田吉鵬 程云輝 韋青 劉蓓一 顧洪如 丁成龍 王書玲

摘要 為評(píng)估菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸及花生秸混合青貯飼料發(fā)酵效果的影響，以花生秸為原料分別制作花生秸單獨(dú)青貯飼料（PA），花生秸和玉米芯混合青貯飼料（PC），花生秸和稻殼粉混合青貯飼料（PR），添加菌酶復(fù)合添加劑（包含植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、纖維素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、果膠酶），以等量蒸餾水為對(duì)照組（CK）。對(duì)不同處理青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量和營養(yǎng)品質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，PC具有最低的pH、氨態(tài)氮和ADL含量，最高的體外干物質(zhì)消化率，但是也有一定負(fù)面效果，如增加了霉菌和酵母菌數(shù)量，降低了粗蛋白含量。菌酶復(fù)合添加劑的使用顯著提升了乳酸產(chǎn)量，降低了青貯飼料中的pH和氨態(tài)氮含量，同時(shí)降低了aNDF含量，提升了體外干物質(zhì)消化率。且PC在菌酶復(fù)合添加劑處理下pH降低到4.16。因此，菌酶復(fù)合添加劑的使用對(duì)于提升花生秸青貯飼料以及花生秸混合青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和營養(yǎng)品質(zhì)效果顯著，具有顯著的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞 花生秸；菌酶復(fù)合添加劑；稻殼粉；玉米芯；青貯

中圖分類號(hào) S 816.7? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2024）12-0088-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.12.018

Compound Additives of Cellulase and Lactic Acid Bacteria on Silage Quality of Peanut Vine Mixture Silages

TIAN Ji-peng1，2，CHENG Yun-hui1，2，WEI Qing1，2 et al

（1.Institute of Animal Science，Jiangsu Academy of Agricultural Science，Nanjing，Jiangsu? 210014;2.Key Laboratory of Crop and Animal Integrated Farming，Ministry of Agriculture，Nanjing，Jiangsu 210014）

Abstract In order to evaluate the effect of microbial enzyme comppsite additives on the fermentation quality of peanut vine and peanut vine mixed silage， this experiment used peanut vine as raw material to prepare peanut vine single silage （PA）， peanut vine and corn cob mixed silage （PC）， and peanut vine and rice husk powder mixed silage （PR）. Microbial enzyme comppsite additives （including Lactobacillus plantarum， Lactobacillus paracasei， cellulase， xylanase， glucanase， pectinase）? were added， and a same volume of distilled water was used as the control group （CK）. The fermentation quality， microbial quantity and nutritional value of different silage treatments were detected. The results showed that PC had the lowest pH value， ammonia nitrogen and ADL contents， and the highest in vitro dry matter digestibility， but it also had certain negative effects such as increasing the counts of mould and yeast， and reducing crude protein content. The use of microbial enzyme comppsite additives significantly increased lactate production， reduced pH value and ammonia nitrogen content in silage， while reducing aNDF content and improving in vitro dry matter digestibility. And the pH value of PC decreased to 4.16 under the treatment of microbial enzyme comppsite additives. Therefore， the use of microbial enzyme comppsite additives has significant application value in improving the fermentation and nutritional quality of peanut vine silage and peanut vine mixed silage.

Key words Peanut vine;Complex additives;Rice husk powder;Corn cob;Silage

基金項(xiàng)目 江蘇省蘇北科技專項(xiàng)（XZ-SZ202122）；江蘇現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金項(xiàng)目［JATS（2022）440］。

作者簡(jiǎn)介 田吉鵬（1987—），男，山東煙臺(tái)人，副研究員，博士，從事牧草飼料加工與利用研究。*通信作者，研究員，博士，從事飼草加工與反芻動(dòng)物營養(yǎng)研究。

收稿日期 2023-07-31；修回日期 2023-08-28

我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)廢棄物資源量大面廣，包括大量秸稈資源及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物。秸稈資源以玉米、小麥、水稻秸稈為主，但其他秸稈如花生秸等秸稈產(chǎn)量也非常大?；ㄉ债a(chǎn)量主要集中在華中和華東地區(qū)，兩者合計(jì)超過1 200萬t，占全國總產(chǎn)量的67.6%［1］。農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物方面，稻殼和玉米芯的全國產(chǎn)量約為4 000萬t［2-3］?，F(xiàn)有秸稈和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物用于飼料的僅有20%左右。這主要是因?yàn)榻斩捄娃r(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物具有大量的半纖維素、纖維素、木質(zhì)素組分，非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量少，消化率低，適口性差，難以直接被反芻動(dòng)物利用。有效提升花生秸等秸稈以及稻殼和玉米芯等農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物飼料品質(zhì)，提升適口性和消化率對(duì)提升秸稈和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物飼料化利用具有重要意義。

青貯發(fā)酵能夠改善粗飼料適口性和提升消化率。但是秸稈和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物往往纖維含量高，非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量少，難以單獨(dú)青貯。通過將2種營養(yǎng)成分互補(bǔ)的青貯原料混合能夠獲得發(fā)酵良好的混合青貯飼料。其中最常見的是將豆科作物與禾本科作物秸稈和農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物混合后進(jìn)行青貯，一方面能夠提升混合青貯飼料蛋白含量，提升纖維消化率，改善適口性，另一方面能夠降低青貯飼料中的緩沖能值，提升可溶性糖含量，調(diào)節(jié)水分含量，促進(jìn)青貯發(fā)酵。對(duì)于花生秸來說，通過與玉米［4］、狼尾草［5］等進(jìn)行混合青貯，均取得了不錯(cuò)的發(fā)酵效果。將玉米芯、稻殼粉與乳酸菌聯(lián)用，能夠提升花生秸青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)［6］。因此，將不同秸稈及農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物進(jìn)行混合青貯發(fā)酵有助于改善部分不適合青貯的原料的發(fā)酵品質(zhì)，提升青貯飼料質(zhì)量。

秸稈與農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物由于非結(jié)構(gòu)性碳水化合物分離用于食品等其他用途，剩余物纖維含量高、消化率低。通過微生物添加劑、酶添加劑以及菌酶復(fù)合添加劑的使用降低纖維含量，增加非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量，對(duì)于提升秸稈與農(nóng)產(chǎn)品加工副產(chǎn)物消化率和青貯成功率具有重要作用。菌酶復(fù)合添加劑在青貯發(fā)酵過程中發(fā)揮重要作用。纖維素酶在青貯飼料中能夠顯著提升體外消化率［7］。Cheng等［8］研究表明，乳酸菌與纖維素酶的復(fù)合添加劑同樣能夠提升玉米秸稈與大豆混合青貯飼料的質(zhì)量。通過菌酶復(fù)合添加劑的配制和在花生秸混合青貯飼料中的應(yīng)用對(duì)于改善花生秸單獨(dú)青貯發(fā)酵品質(zhì)差，稻殼粉和玉米芯等纖維含量高、消化率低等問題具有重要意義。該研究分別制作花生秸單獨(dú)青貯飼料（PA）、花生秸和玉米芯混合青貯飼料（PC）以及花生秸和稻殼粉混合青貯飼料（PR），同時(shí)添加含有2種乳酸菌、4種纖維素分解酶類的復(fù)合添加劑，旨在改善花生秸混合青貯飼料發(fā)酵質(zhì)量，降低纖維含量，提升消化率，為花生秸混合青貯飼料的利用提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

花生秸為徐州冠達(dá)羊業(yè)有限公司提供。菌酶復(fù)合添加劑由植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）、副干酪乳桿菌（Lactobacillus paracei）、纖維素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、果膠酶復(fù)合而成。其中，復(fù)合所用植物乳桿菌和副干酪乳桿菌活菌數(shù)大于1×1011 CFU/g，果膠酶活性大于1×104 U/g，纖維素酶和木聚糖酶活性大于1×105 U/g，葡聚糖酶活性大于1×106 U/g。玉米芯和稻殼粉從當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)購得，避光常溫儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 菌酶復(fù)合添加劑配制及混合青貯制作

在試驗(yàn)開始前半天對(duì)2種乳酸菌菌種進(jìn)行活化，稱取每1 kg青貯發(fā)酵所需乳酸菌菌種（總添加量為5×105 CFU/g，植物乳桿菌和副干酪乳桿菌比例為2∶1）加入2 mL的滅菌脫脂奶粉溶液中室溫活化2 h。纖維素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、果膠酶分別以10、120、40、20 U/g的添加量按照1 kg青貯發(fā)酵所需量進(jìn)行稱重并添加進(jìn)18 mL蒸餾水中混合均勻，在青貯前將菌液和酶液混合加入噴壺，均勻噴灑在混合青貯飼料中。

花生秸鍘切為2～3 cm的小段并充分混合均勻，利用四分法分為3份，每份1 kg?；ㄉ蘸偷練し郏ㄉ蘸陀衩仔镜幕旌媳壤鶠?0∶1?；旌暇鶆蚝蠓謩e噴灑等量蒸餾水（CK組）、菌酶復(fù)合添加劑（CLE組）。每份1 kg均勻分為3份并裝入青貯袋中，抽真空封口后儲(chǔ)藏，作為每個(gè)處理的3個(gè)重復(fù)，室溫儲(chǔ)藏時(shí)間為1年。

1.3 發(fā)酵和營養(yǎng)品質(zhì)測(cè)定

1.3.1 發(fā)酵品質(zhì)。

開封后每個(gè)重復(fù)的青貯飼料混合均勻，并利用五點(diǎn)取樣法取20 g青貯飼料，加180 mL蒸餾水，用手振蕩均勻后放入4 ℃冰箱中浸提24 h，4層紗布和定性濾紙過濾后利用梅特勒公司的pH計(jì)對(duì)青貯飼料的pH進(jìn)行測(cè)定。浸提液利用0.22 μm一次性水系濾器過濾，濾液用于有機(jī)酸和氨態(tài)氮的測(cè)定。有機(jī)酸的檢測(cè)方法參考許慶方等［9］的研究，色譜條件：安捷倫1260高效液相色譜儀（配備VWD檢測(cè)器）；色譜柱，Shodex RSpak KC-811S-DVB gel C （8.0 mm×30.0 cm，島津公司）；進(jìn)樣體積5 μL；流動(dòng)相，3 mmol/L HClO4；流速1 mL/min；柱溫60 ℃；檢測(cè)波長210 nm；運(yùn)行時(shí)間20 min。分別配制苯酚和次氯酸鈉溶液，亞硝酰鐵氰化鈉作為催化劑，利用分光光度計(jì)測(cè)定氨態(tài)氮含量［10］。

1.3.2 微生物數(shù)量。

利用五點(diǎn)法另取20 g樣品放入無菌自封袋中，加入180 mL滅菌生理鹽水，置于180 r/min的恒溫?fù)u床中振蕩30 min用于乳酸菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)。在超凈工作臺(tái)中獲得待測(cè)樣品10-1～10-6的稀釋液，利用傾注法分別注入含有MRS培養(yǎng)基（北京路橋）和孟加拉紅培養(yǎng)基（北京路橋）的培養(yǎng)皿中混合均勻，MRS平板倒置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，孟加拉紅平板28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)3～7 d。

1.3.3 營養(yǎng)品質(zhì)。

將剩余約250 g樣品105 ℃殺青后于65 ℃烘干至恒重，計(jì)算干物質(zhì)含量（DM）。樣品粉碎（1 mm篩）后裝入自封袋密封用于營養(yǎng)品質(zhì)的測(cè)定。粗蛋白和纖維組分參考AOAC的方法進(jìn)行測(cè)定［11］。其中總氮含量采用福斯公司的凱氏定氮儀測(cè)定，以總氮×6.25計(jì)算青貯飼料的粗蛋白含量。中性洗滌纖維（aNDF，經(jīng)過淀粉酶處理）、酸性洗滌纖維（ADF）、酸性洗滌木質(zhì)素（ADL）采用安康公司的Ankom200i自動(dòng)纖維分析儀進(jìn)行檢測(cè)。半纖維素、纖維素含量分別以aNDF和ADF以及ADF和ADL的差值計(jì)算。采用胃蛋白酶和纖維素酶兩步法處理分析青貯飼料的體外干物質(zhì)消化率（IVDMD）［12］。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用EXCEL 2016整理原始數(shù)據(jù)，使用SPSS 20.0的一般線性模型（GLM）對(duì)混合青貯和添加劑進(jìn)行雙因素方差分析。對(duì)于差異顯著的指標(biāo)在0.05水平上進(jìn)行簡(jiǎn)單效應(yīng)分析，分別對(duì)不同混合青貯原料中的CK組和CLE組進(jìn)行比較以及對(duì)不同添加劑組中的不同混合青貯原料PA、PB和PC進(jìn)行比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸混合青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響

由表1可知，混合青貯原料的變化及添加劑的使用顯著影響了pH和氨態(tài)氮含量（P<0.05）。在未添加添加劑的青貯飼料中，PC組具有最低的pH和氨態(tài)氮含量。PR組相進(jìn)行比于PA也具有更低的pH。菌酶復(fù)合添加劑CLE的使用顯著降低了青貯飼料的pH（P<0.05）和氨態(tài)氮含量（P<0.05），并且顯著提升了乳酸和乙酸的比值（P<0.05）。在pH、乳酸、乙酸含量上混合青貯和添加劑表現(xiàn)出了明顯的交互效應(yīng)。PA中的CK組pH最高，達(dá)到了4.60，青貯發(fā)酵效果差。在對(duì)照組中PC具有最低的pH（P<0.05），而在CLE組中PC與PA的pH則無顯著差異（P>0.05）。菌酶復(fù)合添加劑CLE在PA中降低pH的效果最好，數(shù)值下降了0.42（P<0.05）。相比于CK組，菌酶復(fù)合添加劑CLE僅在PA中顯著提升了乳酸和乙酸含量（P<0.05），在PC以及PR中菌酶復(fù)合添加劑CLE提升乳酸和乙酸含量的效果不顯著（P>0.05），這使得PA組的乳酸和乙酸由對(duì)照組中的最低變?yōu)榱薈LE組的最高。在所有處理組中未檢出丙酸和丁酸含量。

2.2 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸混合青貯飼料微生物數(shù)量的影響

由表2可知，菌酶復(fù)合添加劑CLE的使用對(duì)于青貯飼料來說整體上顯著降低了青貯開封后乳酸菌的數(shù)量（P<0.05），但是對(duì)于酵母菌則無顯著影響（P>0.05）。在CK組中，混合青貯原料則顯著影響了青貯后酵母菌數(shù)量（P<0.05）。CK組的PC具有最高的酵母菌數(shù)量，而PR酵母菌數(shù)量與PA無顯著差異（P>0.05）。在多數(shù)處理組中未檢出霉菌，只有PC中的菌酶復(fù)合添加劑CLE組檢出少量霉菌，但數(shù)量僅有1.41 logCFU/g，遠(yuǎn)少于4.00 logCFU/g。對(duì)于青貯發(fā)酵后乳酸菌數(shù)量來說，混合青貯和添加劑具有明顯的交互效應(yīng)。PA中的CK組具有最高的乳酸菌數(shù)量，為5.30 logCFU/g。菌酶復(fù)合添加劑CLE在PA中降低乳酸菌數(shù)量的效果最好（P<0.05），最終乳酸菌數(shù)量最低（2.73 logCFU/g）。在PR中，菌酶復(fù)合添加劑CLE相比于CK組也能顯著降低乳酸菌數(shù)量（P<0.05）。但是在PC中，乳酸菌數(shù)量的降低效果不顯著（P>0.05）。

2.3 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸混合青貯飼料干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和體外消化率的影響

由表3可知，PC和PR組相比PA組顯著提升了青貯飼料的干物質(zhì)（DM）含量（P<0.05），其中菌酶復(fù)合添加CLE處理的PC組具有最高的干物質(zhì)含量。與CK相比，菌酶復(fù)合添加劑的使用在PA和PC組中顯著提升了青貯飼料的干物質(zhì)含量（P<0.05），但從整體上看提升幅度很小?；旌锨噘A和添加劑在提升青貯飼料干物質(zhì)含量上具有明顯的交互效應(yīng)。與其他2種青貯飼料不同，在PR中菌酶復(fù)合添加劑的使用降低了青貯飼料的干物質(zhì)含量（P<0.05）。對(duì)于粗蛋白（CP）含量來說，混合青貯、添加劑均有顯著影響（P<0.05）。在CK組中，PC以及PR顯著降低了粗蛋白含量（P<0.05）。PA組中菌酶復(fù)合添加劑CLE的使用也顯著降低了粗蛋白含量（P<0.05）；PA中的CK組具有最高的粗蛋白含量（P<0.05），達(dá)到11.40%，其他處理組之間則無顯著差異（P>0.05）?；旌锨噘A和添加劑對(duì)于體外干物質(zhì)消化率（IVDMD）均具有顯著的影響（P<

0.05），這種影響主要體現(xiàn)在對(duì)照組當(dāng)中。CK組中的PR具

有最低的體外干物質(zhì)消化率（P<0.05）；菌酶復(fù)合添加劑CLE的使用提升了青貯飼料的體外干物質(zhì)消化率，尤其是在PA組之中提升效果顯著（P<0.05）。

2.4 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸混合青貯飼料纖維組分的影響

由表4可知，菌酶復(fù)合添加劑CLE能夠在PA組中顯著降低青貯飼料的aNDF含量（P<0.05），這使得CLE組當(dāng)中PA相比于其他組具有最低的aNDF含量?；旌锨噘A原料對(duì)于ADL含量具有顯著影響?？傮w上看，PC具有最低的ADL含量?；旌锨噘A和添加劑對(duì)于半纖維素含量具有顯著的交互效應(yīng)（P<0.05）。這主要是由于菌酶復(fù)合添加劑CLE顯著降低了PA的半纖維素含量（P<0.05），在其他2個(gè)混合青貯飼料中則無顯著影響（P>0.05）。纖維素和ADF含量不受添加劑和混合青貯的影響，基本保持穩(wěn)定。

表4 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)花生秸混合青貯飼料纖維組分的影響

Table 4 Effects of microbial enzyme composite additives on the fiber composition of peanut straw mixed silage feed

處理Treatment混合青貯原料Mixed silage raw materialsaNDF%ADF%ADL%纖維素Cellulose∥%半纖維素Hemicellulose∥%

CKPA44.05±0.73 aA33.29±1.187.76±0.10 bA25.53±1.2110.75±1.09 aA

PC45.00±0.84 aA34.67±0.197.49±0.37 bA27.18±0.1810.34±0.99 aA

PR45.26±2.04 aA34.71±1.138.54±0.32 aA26.17±0.8110.55±1.00 aA

CLEPA40.06±0.60 bB32.91±0.658.42±0.13 aA24.49±0.787.15±0.05 bB

PC43.90±1.41 aA32.47±0.877.31±0.13 bA25.16±0.9811.44±0.75 aA

PR43.86±0.28 aA34.01±0.418.83±0.14 aA25.43±0.269.85±0.64 aA

注：同列不同大寫字母表示不同混合青貯原料下是否使用添加劑的差異顯著（P<0.05）；同列不同小寫字母表示添加劑相同的情況下不同混合青貯原料之間差異顯著（P<0.05）。aNDF，經(jīng)淀粉酶處理的中性洗滌纖維；ADF，酸性洗滌纖維；ADL，酸性洗滌木質(zhì)素。

Note：Different capital letters in the same column indicate significant differences in the use of additives among different mixed silage materials （P<0.05）;different lowercase letters in the same column indicate significant differences （P<0.05） between different mixed silage materials with the same additives.ANDF，neutral detergent fiber treated with amylase;ADF，acid washing fiber;ADL，acid washed lignin.

3 討論

3.1 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)發(fā)酵品質(zhì)和微生物數(shù)量的影響

優(yōu)質(zhì)青貯飼料的pH通常低于4.2［13］。該試驗(yàn)當(dāng)中未添加菌酶復(fù)合添加劑的花生秸和花生秸混合青貯飼料的pH均高于4.2。玉米芯、稻殼粉和花生秸的混合青貯對(duì)于降低青貯飼料pH有一定效果，但因?yàn)橛衩仔竞偷練し厶砑恿枯^小，降低效果僅在0.2左右。對(duì)于乳酸、乙酸等有機(jī)酸含量無影響，這種pH的差異可能是DM含量和營養(yǎng)成分不同導(dǎo)致的緩沖能值變化導(dǎo)致的。同時(shí)，由于玉米芯的添加，霉菌和酵母菌數(shù)量有所增加，但是增加幅度很小，完全在可控制范圍內(nèi)，不會(huì)造成花生秸青貯飼料的有氧變?。?4］。豆科青貯飼料氨態(tài)氮是一個(gè)很重要的指標(biāo)，因?yàn)槎箍谱魑锉旧淼鞍踪|(zhì)含量較高，在青貯過程中在自身蛋白酶及微生物酶的作用下其大部分真蛋白被分解成了肽、游離氨基酸、氨以及胺等形式的非蛋白氮，降低營養(yǎng)價(jià)值的同時(shí)降低了青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)［15］。該研究當(dāng)中不添加菌酶復(fù)合添加劑的花生秸混合青貯飼料的氨態(tài)氮占總氮的比例均超過10%。單獨(dú)從花生秸混合青貯飼料角度與王洋等［16］的結(jié)果（pH 4.73，氨態(tài)氮占總氮比例12.33%）是一致的，這主要是因?yàn)樗没ㄉ誅M含量接近，均在30%左右。王思偉等［4］報(bào)道了pH高達(dá)6.27，氨態(tài)氮占總氮比例達(dá)到61.36%的花生秸青貯飼料，其所有花生秸原料DM含量在22%～23%左右。楊艷等［17］的花生秸干物質(zhì)含量在29%～35%，其pH最高為4.53。因此，對(duì)于花生秸單貯及花生秸混合青貯飼料，DM含量是決定青貯發(fā)酵質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。最佳的青貯干物質(zhì)水平當(dāng)在30%～35%，這與全株玉米青貯飼料是一致的。過高的水分容易造成花生秸青貯飼料青貯失敗。

乳酸菌與纖維素酶等的菌酶復(fù)合添加劑對(duì)于青貯發(fā)酵品質(zhì)具有明顯的效果，pH均達(dá)到了4.2及以下。通常情況下，菌酶復(fù)合添加劑相比于單獨(dú)的乳酸菌添加劑以及纖維素酶添加劑處理的pH更低［18］。在該試驗(yàn)當(dāng)中，菌酶復(fù)合添加劑的使用顯著降低了花生秸和花生秸混合青貯飼料的pH和氨態(tài)氮含量，增加了乳酸含量和乳酸/乙酸的比值。這說明該試驗(yàn)當(dāng)中同型發(fā)酵乳酸菌及纖維素酶等復(fù)合酶組成的菌酶復(fù)合添加劑顯著增加了同型發(fā)酵乳酸菌在青貯飼料中的繁殖及乳酸的生產(chǎn)，顯著降低了青貯飼料的pH，部分抑制了蛋白質(zhì)的降解。這與黃秀聲等［19］的研究結(jié)果是一致的。由于pH達(dá)到了4.2以下，經(jīng)過長時(shí)間發(fā)酵穩(wěn)定期以后乳酸菌被自身產(chǎn)生的乳酸及低pH所抑制，因此從結(jié)果上看菌酶復(fù)合添加劑的乳酸菌數(shù)量反而比對(duì)照組要小。

3.2 菌酶復(fù)合添加劑對(duì)營養(yǎng)品質(zhì)和體外消化率的影響

作為豆科作物，花生秸的蛋白質(zhì)含量較高，通常在9%～13%［20］。雖然與苜蓿［21］、飼料桑和雜交構(gòu)樹［22］等接近20%的粗蛋白含量相比較低，但是相應(yīng)地也減小了青貯發(fā)酵的難度。在肉羊養(yǎng)殖中飼喂花生秸青貯雖然對(duì)生產(chǎn)性能影響較小，但是能夠降低血清中甘油三酯和尿素氮含量，提高脂肪和蛋白利用率［23］。因此，花生秸青貯飼料作為蛋白質(zhì)補(bǔ)充對(duì)于反芻動(dòng)物營養(yǎng)是有益的。乳酸菌和纖維素酶的組合能夠提升青貯飼料中的粗蛋白含量，但是在該試驗(yàn)當(dāng)中菌酶復(fù)合添加劑的使用對(duì)于粗蛋白有一定負(fù)面影響，這可能是該試驗(yàn)中花生秸和花生秸混合青貯飼料保存時(shí)間較長，在菌酶復(fù)合添加劑更低pH的長期穩(wěn)定發(fā)酵環(huán)境中蛋白質(zhì)降解率變高導(dǎo)致的。稻殼粉和玉米芯的粗蛋白質(zhì)含量均低于花生秸，因此過度增加稻殼粉和玉米芯的比例會(huì)降低青貯飼料的粗蛋白值含量。

相比于玉米芯，稻殼粉的使用增加了花生秸混合青貯飼料中的木質(zhì)素含量。這可能是稻殼粉中木質(zhì)素含量較高。除了木質(zhì)素，植物細(xì)胞壁主要成分還有纖維素、半纖維素、果膠和結(jié)構(gòu)蛋白等數(shù)十種天然高分子化合物，其中木聚糖是半纖維素的主要類型之一，纖維素屬于β-1，4葡聚糖［24］。纖維素酶和葡聚糖酶組合能夠降低青貯飼料中的纖維素含量，同時(shí)對(duì)于半纖維素含量也有一定效果［25］。因此，通過纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶和果膠酶組合形成復(fù)合纖維素降解酶將有助于提升青貯飼料中纖維素、半纖維素和果膠的降解，為乳酸菌提供足夠的可溶性糖來進(jìn)行乳酸發(fā)酵［26］。該試驗(yàn)中菌酶復(fù)合添加劑能夠有效降低花生秸單獨(dú)青貯飼料中的半纖維素含量，從而使得菌酶復(fù)合添加劑處理組aNDF含量顯著低于對(duì)照組。ADF及纖維素含量雖然在菌酶復(fù)合添加劑和對(duì)照組之間無顯著差異，但是從數(shù)值上看菌酶復(fù)合添加劑的ADF和纖維素含量比對(duì)照組要低。這說明，菌酶復(fù)合添加劑中復(fù)合纖維素降解酶發(fā)揮了重要作用。菌酶復(fù)合添加劑顯著提升了體外干物質(zhì)消化率，在花生秸青貯飼料中表現(xiàn)尤其明顯，從最低的59.53%提升到最高的66.18%。但在花生秸混合青貯飼料中提升幅度較小。這與Mu等［27］

的研究結(jié)果相一致，主要是因?yàn)榫笍?fù)合添加劑的使用在花生秸青貯飼料中降低了半纖維素含量，提升了非纖維性碳水化合物，從而提升了體外干物質(zhì)消化率。

4 結(jié)論

菌酶復(fù)合添加劑的使用降解了花生秸混合青貯飼料中的半纖維素，促進(jìn)了乳酸菌生產(chǎn)乳酸，降低了青貯飼料pH，抑制了蛋白質(zhì)降解，適合在實(shí)際生產(chǎn)中使用以改善花生秸及花生秸混合青貯飼料的飼用品質(zhì)。

參考文獻(xiàn)

［1］ 張曉慶，王梓凡，參木友，等.中國農(nóng)作物秸稈產(chǎn)量及綜合利用現(xiàn)狀分析［J］.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，26（9）：30-41.

［2］ 張雙燕，任浩，丁文清，等.農(nóng)業(yè)廢棄物稻殼材料化利用研究進(jìn)展［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2022，38（9）：101-108.

［3］ 覃樹林，王新明，孫保劍，等.玉米芯綜合利用研究進(jìn)展［J］.氨基酸和生物資源，2014，36（2）：23-27.

［4］ 王思偉，李魁英，張海娜，等.花生秧、全株玉米不同混合比例及添加劑對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)和營養(yǎng)價(jià)值的影響［J］.草業(yè)科學(xué)，2019，36（9）：2413-2422.

［5］ 黃秀聲，游小鳳，黃小云，等.狼尾草和花生秧混合青貯效果研究［J］.家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2017，38（10）：58-63.

［6］ 田吉鵬，韋青，劉蓓一，等.復(fù)合添加劑對(duì)花生秧青貯品質(zhì)的影響［J］.草地學(xué)報(bào)，2022，30（2）：464-470.

［7］ KAEWPILA C，THIP-UTEN S，CHERDTHONG A，et al.Impact of cellulase and lactic acid bacteria inoculant to modify ensiling characteristics and in vitro digestibility of sweet corn stover and cassava pulp silage［J］.Agriculture，2021，11（1）：1-12.

［8］ CHENG Q M，LI P，XIAO B X，et al.Effects of LAB inoculant and cellulase on the fermentation quality and chemical composition of forage soybean silage prepared with corn stover［J］.Grassland science，2021，67（1）：83-90.

［9］ 許慶方，玉柱，韓建國等.高效液相色譜法測(cè)定紫花苜蓿青貯中的有機(jī)酸［J］.草原與草坪，2007，27（2）：63-65，67.

［10］ BRODERICK G A，KANG J H.Automated simultaneous deter mination of ammonia and total a mino acids in ru minal fluid and in vitro media［J］.Journal of dairy science，1980，63（1）：64-75.

［11］ AOAC.Official methods of analysis［M］.15th ed.Artington，Virginia，USA：Association of Official Analytical Chemists，1990.

［12］ GOTO I MINSON D J.Prediction of the day matter digestibility of tropical grasses using a pepsin-cellulase assay［J］.Animal feed science and technology，1977，2（3）：247-253.

［13］ WOOLFORD M K，PAHLOW G.The silage fermentation［M］//WOOD B J B.Microbiology of fermented foods.Boston，MA：Springer，1998：73-102.

［14］ WILKINSON J，DAVIES D.The aerobic stability of silage：Key findings and recent developments［J］.Grass and forage science，2013，68（1）：1-19.

［15］ LI X J，TIAN J P，ZHANG Q，et al.Effects of mixing red clover with alfalfa at different ratios on dynamics of proteolysis and protease activities during ensiling［J］.Journal of dairy science，2018，101（10）：8954-8964.

［16］ 王洋，姚權(quán)，孫娟娟，等.玉米與花生秧混合青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)和營養(yǎng)成分評(píng)定［J］.中國奶牛，2018（3）：5-9.

［17］ 楊艷，夏宗群，顧瑤，等.不同發(fā)酵劑對(duì)花生秸稈微貯品質(zhì)的影響研究［J］.江西畜牧獸醫(yī)雜志，2022（6）：46-49.

［18］ TIAN J P，YU Y D，YU Z，et al.Effects of lactic acid bacteria inoculants and cellulase on fermentation quality and in vitro digestibility of Leymus chinensis silage［J］.Grassland science，2014，60（4）：199-205.

［19］ 黃秀聲，馮德慶，黃小云，等.不同添加劑對(duì)狼尾草和花生秧混合青貯效果的影響［J］.草學(xué)，2017（S1）：61-63.

［20］ 唐夢(mèng)琪，侯沛君，丁麗，等.不同花生品種花生秧產(chǎn)量及營養(yǎng)價(jià)值的比較［J］.家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2020，41（12）：56-60.

［21］ TIAN J P，NA R S，YU Z，et al.Inoculant effects on the fermentation quality，chemical composition and saponin content of lucerne silage in a mixture with wheat bran or corn husk［J］.Animal production science，2018，58（12）：2249-2257.

［22］ 王誠，劉雨，翟桂玉，等.復(fù)合乳酸菌對(duì)雜交構(gòu)樹和飼料桑青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響［J］.山東畜牧獸醫(yī)，2022，43（3）：15-19.

［23］ 唐夢(mèng)琪.添加劑處理對(duì)花生秧青貯及其飼喂育肥羊效果研究［D］.鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2020.

［24］ 張曼，張葉卓，何其鄒洪，等.植物細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)及成像技術(shù)研究進(jìn)展［J］.生物技術(shù)通報(bào)，2023，39（7）：113-122.

［25］ 吳永杰，丁浩，邵濤，等.酶制劑對(duì)水稻秸稈青貯發(fā)酵品質(zhì)及體外消化特性的影響［J］.草業(yè)學(xué)報(bào)，2022，31（8）：167-177.

［26］ 周苗育，武偉成，肖定福，等.不同酶制劑組合對(duì)水稻秸稈青貯品質(zhì)和體外瘤胃發(fā)酵特性的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2023，35（6）：3856-3866.

［27］ MU L，WANG Q L，WANG Y T，et al.Effects of cellulase and xylanase on fermentative profile，bacterial diversity，and in vitro degradation of mixed silage of agro-residue and alfalfa［J］.Chemical and biological technologies in agriculture，2023，10（1）：1-16.