孫琳潔 俞佳利 李屹龍 宋徽 薛金貴

摘要? 目的：探討葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的作用機(jī)制。方法：通過中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TCMSP）數(shù)據(jù)庫，篩選出葛根總黃酮、絞股藍(lán)總皂苷、山楂的有效成分，借助 PubChem、GeneCard等獲得本方及疾病靶點，繪制韋恩圖后得到共同靶點，篩選得到關(guān)鍵靶點。構(gòu)建藥物-疾病靶點相互作用網(wǎng)絡(luò)圖并行基因本體（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）富集分析，以Cytoscape 3.9.1行可視化分析。結(jié)果：葛蘭心寧軟膠囊與冠心病的交集靶點59個，血清清蛋白（ALB）、腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、蛋白激酶B1（AKT1）、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）等在藥物-疾病相互作用中尤為重要。GO分析顯示作用機(jī)制可能與基因表達(dá)的正向調(diào)控有關(guān)，KEGG分析獲得155條相關(guān)通路，其中與冠心病相關(guān)的主要是脂質(zhì)和動脈粥樣硬化通路。結(jié)論：葛蘭心寧軟膠囊通過多靶點、多通路發(fā)揮抗冠心病作用，本研究為進(jìn)一步研究葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的機(jī)制提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞? 冠心??；葛蘭心寧軟膠囊；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；機(jī)制研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.02.004

冠心病為臨床常見病，嚴(yán)重危害人類健康，近年來其致死率居高不下。冠心病是由于冠狀動脈粥樣硬化導(dǎo)致冠狀動脈狹窄、缺血以及痙攣，從而引起心肌缺血缺氧性心臟病。以往的研究已證實，動脈粥樣硬化是冠心病心絞痛的主要病理基礎(chǔ)，炎癥反應(yīng)、血管內(nèi)皮障礙、血栓形成、血小板激活聚集均是其主要病理機(jī)制［1］。在臨床實踐中，中醫(yī)藥治療冠心病的臨床應(yīng)用日益增多，葛蘭心寧軟膠囊由葛根總黃酮、山楂提取物及絞股藍(lán)總皂苷組成，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛的作用，用于瘀血閉阻所致的冠心病、心絞痛。本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對葛蘭心寧軟膠囊進(jìn)行分析，進(jìn)一步證實其抗動脈粥樣硬化的可能機(jī)制。

1? 資料與方法

1.1? 葛蘭心寧軟膠囊的有效成分及相關(guān)靶點預(yù)測? 檢索中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫和分析平臺（TCMSP）（https：//www.Tcmsp.e.com/）并篩選葛蘭心寧軟膠囊的有效成分，其中葛根和絞股藍(lán)以“口服生物利用度

作者單位? 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院（上海 200021）

通訊作者? 薛金貴，E-mail：13916465889@139.com

引用信息? 孫琳潔，俞佳利，李屹龍，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的療效與機(jī)制［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（2）：220-230.

（OB）＞30%、類藥性（DL）＞0.18”為條件篩選有效成分，并進(jìn)一步篩選葛根有效成分中的黃酮類成分及絞股藍(lán)有效成分中的皂甙成分。同時，因TCMSP數(shù)據(jù)庫未收錄山楂，查閱文獻(xiàn)收集山楂的化學(xué)成分，通過PubChem數(shù)據(jù)庫（https：//pubchem.Ncbi.Nlm.Nih.gov/）獲取

相關(guān)成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其中未被PubChem平臺收錄的成分，使用ChemDraw軟件繪制其化學(xué)結(jié)構(gòu)，并將文件保存為sdf格式，再通過SwissADME數(shù)據(jù)庫（http：//www.swissadme.ch/）將sdf文件進(jìn)行篩選，篩選條件如下：GI absorption為High，Druglikeness（Lipinski、Ghose、Veber、Egan、Muegge）中5 項至少符合2項，以得到具有較高的口服利用度和類藥性的化學(xué)成分。將已獲得的葛蘭心寧軟膠囊中全部有效成分通過PubChem（https：//pubchem.Ncbi.Nlm.nih.gov/）獲取SMILES，后將其全部導(dǎo)入Swiss Targets Prediction（http：//swisstargetsprediction.ch/），物種選擇“Homo sapiens”，得到“Probability＞0”的所有潛在靶點。

1.2? 冠心病的靶點篩選及其與葛蘭心寧軟膠囊相關(guān)靶點的交集靶點的獲取

在GeneCard（https：//www.genecards.org/）數(shù)據(jù)庫檢索 “coronaryheartdisease”，并根據(jù)相關(guān)度（relevancescore）由大到小排序，以第二分之一位數(shù)為條件進(jìn)行篩選獲得冠心病靶點，通過Venny 2.1（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）獲得葛蘭心寧軟膠囊與冠心病的交集靶點，繪制韋恩圖。

1.3? 藥物-疾病交集靶點蛋白互作（PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將交集靶點導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫，條件選擇“Homo sapiens”，獲得tsv文件。將獲得的文件導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1，利用Network Analyzer插件行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析，篩選“Degree值≥第3個四分位數(shù)”的節(jié)點為關(guān)鍵靶點，并構(gòu)建關(guān)鍵靶點網(wǎng)絡(luò)圖。

1.4? 基因本體（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）富集分析

經(jīng)DAVID數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/）對關(guān)鍵靶點進(jìn)行GO和KEGG富集分析，以P＜0.01為條件，富集基因數(shù)由大到小進(jìn)行排序，篩選出排前20位的生物過程和通路。利用微生信平臺（http：//www.bioinformatics.com.cn/）繪制柱形圖和氣泡圖，進(jìn)行可視化分析。

1.5? 成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

選擇KEGG富集分析基因富集數(shù)前20位的通路，篩選得到與治療冠心病相關(guān)的靶向通路，獲取富集在這些通路上的潛在靶點，并將靶點與藥物的活性成分相對應(yīng)。以活性成分、靶點、通路為節(jié)點，導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1軟件，構(gòu)建葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病相關(guān)的成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6? 分子對接

選取葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的核心靶點與連接度值（Degree值）最高的核心藥物成分進(jìn)行分子對接，并計算其結(jié)合能，選擇結(jié)合能最小的靶點和藥物成分進(jìn)行分子對接可視化。

2? 結(jié)? 果

2.1? 葛蘭心寧軟膠囊的有效成分及其相關(guān)靶點的預(yù)測分析

從TCMSP數(shù)據(jù)庫中篩選得到葛根總黃酮4個有效成分，絞股藍(lán)總皂苷24個有效成分；檢索相關(guān)文獻(xiàn)并收集山楂化學(xué)成分229個，建立山楂化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫，通過 SwissADME數(shù)據(jù)庫篩選，得到105個具有良好吸收、分布、代謝、排泄（ADME）性質(zhì)的潛在活性化學(xué)成分，詳見表1。使用Swiss Targets Prediction數(shù)據(jù)庫獲得葛蘭心寧軟膠囊的潛在靶點并匯總，刪除重復(fù)值后得到葛蘭心寧軟膠囊的有效靶點共743個。

2.2? 冠心病相關(guān)靶點的篩選與交集靶點

檢索GeneCard數(shù)據(jù)庫并篩選，得到冠心病的基因靶點1 790個，通過Venny 2.1將冠心病與葛蘭心寧軟膠囊的靶點取交集，最終得到229個共同靶點。詳見圖1。

2.3? 靶點PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將229個交集靶點導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫，以“Homo sapiens”為條件篩選，得到tsv文件。將得到的文件導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1，得到靶點間相互作用與聯(lián)系的PPI網(wǎng)絡(luò)。詳見圖2。PPI網(wǎng)絡(luò)共有229個節(jié)點、4 484條相互作用連線。并依據(jù)Degree值大小設(shè)置節(jié)點大小和顏色深淺。Degree值越大，節(jié)點越大，顏色越深，表明葛蘭心寧軟膠囊通過作用于這些關(guān)鍵靶點從而在冠心病中發(fā)揮作用的可能性越大。經(jīng)計算，整個網(wǎng)絡(luò)節(jié)點Degree值第3個四分位數(shù)為51，以“Degree值≥第3個四分位數(shù)”為條件篩選關(guān)鍵靶點，共篩選得到葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的關(guān)鍵靶點59個、1 283條相互作用連線，詳見圖3。

2.4? GO和KEGG富集分析

經(jīng)DAVID數(shù)據(jù)庫對交集靶點進(jìn)行GO和KEGG富集分析，并通過微生信網(wǎng)站將結(jié)果可視化。以富集數(shù)（count）為縱坐標(biāo)制作GO富集三合一柱狀圖（見圖4），結(jié)果顯示，排名從前往后生物過程（BP）依次為：基因表達(dá)的正向調(diào)控、凋亡過程負(fù)向調(diào)控、平滑肌細(xì)胞增殖的正向調(diào)節(jié)、RNA聚合酶Ⅱ啟動子的轉(zhuǎn)錄正調(diào)控等通路；細(xì)胞組分（CC）依次為：大分子復(fù)合物、小窩、質(zhì)膜、細(xì)胞質(zhì)等通路；分子功能（MF）依次為：酶結(jié)合、相同的蛋白質(zhì)結(jié)合、絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸蛋白激酶活性、蛋白磷酸酶結(jié)合等。KEGG分析共富集到155條通路，主要為：癌癥的通路、蛋白質(zhì)聚糖在癌癥中的應(yīng)用、脂質(zhì)和動脈粥樣硬化、晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGE）及晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）信號通路在糖尿病并發(fā)癥中的作用、表皮生長因子受體（EGFR）酪氨酸激酶抑制劑的耐藥性、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（AKT）信號通路等。KEGG富集分析置信度較高的前20條通路繪制氣泡圖，詳見圖5，縱軸代表通路（term），橫軸代表富集倍數(shù)（fold enrichment），基因的置信度（P-value）用氣泡的顏色表示，基因數(shù)用氣泡大小表示，氣泡越大表明該途徑基因富集數(shù)量越多，氣泡顏色越紅表示富集程度越顯著，即置信度越小。

2.5? 成分-靶點-通路網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

通過KEGG通路富集分析結(jié)果篩選出葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的潛在通路，并與活性成分和靶點一一對應(yīng)。將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1繪制葛蘭心寧軟膠囊的成分-靶點-通路相互作用的網(wǎng)絡(luò)圖。詳見圖6。網(wǎng)絡(luò)圖包含192個節(jié)點、814條邊線，活性成分用圓形表示，潛在靶點用六邊形表示，通路用菱形表示?？梢姼鹛m心寧軟膠囊治療冠心病是多成分、多靶點、多通路共同作用的結(jié)果。

2.6? 分子對接

選取葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的5個核心靶點血清清蛋白（ALB）、腫瘤壞死因子（TNF）、白細(xì)胞介素（IL）-6、蛋白激酶B1（AKT1）、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）作為蛋白受體，與Degree值最高的9個核心藥物成分8-methoxy kaempferol、cyanidin、kaempferol、quercetin、rhamnazin、gypenoside ⅩⅩⅤ_qt、gypenoside ⅩⅩⅦ_qt、gypenoside ⅩⅩⅧ_qt、gypentonoside A_qt作為分子配體，進(jìn)行分子對接，并計算其結(jié)合能，結(jié)果見表2。研究表明，小分子配體與蛋白受體之間結(jié)合能＜0 kJ/mol表示兩者能自發(fā)的結(jié)合，結(jié)合能越小，構(gòu)象越穩(wěn)定。結(jié)合能＜－17.79 kJ/mol，說明兩者之間有一定的結(jié)合活性；結(jié)合能＜－20.93 kJ/mol，說明兩者之間有較好的結(jié)合活性［2］。ALB與8-methoxy kaempferol結(jié)合能＜－20.93 kJ/mol，有較強(qiáng)烈的結(jié)合活性，其可視化結(jié)果見圖7。

3? 討? 論

冠心病屬于中醫(yī)學(xué)“胸痹、心痛、真心痛”范疇，其病機(jī)為“陽微陰弦”，為本虛標(biāo)實之證，瘀血、痰濁、寒凝、氣滯為標(biāo)，氣、血、陰、陽虧虛為本［3］。葛蘭心寧軟膠囊由葛根總黃酮、絞股藍(lán)總皂苷、山楂組成，其中葛根總黃酮能夠活血化瘀、引藥上行，山楂提取物活血散瘀降脂，絞股藍(lán)總皂苷益氣健脾化痰，以上藥物成分共同發(fā)揮活血化瘀、通絡(luò)止痛之效［4］。現(xiàn)代藥理學(xué)中，葛根總黃酮能夠抗血小板聚集，促進(jìn)纖溶，降低血黏度，降低血脂，并能夠清除動脈血栓，同時可以擴(kuò)張冠狀動脈，減輕心臟負(fù)荷，并能夠發(fā)揮受體阻滯作用，降低心肌耗氧，改善心肌代謝，葛根總黃酮中的葛根素成分能夠抗心律失常，保護(hù)心肌，改善心肌缺血［5-7］。葛根素還能夠減少氧自由基生成，并增加其清除率，同時能降低血黏度，從而減少內(nèi)皮細(xì)胞損傷［8］。山楂及絞股藍(lán)也具有降低血脂、擴(kuò)張血管的作用，其中山楂中的山楂總黃酮還可以增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，并在缺氧時減少自由基損傷［9］，絞股藍(lán)總苷還能防治血栓，改善心絞痛病人的臨床癥狀，發(fā)揮保護(hù)心腦血管的作用［10-11］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，葛蘭心寧能夠抑制血栓形成，降低血脂，改善內(nèi)皮功能［12］。王階等［13］研究表明葛蘭心寧具有降低紅細(xì)胞聚集、血小板黏附、血黏度、調(diào)節(jié)血液流變性、改善微循環(huán)的作用，葛蘭心寧軟膠囊的作用關(guān)鍵在于“調(diào)血通脈”，以達(dá)到“心腦同治”的臨床效應(yīng)［14］。

一氧化氮（NO）及內(nèi)皮素（ET）水平與冠心病病人病情嚴(yán)重程度相關(guān)［15］。ET是一種血管活性物質(zhì)，具有較強(qiáng)的血管收縮作用，其對冠狀動脈的作用十分敏感［16］，具有正性肌力作用，能夠刺激血管心臟重構(gòu)［17］。NO主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成，發(fā)揮擴(kuò)血管、抑制血小板聚集、黏附、血管平滑肌細(xì)胞增殖及抗血栓和改善微循環(huán)等作用，對于冠心病的治療具有重要意義。有研究表明，葛蘭心寧軟膠囊能顯著降低冠心病病人ET水平，同時升高NO水平，從而擴(kuò)張冠狀動脈， 改善微循環(huán)，增加組織灌注，改善代謝，減輕心肌損傷［8］。同時，葛根素可減少內(nèi)皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致NO合成釋放增加，ET合成減少，可能為葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的重要機(jī)制。

脂代謝異常引發(fā)的冠狀動脈粥樣硬化是冠心病的重要病理基礎(chǔ)。研究表明，氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）可在動脈硬化發(fā)生發(fā)展全過程中發(fā)揮作用，ox-LDL既可以促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖及遷移，并刺激血小板形成血栓，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞中黏附分子的表達(dá)等，又可以增加泡沫細(xì)胞生成，促進(jìn)動脈粥樣硬化的形成。 而葛蘭心寧軟膠囊可顯著降低冠心病心絞痛病人ox-LDL水平［18］。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）經(jīng)過氧化修飾后致動脈粥樣硬化的作用更強(qiáng)，因此，降低LDL-C水平是治療中的關(guān)鍵目標(biāo)之一［19］。

本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)原理，獲取葛蘭心寧軟膠囊與冠心病的共同靶點后構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，篩選出其中的核心靶點。TNF與腫瘤壞死因子受體1（TNFR1）結(jié)合后能夠激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）以及核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）、c-Jun通路，促進(jìn)細(xì)胞中IL-1、IL-6等促炎因子的表達(dá)并介導(dǎo)炎性反應(yīng)的發(fā)生［20-22］。TNF與腫瘤壞死因子受體2（TNFR2）結(jié)合后激活PI3K/AKT通路，AKT1同時也是PI3K/AKT通路的重要組成部分，AKT1能夠促進(jìn)內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）及NO的生成，進(jìn)而導(dǎo)致頸動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定［23-24］。TNF-α存在于粥樣硬化損傷部位，能夠誘導(dǎo)免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)，同時還導(dǎo)致斑塊的不穩(wěn)定并促進(jìn)血栓形成［25］，對血管壁細(xì)胞的增殖、壞死及凋亡起到調(diào)控作用，首先可以直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，介導(dǎo)血栓形成，同時也可反過來增加TNF-α釋放使單核細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞趨化并黏附，并誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞的內(nèi)膜遷移趨勢［26］。

同時，在冠狀動脈粥樣硬化發(fā)生過程中，TNF-α能夠增加IL-6的釋放［27-28］，IL-6是一種促炎因子，參與機(jī)體炎癥反應(yīng)，促進(jìn)動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展［29-32］。二者協(xié)同作用可使大量免疫復(fù)合物沉積于血管內(nèi)皮，加快血栓形成。IL-6能夠誘導(dǎo)黏附分子和其他炎癥介質(zhì)在血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，同時還能誘導(dǎo)脂質(zhì)沉積從而促進(jìn)動脈粥樣斑塊的形成，并刺激血管平滑肌細(xì)胞的增殖，增加冠狀動脈血栓的形成。另外，IL-6可促進(jìn)基質(zhì)降解酶合成從而侵蝕斑塊基質(zhì)，導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定甚至破裂。因此，有研究提出，血清IL-6水平能夠預(yù)測冠心病的嚴(yán)重程度及其預(yù)后［33-36］。

MAPK3/1即細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）1/2，不僅與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切［37-38］，同時炎癥反應(yīng)也與ERK通路的激活密切相關(guān)［39］。MAPK通路抑制劑能夠通過抑制多種炎性因子的產(chǎn)生從而明顯阻斷炎癥反應(yīng)的發(fā)生［39-40］。PI3K/AKT通路能夠通過影響巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)代謝、極化分型、自噬等過程［41-42］，影響冠心病發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。SRC是一種蛋白激酶，能夠激活ERK1/ERK2、p38/MAPK、PI3K/AKT等與細(xì)胞增殖相關(guān)的通路，導(dǎo)致內(nèi)皮功能紊亂，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移［43-45］，同時能刺激巨噬細(xì)胞合成并分泌炎性因子，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，加快冠心病進(jìn)展［46］。

炎性因子還能夠通過Janus激酶2（JAK2）/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（STAT3）通路的介導(dǎo)，促進(jìn)動脈內(nèi)膜的增厚［47］。有研究發(fā)現(xiàn)，增加JAK2/STAT3信號通路介導(dǎo)的抗炎性因子可以消退動脈斑塊［48］。STAT3還能夠促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖遷移，從而導(dǎo)致冠心病的發(fā)生發(fā)展［49］，因此，抑制IL-6/STAT3通路能夠降低心血管疾病的風(fēng)險［50］。血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）是一種特異性促血管生成因子，具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分裂，刺激體內(nèi)新生血管生成及增加血管通透性等多種功能［51-52］，缺血缺氧、牽拉、炎性細(xì)胞因子等因素均促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）分泌，但其中最主要的是缺血缺氧［53］。正常人血清VEGF含量極低 ，但其在炎癥、腫瘤等病理情況下顯著升高。研究表明，梗死的心肌周圍的血管平滑肌細(xì)胞、心肌和受損心肌中 VEGF基因均呈高表達(dá)［52，54］。一旦冠狀動脈狹窄解除，血清VEGF水平迅速下降至正常［55］。由此可見，冠心病病人血清VEGF水平可作為了解冠狀動脈病變程度和心肌缺血程度的敏感指標(biāo)。

缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）是生理和病理條件下維持人體氧穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，在缺氧條件下，HIF-1α能在其他大部分蛋白質(zhì)合成下降時仍然可繼續(xù)翻譯，其主要在腎臟及心臟中高度表達(dá)，并在血管形成中起重要作用，其失調(diào)與缺血性疾病病理學(xué)有關(guān)［56］。

趨化因子8（CXCL8）參與炎性反應(yīng)的發(fā)生［57］，CXCL8可通過影響基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）從而促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解以及血管平滑肌細(xì)胞的遷移［58-59］?；|(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）可降解血管壁成分，其中MMP-9能夠調(diào)節(jié)血管壁細(xì)胞表達(dá)和分泌，在內(nèi)膜損傷和粥樣病變形成過程中起關(guān)鍵作用。粥樣斑塊形成早期炎性細(xì)胞釋放大量的細(xì)胞因子，刺激MMP-9的合成，同時導(dǎo)致斑塊形成［60］。另外，CXCL8與MMPs兩者相互作用，可增加彼此的生物活性［61-62］，導(dǎo)致冠心病不斷進(jìn)展和惡化。c-Jun活化后可參與炎性細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)MMPs的蛋白合成和表達(dá)，從而導(dǎo)致粥樣斑塊的不穩(wěn)定［63-65］。TNF-α也可促進(jìn)c-Jun參與調(diào)節(jié)MMP-9的轉(zhuǎn)錄［66］。

分子對接結(jié)果顯示，8-methoxy kaempferol與ALB具有良好的切合度。ALB是由肝臟產(chǎn)生的急性期蛋白，并參與急性和慢性炎癥反應(yīng)［67-68］。ALB能夠抑制炎性因子，抑制血栓活性，是抑制血小板活化、聚集的主要抑制劑，從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化的作用［69-70］。心血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生損傷時，ALB的功能受炎性因子抑制，可能增加血液黏度并進(jìn)一步影響內(nèi)皮功能［71］。血清中的ALB具有強(qiáng)大的抗氧化特性，研究表明，在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中氧化應(yīng)激發(fā)揮重要作用，能夠抑制自由基的產(chǎn)生、脂質(zhì)過氧化以及內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡［72-73］。因此，心血管疾病危險程度與ALB水平存在負(fù)相關(guān)，ALB 水平可以預(yù)測冠狀動脈病變嚴(yán)重程度及疾病死亡風(fēng)險［74］。各靶點密切聯(lián)系，彼此促進(jìn)，共同作用影響冠心病的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。本研究通過GO、KEGG富集分析，獲取葛蘭心寧軟膠囊與冠心病之間的潛在通路，最終獲得與冠心病密切相關(guān)的通路主要是脂質(zhì)和動脈粥樣硬化通路。運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的作用機(jī)制進(jìn)行深入分析，有利于對傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療冠心病知識的完善，促進(jìn)中西醫(yī)結(jié)合治療冠心病的進(jìn)一步發(fā)展和探索。

葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的療效顯著，已得到臨床研究證實。本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的有效成分、作用靶點和通路進(jìn)行了預(yù)測和分析，為其治療作用提供了理論基礎(chǔ)。同時，還需要通過更多深入研究來驗證這些理論，為葛蘭心寧軟膠囊治療冠心病的療效提供有力的科學(xué)依據(jù)。

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（收稿日期：2023-06-26）

（本文編輯王麗）