文│徐曉虎 （陜西省漢中市漢臺(tái)區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心）

H7N9禽流感又被稱(chēng)為高致病性禽流感，不僅嚴(yán)重危害禽類(lèi)健康，導(dǎo)致生產(chǎn)及經(jīng)濟(jì)損失，且能通過(guò)不同媒介感染人類(lèi)，進(jìn)而對(duì)人類(lèi)生命健康造成巨大威脅。2013年在我國(guó)上海發(fā)現(xiàn)首例人感染H7N9禽流感病例，2013—2014年該疫病一度呈現(xiàn)散發(fā)狀態(tài)，2016年以后病例明顯增多，2017年是發(fā)現(xiàn)該病以來(lái)發(fā)病數(shù)最多的一年。當(dāng)年截至2017年5月10日，陜西省共發(fā)現(xiàn)4例人感染H7N9流感病例，其中咸陽(yáng)2例，寶雞1例，西安1例。因漢臺(tái)區(qū)地處候鳥(niǎo)南北遷徙路線途中棲息地，且家禽養(yǎng)殖量大；水網(wǎng)湖泊眾多，野鳥(niǎo)數(shù)量多、遷徙范圍大，病毒感染家禽和跨區(qū)域傳播風(fēng)險(xiǎn)巨大，對(duì)漢臺(tái)區(qū)禽流感防控工作帶來(lái)了巨大威脅。因此，通過(guò)檢測(cè)診斷技術(shù)，對(duì)疫情發(fā)生、流行趨勢(shì)進(jìn)行預(yù)警預(yù)報(bào)，并在禽流感疫情發(fā)展初期做到早發(fā)現(xiàn)、早處理，使禽流感疫情得到有效控制顯得尤為重要。

H 7 N 9 病毒屬正黏病毒科甲型流感病毒屬， 為有囊膜的單股副鏈R N A 病毒。血凝素（Hemagglutinin，HA）和神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase，NA）是存在于禽流感病毒（AIV）表面的兩種重要抗原蛋白，根據(jù)兩種表面蛋白的不同，將AIV劃分為18個(gè)HA亞型和11個(gè)NA亞型。其中H7N9亞型AIV是對(duì)家禽危害最大的亞型之一，對(duì)蛋雞的危害較大。該病可經(jīng)呼吸道傳播，也可通過(guò)密切接觸禽類(lèi)分泌物和排泄物等被感染，目前尚無(wú)人傳人的確切證據(jù)。家禽感染H7N9流感病毒后出現(xiàn)精神沉郁、呼吸困難、流淚、雞冠紺紫或有出血斑塊、腳鱗片出血等癥狀；有的出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如共濟(jì)失調(diào)、偏頭、扭頸等。

2017年5月，動(dòng)物疫控部門(mén)對(duì)轄區(qū)內(nèi)10個(gè)規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)、1個(gè)活禽交易市場(chǎng)進(jìn)行了H7N9流感緊急血清學(xué)監(jiān)測(cè)和病原學(xué)采樣。初步探查了全區(qū)H7N9禽流感的感染情況，并按照國(guó)家相關(guān)疫情防控政策對(duì)涉及的一個(gè)蛋雞養(yǎng)殖戶(hù)血清學(xué)陽(yáng)性但病原學(xué)陰性的禽群作出禁止流通、就近無(wú)害化處理等對(duì)策。

一、材料和方法

1.樣品采集。對(duì)漢臺(tái)區(qū)涉及10個(gè)規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)戶(hù)和1個(gè)活禽交易市場(chǎng)，進(jìn)行血清和咽喉/泄殖腔拭子采樣，共計(jì)采集雞血清360份、咽喉/泄殖腔拭子360份。所有樣本均在4℃保存運(yùn)輸。

2.檢測(cè)試劑。禽流感病毒H7亞型（H7N9株）血凝抑制試驗(yàn)診斷抗原（批號(hào)2016002）和禽流感H7亞型陽(yáng)性血清（批號(hào)2015011），均購(gòu)自哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司；H7N9 RT-PCR檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：A IV H 7 20130418P），購(gòu)自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司。

3.主要儀器設(shè)備。Eppendorf移液器、生化恒溫培養(yǎng)箱、一次性反應(yīng)板（90°）、離心機(jī)、核酸提取儀、PCR分析儀。

二、檢測(cè)方法與結(jié)果判定

血清學(xué)檢測(cè)：采用血凝抑制（HI）試驗(yàn)，檢測(cè)血清中H7亞型禽流感病毒血凝素抗體。具體操作參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2003）中HI試驗(yàn)進(jìn)行，在陽(yáng)性和陰性對(duì)照的前提下，被檢血清HI抗體水平≥24（或4㏒2），結(jié)果判定為陽(yáng)性。

病原學(xué)檢測(cè)：對(duì)血清學(xué)檢測(cè)為陽(yáng)性的樣本，將采集的咽喉/泄殖腔拭子樣品送由上級(jí)動(dòng)物疫控部門(mén)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）進(jìn)行H7亞型禽流感病毒HA基因片段檢測(cè)。按照試劑（盒）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

三、檢測(cè)結(jié)果

1.H7N9血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。通過(guò)H7N9 HI試驗(yàn)檢測(cè)出360份血清樣品中共有陽(yáng)性血清55份（抗體滴度為24～27），且均出自同一養(yǎng)雞場(chǎng)戶(hù)，陽(yáng)性率為15.3%，結(jié)果見(jiàn)表1。其余養(yǎng)殖場(chǎng)戶(hù)和活禽交易市場(chǎng)血清學(xué)檢測(cè)均為陰性。

2.H7N9病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果。對(duì)血清學(xué)檢測(cè)為陽(yáng)性的55份樣品所對(duì)應(yīng)的泄殖腔/咽喉拭子進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。

四、應(yīng)急處置措施

1.規(guī)范上報(bào)疫情信息。將檢出的H7N9流感血清學(xué)陽(yáng)性信息立即按程序報(bào)告給上級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制部門(mén)和區(qū)農(nóng)業(yè)行政主管部門(mén)，并將同步采集、對(duì)應(yīng)的咽喉/泄殖腔拭子送至上級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，同時(shí)啟動(dòng)動(dòng)物H7N9流感緊急流行病學(xué)調(diào)查。

2.立即開(kāi)展動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督。按照《陜西省家禽H7N9流感剔除計(jì)劃實(shí)施方案》要求，動(dòng)物衛(wèi)生執(zhí)法人員第一時(shí)間前往陽(yáng)性雞場(chǎng)，給業(yè)主下發(fā)了動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督文書(shū)，隔離陽(yáng)性禽群，嚴(yán)禁養(yǎng)殖戶(hù)擅自出售和移動(dòng)，嚴(yán)禁其產(chǎn)品（雞蛋）進(jìn)入流通環(huán)節(jié)，同時(shí)做好被污染場(chǎng)地、物品的清洗消毒和飼料原料消毒工作。

3.迅速無(wú)害化處置陽(yáng)性雞群。

根據(jù)《陜西省動(dòng)物H7N9禽流感應(yīng)急處置指南（試行）》規(guī)定，政府按程序緊急啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，于5月14日進(jìn)行陽(yáng)性雞群的無(wú)害化處理，同時(shí)銷(xiāo)毀了染疫的飼料、原料、雞蛋、蛋盤(pán)等，并在舍內(nèi)和院子投放毒餌誘殺疑似帶毒野禽。并深入開(kāi)展疫源追蹤和緊急流行病學(xué)調(diào)查工作。

4.做好消毒滅源工作。由屬地鎮(zhèn)獸醫(yī)站技術(shù)人員監(jiān)督該養(yǎng)殖戶(hù)開(kāi)展消毒滅源工作，雞舍周?chē)畚镆M(jìn)行堆積發(fā)酵，雞舍、飼槽、用具、環(huán)境等立即用3%燒堿溶液消毒，每天1次，堅(jiān)持一周。同時(shí)加強(qiáng)養(yǎng)殖戶(hù)家庭成員及外來(lái)人員的消毒措施，防止疫情傳播。

五、分析與討論

在本次H7N9禽流感疫情監(jiān)測(cè)中，通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該批雞群雞苗為2016年7月，由本省其他地市引入，有檢疫證但無(wú)H7N9流感檢測(cè)報(bào)告，也沒(méi)有進(jìn)行落地報(bào)檢。在開(kāi)產(chǎn)前（即130日齡以前），采用由政府提供的禽流感病毒（H5亞型）三價(jià)滅活疫苗（Re-6株＋Re-7株＋Re-8株）進(jìn)行程序化免疫，開(kāi)產(chǎn)后分別進(jìn)行加強(qiáng)免疫2次。該雞群目前為310日齡，精神狀態(tài)正常，未出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，產(chǎn)蛋率≥90%，且雞蛋外觀無(wú)異常。由于該雞群未接種過(guò)禽流感病毒（H7亞型）疫苗，根據(jù)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果初步判斷該雞群近期（3～6個(gè)月以?xún)?nèi)）感染了H7亞型禽流感病毒，核酸檢測(cè)結(jié)果為陰性可能是該雞群已處于病毒感染后期，抗體水平升高致使病毒載量下降導(dǎo)致核酸檢測(cè)為陰性，也不能排除采集的樣本不合格導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果異?；虿粶?zhǔn)確。

根據(jù)流調(diào)結(jié)果我們分析該雞群感染可能有以下3點(diǎn)原因。

（1）該養(yǎng)殖戶(hù)雞舍沒(méi)有安裝防護(hù)野禽設(shè)施，舍內(nèi)麻雀等野禽覓食隨處可見(jiàn)，隔壁鄰居飼養(yǎng)鴿子，野（飛）禽感染后傳入病原的可能性很大。

（2）雞舍緊鄰村鎮(zhèn)交通干道，距316國(guó)道1千米，且該戶(hù)開(kāi)辦有零售商店，接觸人員復(fù)雜，易造成病原傳入。

（3）該戶(hù)養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生狀況較差，隔離、消毒工作不嚴(yán)格，是造成疫病感染及群內(nèi)水平傳播的重要原因。

H7N9亞型禽流感作為一種人畜共患病，對(duì)公共衛(wèi)生造成巨大威脅。自2013年發(fā)現(xiàn)該疫情以來(lái)，科學(xué)家在疫苗研究方面不斷探索和嘗試，并取得了一定進(jìn)展。多種新型疫苗應(yīng)運(yùn)而生，如核酸疫苗、亞單位疫苗、VLP疫苗等效果顯著。2017年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)使用（H5＋H7）二價(jià)滅活疫苗，從源頭控制家禽中H7N9禽流感病毒載量，使疫情得到有效控制。但近些年H7N9亞型流感病毒變異速度加快，導(dǎo)致疫情防控難度加劇，至今零星散發(fā)疫情仍時(shí)有發(fā)生。

禽流感的發(fā)生沒(méi)有季節(jié)性，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，構(gòu)建有效的生物安全體系，是防控高致病性禽流感的關(guān)鍵措施。養(yǎng)殖場(chǎng)需要做到以下幾點(diǎn)：

（1）做好衛(wèi)生消毒措施，定期對(duì)舍內(nèi)、舍外環(huán)境進(jìn)行消毒，為畜禽提供一個(gè)干燥、清潔的生產(chǎn)環(huán)境。

（2）為防止外界病毒入侵，應(yīng)盡量做到自繁自養(yǎng)，如果必須從外界引種，則應(yīng)對(duì)新引入的家禽進(jìn)行嚴(yán)格隔離和檢測(cè)，確保不攜帶病原體。

（3）養(yǎng)殖場(chǎng)也應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況定期對(duì)家禽進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè)，做到早發(fā)現(xiàn)、早處理，防止病情擴(kuò)散或蔓延，降低經(jīng)濟(jì)損失。當(dāng)場(chǎng)內(nèi)有疑似或確診病例時(shí)，應(yīng)及時(shí)隔離病雞并對(duì)所在養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)行徹底消毒。

（4）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，對(duì)家禽進(jìn)行科學(xué)飼養(yǎng)。使用優(yōu)質(zhì)飼料，提供家禽生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高家禽對(duì)疾病的抵抗力，同時(shí)為家禽提供充足、干凈的飲用水。夏季注意通風(fēng)，冬季注意保暖，飼養(yǎng)棚內(nèi)保持適宜的濕度，消除由此引起的應(yīng)激反應(yīng)，從而防止禽流感的發(fā)生。

同時(shí)，H7N9亞型禽流感作為一種危害公眾健康的疫病，除在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)加強(qiáng)疫病防控外，還需要政府相關(guān)部門(mén)的統(tǒng)籌協(xié)調(diào)工作。

（1）獸醫(yī)部門(mén)應(yīng)和各地疾病預(yù)防控制部門(mén)加強(qiáng)溝通合作，以便疫情信息的快速溝通和疫情控制。

（2）加強(qiáng)職業(yè)人群防護(hù)。研究表明，人感染H7N9禽流感患者均有活禽暴露史，而活禽市場(chǎng)和家禽相關(guān)職業(yè)人群是人感染H7N9禽流感病例中的主要人群。因此，需要規(guī)范管理活禽市場(chǎng)，采取有效的消毒措施，保證活禽市場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生，部分城市采取定期關(guān)閉活禽市場(chǎng)措施，對(duì)疫情起到一定的遏制作用。

（3）加強(qiáng)禽流感防疫宣傳工作，政府部門(mén)可充分利用廣播、電視、板報(bào)、宣傳冊(cè)等宣傳手段提升公眾的防疫意識(shí)，養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣，做到科學(xué)防護(hù)。