蘆榮華，傅 航，李 軻，郭志芳，余健霞

（漯河職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南漯河 462002）

益生菌是自然界中固有的，定植于動(dòng)物胃腸消化道內(nèi)對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育和腸道健康有一定積極作用的微生物的統(tǒng)稱（龔紫鳳和冶貴生，2023）。近年來，養(yǎng)殖業(yè)、食品及生物醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域均有大量針對(duì)益生菌的應(yīng)用研究（黃蕊蕊等，2021）。有研究表明，動(dòng)物胃腸消化道內(nèi)大量益生菌的增殖能通過競(jìng)爭(zhēng)作用抑制有害菌增殖。同時(shí)，益生菌產(chǎn)生的細(xì)菌素等代謝產(chǎn)物能有效維持動(dòng)物胃腸道內(nèi)酸堿度和胃腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。此外，Azad等（2018）研究認(rèn)為，益生菌可通過調(diào)節(jié)腸道內(nèi)多種細(xì)胞的分泌功能，促進(jìn)免疫球蛋白分泌，減少炎癥因子分泌，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物腸道健康。高鐸等（2023）研究認(rèn)為，日糧添加適量的益生菌能有效改善動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)。Wang 等（2018）在肉雞上的研究表明，日糧中添加適量枯草芽孢桿菌能顯著降低肉雞肝臟中HSP70（熱休克蛋白70）蛋白表達(dá)水平。此外，也有研究認(rèn)為，動(dòng)物胃腸消化道內(nèi)的益生菌能有效促進(jìn)腸道內(nèi)谷胱甘肽的合成。作為動(dòng)物機(jī)體內(nèi)還原性最強(qiáng)的物質(zhì)之一，谷胱甘肽在增強(qiáng)內(nèi)源性抗氧化能力等諸多方面發(fā)揮著重要的調(diào)控作用（高鐸等，2023）。Elazab 等（2021）研究認(rèn)為，日糧添加適量復(fù)合益生菌能有效保護(hù)銅過載導(dǎo)致的肉雞腎臟損傷。目前，養(yǎng)殖行業(yè)關(guān)于復(fù)合益生菌的應(yīng)用研究較多，但鮮有關(guān)于益生菌在犬上的研究。因此，本試驗(yàn)以比格犬為研究對(duì)象，旨在探究不同水平益生菌對(duì)犬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率和免疫指標(biāo)的影響，以期為犬日糧的合理配制提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)日糧 本試驗(yàn)所用復(fù)合益生菌購(gòu)置于山東某生物技術(shù)有限公司，其組成和活菌數(shù)見表1。

表1 復(fù)合益生菌組成及活菌數(shù)

1.2 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì) 將健康狀況良好、體重相近的4 月齡比格犬隨機(jī)分為4 組，每組6 個(gè)重復(fù)（雌雄對(duì)半），每個(gè)重復(fù)1 只。參照周榆淞等（2023）配制基礎(chǔ)日糧（見表2），試驗(yàn)日糧分別在基礎(chǔ)日糧中添加0、0.05%、0.1% 和0.2% 的復(fù)合益生菌。每日定時(shí)飼喂，自由采食和飲水。試驗(yàn)為期64 d。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 試驗(yàn)期間記錄所有犬只的體重和采食量，計(jì)算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G），具體計(jì)算公式如下：

ADG=（初始體重-終末體重）/64 ；

ADFI=總采食量/64 ；

F/G=ADFI/ADG。

1.3.2 消化代謝試驗(yàn) 正式試驗(yàn)最后3 d，采用全收糞法收集所有犬只的糞便樣本，并同時(shí)收集飼料樣本。使用65℃烘箱對(duì)所有糞便和飼料樣本進(jìn)行烘干，粉碎后過篩。參照張榮浩等（2023）方法，分別測(cè)定各樣本中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、淀粉、能量含量，計(jì)算相應(yīng)養(yǎng)分表觀消化率。

1.3.3 血清免疫指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)最后1 d，所有犬只靜脈采血后分離血清轉(zhuǎn)移至1.5 mL 離心管，并于-20℃冰箱中保存待測(cè)。參照江蘇酶免試劑盒說明分別檢測(cè)所有血清樣本中IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、IL-10 和TNF-α 含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 原始數(shù)據(jù)預(yù)處理后，使用SAS（9.4）進(jìn)行單因素方差分析，采用Tukey test法進(jìn)行多重比較，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同益生菌水平對(duì)比格犬生長(zhǎng)性能的影響由表3 可知，在所有犬只初始體重一致的前提下，與0% 的復(fù)合益生菌組相比，日糧添加0.2% 的復(fù)合益生菌組比格犬料重比顯著降低4.5%（P＜0.05）；日糧添加不同益生菌水平對(duì)比格犬終末體重、平均日增重、平均日增重均無顯著影響（P＞0.05）。

表3 不同益生菌水平對(duì)比格犬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 不同益生菌水平對(duì)比格犬養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表4 可知，0.2% 的復(fù)合益生菌組干物質(zhì)和粗脂肪表觀消化率顯著高于其他各組（P＜0.05）；0.1% 和0.2% 復(fù)合益生菌組粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于0% 和0.05% 復(fù)合益生菌組（P＜0.05）；0.1% 的復(fù)合益生菌組能量消化率顯著高于其他各組（P＜0.05）；此外，日糧添加不同益生菌水平對(duì)比格犬淀粉表觀消化率無顯著影響（P＞0.05）。

表4 不同益生菌水平對(duì)比格犬養(yǎng)分表觀消化率的影響%

2.3 不同益生菌水平對(duì)比格犬血清免疫指標(biāo)的影響 由表5 可知，與其他各組相比，0.2% 的復(fù)合益生菌組比格犬血清IL-6 含量顯著降低（P＜0.05）；0.1% 和0.2% 復(fù)合益生菌組血清IL-10 含量顯著低于0% 和0.05% 復(fù)合益生菌組（P＜0.05）；日糧添加0.05% ～0.2% 復(fù)合益生菌可顯著降低比格犬血清TNF-α 含量（P＜0.05）此外，日糧添加復(fù)合益生菌對(duì)比格犬血清IgA、IgM、IgG 以及IL-1β 含量均無顯著影響（P＞0.05）。

表5 不同益生菌水平對(duì)比格犬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

李永峰和李鋒（2023）在豬上的研究結(jié)果表明，在日糧或飲水中補(bǔ)充益生菌能有效促進(jìn)豬的生長(zhǎng)發(fā)育，提高其生長(zhǎng)性能，此外，仔豬腹瀉率和料重比均有不同程度降低。刁藍(lán)宇等（2020）聯(lián)合使用益生菌和酸化劑發(fā)現(xiàn)，三黃雞的采食量和屠宰性能均有不同程度的提高。但也有研究表明，日糧補(bǔ)充益生菌對(duì)肉雞的生長(zhǎng)性能無顯著影響（高鐸等，2023）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在犬初始體重一致的情況下，經(jīng)過64 d 的飼養(yǎng)試驗(yàn)，日糧添加0.2% 復(fù)合益生菌能顯著降低比格犬的料重比，但對(duì)其他生長(zhǎng)性能指標(biāo)均無顯著影響。這與高鐸等（2023）等肉雞上的研究結(jié)果基本一致。推測(cè)試驗(yàn)動(dòng)物種類、添加量及益生菌組合等是導(dǎo)致生長(zhǎng)性能結(jié)果差異的主要原因。

張淑萍和姚娟（2022）研究表明，日糧中補(bǔ)充適量益生菌能通過提高仔豬對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率以提高其生長(zhǎng)性能。王四新等（2022）研究表明，補(bǔ)充益生菌能顯著促進(jìn)育肥豬對(duì)日糧中鈣、磷的吸收，并提高其生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧補(bǔ)充復(fù)合益生菌后，比格犬對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率顯著提高，這與前人的研究結(jié)果基本一致。

前人研究認(rèn)為，多種益生菌均能抑制畜禽胃腸消化道內(nèi)的產(chǎn)氣莢膜梭菌的增殖。此外，Wang等（2018）研究認(rèn)為，乳桿菌能有效提高肉雞血清中免疫球蛋白含量，并通過調(diào)節(jié)促炎和抗炎因子等的分泌來增強(qiáng)肉雞的抗應(yīng)激能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加復(fù)合益生菌對(duì)比格犬血清免疫球蛋白含量無顯著影響，推測(cè)可能由于試驗(yàn)動(dòng)物不同。有研究認(rèn)為，炎癥是導(dǎo)致動(dòng)物腸道損傷的主要原因。其中促炎因子（TNF-α，IL-1β 和 IL-6）的大量分泌是導(dǎo)致動(dòng)物腸道屏障及其功能損傷的主要原因（Liu 等，2012 ；Kick 等，2012）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，比格犬日糧添加復(fù)合益生菌，其血清IL-6、IL-10 和TNF-α 等多種炎癥因子含量均有不同程度下降。這與前人研究基本一致，表明日糧添加復(fù)合益生菌能有效增強(qiáng)比格犬的免疫功能。

4 結(jié)論

綜上所述，本試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)合益生菌對(duì)比格犬的養(yǎng)分消化吸收和免疫機(jī)能均有一定的積極影響，在本試驗(yàn)條件下，比格犬日糧中復(fù)合益生菌最適添加量為0.2%。