定影響，只有活性成分質(zhì)量濃度恰當(dāng)時(shí)才能表現(xiàn)出引誘效果，質(zhì)量濃度過(guò)高、過(guò)低可能起到驅(qū)避或迷向的作用[41]，由于林間釋放效率尚未可知，所以這些物質(zhì)對(duì)長(zhǎng)林小蠹在林間的引誘效果可能不穩(wěn)定，有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

長(zhǎng)林小蠹在Y形型嗅覺(jué)儀中的行為反應(yīng)與EAG反應(yīng)的趨勢(shì)并非全部一一相對(duì)應(yīng)，如雄蟲(chóng)觸角對(duì)0.01 mg/mL的α-蒎烯引起的EAG反應(yīng)與其他所選的4個(gè)質(zhì)量濃度沒(méi)有顯著性差異，而0.01 mg/mL的α-蒎烯對(duì)雄蟲(chóng)的引誘率差異顯著；雌蟲(chóng)觸角對(duì)10 mg/mL檜烯引起的EAG反應(yīng)與其他所選的4個(gè)質(zhì)量濃度沒(méi)有顯著性差異，而10 mg/mL檜烯對(duì)雄蟲(chóng)的引誘率其他所選的4個(gè)質(zhì)量濃度相比有極顯著差異。這可能與嗅覺(jué)感受器的生理結(jié)構(gòu)和其對(duì)氣味的敏感性和選擇性有關(guān)，因此長(zhǎng)林小蠹雌雄蟲(chóng)對(duì)寄主揮發(fā)物行為感受機(jī)制中存在一定的差異還需要進(jìn)一步進(jìn)行研究?？傮w而言，雌蟲(chóng)的正趨向率要明顯高于雄蟲(chóng)，這說(shuō)明長(zhǎng)林小蠹雌蟲(chóng)在尋找寄主過(guò)程中起著極其重要的作用，雌蟲(chóng)先利用寄主揮發(fā)物搜尋及入侵寄主，而后誘集雄蟲(chóng)進(jìn)入進(jìn)行危害[2]，這也可能是造成雌蟲(chóng)的正趨向率高于雄蟲(chóng)的主要原因。

4結(jié)論

本研究測(cè)定了不同健康水平下的黑松樹(shù)干和樹(shù)根揮發(fā)物的組成及差異。在此基礎(chǔ)上研究了10種植物揮發(fā)性化合物對(duì)長(zhǎng)林小蠹的電生理和行為反應(yīng)，其中包括多種松屬植物廣泛存在的（1S）-（-）-α-蒎烯、（1R）-（+）-α-蒎烯以及3-蒈烯等物質(zhì)和多種由寄主樹(shù)勢(shì)衰弱引發(fā)波動(dòng)的揮發(fā)物組分，也包括前人研究的對(duì)多種小蠹亞科昆蟲(chóng)有吸引作用的物質(zhì)。發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)林小蠹對(duì)特定質(zhì)量濃度的一些揮發(fā)物會(huì)產(chǎn)生EAG反應(yīng)和趨性。由此可見(jiàn)長(zhǎng)林小蠹對(duì)各種松屬樹(shù)木均有較大的危害風(fēng)險(xiǎn)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]李承錦，趙文霞，淮穩(wěn)霞，等.我國(guó)新入侵害蟲(chóng)長(zhǎng)林小蠹研究進(jìn)展[J].環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2023，45（4）：850-861.

LI C J， ZHAO W X， HUAI W X， et al. Research progress on Hylurgus ligniperda Fabricius （Coleoptera： Curculionidae）， a new invasive species in China[J]. Journal of Environmental Entomology， 2023， 45（4）： 850-861.

[2]任利利，陶靜，武海衛(wèi)，等.重大害蟲(chóng)長(zhǎng)林小蠹入侵我國(guó)的首次發(fā)現(xiàn)與侵染特征[J].林業(yè)科學(xué)，2021，57（5）：140-150.

REN L L， TAO J， WU H W， et al. The first discovery and infective characteristics of A major invasive pest Hylurgus ligniperda （Coleoptera： Scolytidae） in China[J]. Scientia Silvae Sinicae， 2021， 57（5）： 140-150.

[3]Hoebeke E R.Hylurgus ligniperda： A new exotic pine bark beetle in the United States[J]. Newsletter of the Michigan Entomological Society， 2001， 46： 1-2.

[4]WANG H， ZHOU W L， LI Z， et al. Plant volatiles mediate evolutionary interactions between plants and tephritid flies and are evolutionarily more labile than non-volatile defenses[J]. The Journal of Animal Ecology， 2021， 90（4）： 846-858.

[5]SHIMODA T， NISHIHARA M， OZAWA R， et al. The effect of genetically enriched （E）-β-ocimene and the role of floral scent in the attraction of the predatory mite Phytoseiulus persimilis to spider mite-induced volatile blends of torenia[J]. The New Phytologist， 2012， 193（4）： 1009-1021.

[6]BYERS J A. Attraction of bark beetles，Tomicus piniperda， Hylurgops palliatus， and Trypodendron domesticum and other insects to short-chain alcohols and monoterpenes[J]. Journal of Chemical Ecology， 1992， 18（12）： 2385-2402.

[7]GREGOIRE J C， BAISIER M， DRUMONT A， et al. Volatile compounds in the larval frass of Dendroctonus valens and Dendroctonus micans （Coleoptera： Scolytidae） in relation to oviposition by the predator， Rhizophagus grandis （Coleoptera： Rhizophagidae）[J]. Journal of Chemical Ecology， 1991， 17（10）： 2003-2019.

[8]SCHROEDER L M， LINDELOW A. Attraction of scolytids and associated beetles by different absolute amounts and proportions of α-pinene and ethanol[J]. Journal of Chemical Ecology， 1989， 15（3）： 807-817.

[9]SCHROEDER L M. Attraction of the bark beetle Tomicus piniperda to Scots pine trees in relation to tree vigor and attack density[J]. Entomologia Experimentalis et Applicata， 1987， 44（1）： 53-58.

[10]肖春.楓楊枝把引誘棉鈴蟲(chóng)Helicoverpa armigera的機(jī)理[D].上海：中國(guó)科學(xué)院上海昆蟲(chóng)研究所，1999.

XIAO C. The mechanism of attracting Helicoverpa armigera with maple and poplar branches[D]. Shanghai： Shanghai Institute of Entomology， Chinese Academy of Sciences， 1999.

[11]寧眺，樊建庭，方宇凌，等.不同危害狀態(tài)下寄主萜烯揮發(fā)物含量的變化及松墨天牛對(duì)其組分的觸角電位反應(yīng)[J].昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2006，49（2）：179-188.

NING T， FAN J T， FANG Y L， et al. Changes in contents of host volatile terpenes under different damaged states and electroantennogram response of Monochamus alternatus Hope to these volatiles[J]. Acta Entomologica Sinica， 2006， 49（2）： 179-188.

[12]樊慧，金幼菊，李繼泉，等.引誘植食性昆蟲(chóng)的植物揮發(fā)性信息化合物的研究進(jìn)展[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，26（3）：76-81.

FAN H， JIN Y J， LI J Q， et al. Advances on plant volatile semiochemicals attracting herbivorous insects[J]. Journal of Beijing Forestry University， 2004， 26（3）： 76-81.

[13]趙濤，李麗莎，周楠.云南松對(duì)松小蠹的引誘能力及其揮發(fā)物組成[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，30（4）：47-49.

ZHAO T， LI L S， ZHOU N. The attraction of Yunnan pine to pine shoot beetle and tree volatile compositions[J]. Journal of Northeast Forestry University， 2002， 30（4）： 47-49.

[14]MILLAR J G， ZHAO C H， LANIER G N， et al. Components of moribund American elm trees as attractants to elm bark beetles，Hylurgopinus rufipes and Scolytus multistriatus[J]. Journal of Chemical Ecology， 1986， 12（3）： 583-608.

[15]王海濤.松褐天牛對(duì)黑松的危害及部分防御性物質(zhì)的影響[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

WANG H T. Effect of Monlchamus alternatus （Hope） harm on Pinus thunbergii and part of secondary metabolites[D]. Taian： Shandong Agricultural University， 2016.

[16]郝德君，馬鳳林，王焱，等.松墨天牛對(duì)不同生理狀態(tài)黑松揮發(fā)物的觸角電生理和行為反應(yīng)[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2006，17（6）：1070-1074.

HAO D J， MA F L， WANG Y， et al. Electroantennogram and behavioral responses of Monochamus alternatus to the volatiles from Pinus thunbergii with different physiological status[J]. Chinese Journal of Applied Ecology， 2006， 17（6）： 1070-1074.

[17]嚴(yán)廣，張夢(mèng)蝶，錢路兵，等.云南切梢小蠹對(duì)初侵害云南松揮發(fā)物的電生理和行為反應(yīng)[J].環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2021，43（6）：1389-1397.

YAN G， ZHANG M D， QIAN L B， et al. Electrophysiological and behavioral responses of Tomicus yunnanensis to plant volatiles from primarily infected Pinus yunnanensis in Yunnan， Southwest China[J]. Journal of Environmental Entomology， 2021， 43（6）： 1389-1397.

[18]王茹琳，楊偉，楊佐忠，等.華山松大小蠹對(duì)9種植物揮發(fā)物的EAG和行為反應(yīng)[J].中國(guó)森林病蟲(chóng)，2011，30（1）：23-26.

WANG R L， YANG W， YANG Z Z， et al. Electroantennographic and behavioral responses of Dendroctonus armandi （Tsai et Li） to 9 plant volatiles[J]. Forest Pest and Disease， 2011， 30（1）： 23-26.

[19]徐凡丁，周祥，宋燦燦.橡膠樹(shù)揮發(fā)性成分對(duì)橡膠材小蠹的行為影響[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2020，39（9）：4145-4153.

XU F D， ZHOU X， SONG C C. Effects of volatile components in rubber tree on behavior of Xyleborus affinis[J]. Genomics and Applied Biology， 2020， 39（9）： 4145-4153.

[20]梁傳和，孫繼平，徐海峰，等.應(yīng)用聚集信息素監(jiān)測(cè)與防治縱坑切梢小蠹效果初報(bào)[J].吉林林業(yè)科技，2012，41（2）：23-25.

LIANG C H， SUN J P， XU H F， et al. Application of semiochemicals on monitoring and control of Tomicus piniperda[J]. Journal of Jilin Forestry Science and Technology， 2012， 41（2）： 23-25.

[21]李麗莎，劉宏屏，周楠，等.松小蠹綜合控制技術(shù)研究[J].西部林業(yè)科學(xué)，2004，33（1）：62-71.

LI L S， LIU H P， ZHOU N， et al. Studies on the integrated control techniques of Tomicus piniperda[J]. Yunnan Forestry Science and Technology， 2004， 33（1）： 62-71.

[22]張維平.華山松大小蠹寄主選擇機(jī)制的初步研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2015.

ZHANG W P. Preliminarystudies on the host selection mechanism of Dendroctonus Armandi （Coleoptera： Scolytidae）[D]. Yangling： Northwest A & F University， 2015.

[23]陳敏，李永和，王曉佳.華山松樹(shù)皮揮發(fā)性誘蟲(chóng)活性物質(zhì)成分分析[J].林業(yè)科學(xué)研究，2007，20（3）：428-432.

CHEN M， LI Y H， WANG X J. Analysis of volatile constituents in Pinus armandii bark with GC/MS[J]. Forest Research， 2007， 20（3）： 428-432.

[24]李為爭(zhēng)，胡晶晶，陳漢杰，等.揮發(fā)性植物源害蟲(chóng)引誘劑篩選與混配方法的新視角[J].應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2015，52（5）：1094-1106.

LI W Z， HU J J， CHEN H J， et al. A new perspective on the screening and blending of volatile pest attractants derived from plants[J]. Chinese Journal of Applied Entomology， 2015， 52（5）： 1094-1106.

[25]苗振旺，趙明梅，王立忠，等.強(qiáng)大小蠹植物源引誘劑林間應(yīng)用技術(shù)[J].昆蟲(chóng)知識(shí)，2003，40（4）：346-350.

MIAO Z W， ZHAO M M， WANG L Z， et al. Application of semiochemicals in monitoring and controlling the red turpentine beetle，Dendroctormus Valens[J]. Entomological Knowledge， 2003， 40（4）： 346-350.

[26]李菁，駱有慶，石娟，等.利用植物源引誘劑監(jiān)測(cè)與控制舞毒蛾[J].北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，33（4）：85-90.

LI J， LUO Y Q， SHI J， et al. Use of phyto-attractant in monitoring and controlling Gypsy moth[J]. Journal of Beijing Forestry University， 2011， 33（4）： 85-90.

[27]SOPKOTA S. Acoustic communication and behaviour of the golden haired pine bark beetle， Hylurgus ligniperda （Coleoptera： Curculionidae）[D]. New Zealand， Palmerston North： Massey University， 2017.

[28]張海林，肖廣會(huì)，喬潤(rùn)喜.落葉松小蠹蟲(chóng)測(cè)報(bào)及防治對(duì)策[J].科技信息（科學(xué)教研），2008（24）：324，190.

ZHANG H L， XIAO G H， QIAO R X. Forecast and control countermeasures of larch bark beetles[J]. Science & Technology Information， 2008（24）： 324， 190.

[29]高寶嘉，信金娜，關(guān)慧元，等.紅脂大小蠹的發(fā)生和危害規(guī)律[J].動(dòng)物學(xué)雜志，2003，38（5）：71-73.

GAO B J， XIN J N， GUAN H Y， et al. The generation and damage regulation of red turpentine beetle[J]. Chinese Journal of Zoology， 2003， 38（5）： 71-73.

[30]李菊彩，宋升治，金智偉，等.昆明市西山林場(chǎng)云南松縱坑切梢小蠹危害調(diào)查及綜合防治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2019（13）：103-104，106.

LI J C， SONG S Z， JIN Z W， et al. Harm investigation and comprehensive prevention of Tomicus piniperda in Pinus yunnanensis of Xishan forest farm in Kunming city[J]. Modern Agricultural Science and Technology， 2019（13）： 103-104， 106.

[31]張威，李巧，趙祎，等.昆明翠湖公園三角楓材小蠹危害調(diào)查及防治對(duì)策[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)），2012，27（2）：294-298.

ZHANG W， LI Q， ZHAO Y， et al. Investigation of Xyleborus sp. attacking on Acer buergerianum and strategy of control on the beetle in Cuihu Park， Kunming[J]. Journal of Yunnan Agricultural University （Natural Science）， 2012， 27（2）： 294-298.

[32]張紅玉，張吉乾，陶倫艷，等.縱坑切梢小蠹對(duì)健康馬尾松人工林的侵害特點(diǎn)[J].貴州科學(xué)，2012，30（6）：6-11.

ZHANG H Y， ZHANG J Q， TAO L Y， et al. Damage characteristics of Tomicus piniperda in healthy man-made forest of Pinus massoniana[J]. Guizhou Science， 2012， 30（6）： 6-11.

[33]阿紅昌，黃雅志，楊雄飛.西雙版納橡膠小蠹蟲(chóng)優(yōu)勢(shì)種類和為害規(guī)律調(diào)查[J].云南熱作科技，2002，25（3）：9-11.

A H C， HUANG Y Z， YANG X F. Dominant species of rubber borer and it's working rule in Xishuangbanna[J]. Journal of Yunnan Tropical Crops Science & Technology， 2002， 25（3）： 9-11.

[34]解丹，宋效惠，王海峰，等.不同種源紅松主干揮發(fā)物對(duì)赤松梢斑螟危害的影響[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，49（5）：115-119.

XIE D， SONG X H， WANG H F， et al. Effects of volatiles from the tunk of Pinus koraiensis of different provenances on the damage of Dioryctria sylvestrella[J]. Journal of Northeast Forestry University， 2021， 49（5）： 115-119.

[35]呂迪，王得祥，謝小洋，等.油松釋放萜烯類揮發(fā)性成分研究[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，31（1）：231-237.

LYU D， WANG D X， XIE X Y， et al. Terpene volatile components released from Pinus tabulaeformis[J]. Journal of Northwest Forestry University， 2016， 31（1）： 231-237.

[36]陳輝，李宗波.植物揮發(fā)性化合物在小蠹蟲(chóng)寄主選擇中的作用[J].福建林學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，26（1）：87-91.

CHEN H， LI Z B. The regulation role of plant volatiles in host selection of bark beetles （Coleoptera： Scolytidae）[J]. Journal of Fujian College of Forestry， 2006， 26（1）： 87-91.

[37]高慈元.松樹(shù)蜂和新渡戶樹(shù)蜂相關(guān)信息化學(xué)物質(zhì)及林間誘捕技術(shù)研究[D].北京：北京林業(yè)大學(xué)，2020.

GAO C Y. Study on theassociated semiochemicals and trapping techniquesin forest of Sirex noctilio Fabricius and S Nitobei[D]. Beijing： Beijing Forestry University， 2020.

[38]伍蘇然，周平陽(yáng)，李正躍，等.云南松健康松與衰弱松針葉揮發(fā)物化學(xué)成分比較[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2010，22（6）：1048-1052.

WU S R， ZHOU P Y， LI Z Y， et al. Analysis the volatile constituents of pine needles from health and debility Pinus yunnanensis[J]. Natural Product Research and Development， 2010， 22（6）： 1048-1052.

[39]劉敏.影響紅脂大小蠹寄主樹(shù)種選擇行為關(guān)鍵因子的研究[D].北京：北京林業(yè)大學(xué)，2020.

LIU M. Study on key factors affecting host tree species selection behavior of Dendroctonus valens[D]. Beijing： Beijing Forestry University， 2020.

[40]伍蘇然，張淑穎，熊國(guó)如，等.不同生理狀態(tài)云南松木段揮發(fā)物化學(xué)成分比較[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，40（10）：115-119，147.

WU S R， ZHANG S Y， XIONG G R， et al. Analysis of volatile constituents in pine logs from Pinus yunnanensis under different physiological states[J]. Journal of Northeast Forestry University， 2012， 40（10）： 115-119， 147.

[41]王茹琳，楊偉，楊佐忠，等.華山松大小蠹對(duì)幾種寄主揮發(fā)物組分的EAG和行為反應(yīng)[J].生態(tài)學(xué)雜志，2011，30（4）：724-729.

WANG R L， YANG W， YANG Z Z， et al. Electroantennographic and behavioral responses of Dendroctonus armandi （Coleoptera： Ipidae）to host plant volatiles[J]. Chinese Journal of Ecology， 2011， 30（4）： 724-729.

[42]閆爭(zhēng)亮，方宇凌，孫江華，等.紅脂大小蠹后腸揮發(fā)性物質(zhì)的鑒定、觸角電位和室內(nèi)趨向?qū)嶒?yàn)[J].昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2004，47（6）：695-700.

YAN Z L， FANG Y L， SUN J H， et al. Identification and electroantennal olfactory and behavioral tests of hindgut-produced volatiles of the red turpentine beetle，Dendroctonus valens LeConte （Coleoptera： Scolytidae）[J]. Acta Entomologica Sinica， 2004， 47（6）： 695-700.