■ 許 巧 任 陽 黨 涵 鄭敏萍 徐 雪 滑志民*
(1.上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院,上海 201699;2.上海福貝寵物用品股份有限公司,上海 201607)
近年來,寵物貓的飼養(yǎng)量迅速增加,其健康問題也日益受到關(guān)注。因貓本身飲水較少,食物又以干糧為主,加之寵主飼養(yǎng)經(jīng)驗缺乏,貓泌尿道疾病的發(fā)病率逐年增加,其中以尿石癥與膀胱炎最為常見[1-3]。寵物犬貓發(fā)生泌尿系統(tǒng)疾病后,使用具有輔助治療作用且方便快捷的食物是很多寵主的選擇。因此,針對性添加預(yù)防和改善泌尿系統(tǒng)問題的天然食療成分,是未來功能性和處方寵物食品的發(fā)展方向。
貓須草又名腎茶,是唇形科腎茶屬多年生草本植物,因其雄蕊酷似貓須而得名,是我國傣族傳統(tǒng)的藥食兩用植物,主要分布于廣東、海南、廣西南部、云南南部、臺灣和福建等熱帶地區(qū)[4]。早在兩千多年前,《貝葉經(jīng)》《檔哈雅》等傳統(tǒng)傣族醫(yī)書中已有關(guān)于貓須草治療泌尿系統(tǒng)類疾病的記載[5]。近年來研究發(fā)現(xiàn),貓須草富含黃酮類、酚類、二萜類、三萜類、甾體、木質(zhì)素類等活性成分[6-7],具有利尿、排石、保護(hù)腎臟、抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛和抗腫瘤等藥理作用,尤其利尿、排結(jié)石和抗炎功效已得到廣泛認(rèn)證[7-10]。目前,貓須草已被證實(shí)了使用的安全性[11-12],亦被引入到歐洲和東南亞國家作為日常保健茶飲。
貓須草來源廣泛,成本可控,是良好的飼料添加劑來源。但當(dāng)前有關(guān)貓須草的應(yīng)用研究主要集中在人類醫(yī)療和模式動物中,應(yīng)用于犬貓飲食中的研究鮮有報道。楊帆等[13]指出,貓糧中添加1.0%貓須草粉末可顯著提高貓的飲水量,起到增加貓排尿量的作用。但該研究缺乏貓須草對貓體況、采食量、養(yǎng)分消化率及機(jī)體健康狀態(tài)的評估,且未評估其適宜添加量。為此,本試驗通過在貓糧中添加0.5%、1.0%、2.0%貓須草粉末,探究貓須草對貓采食、飲水及機(jī)體抗氧化和抗炎指標(biāo)的影響,評估貓須草作為貓飼料添加劑的可能性,為其在功能性或處方食品中的應(yīng)用提供理論依據(jù),并篩選出適宜添加量。
試驗所用貓須草風(fēng)干樣,來源于廣西南寧偉康中草藥市場,采用萬能粉碎機(jī)對貓須草進(jìn)行粉碎,過篩孔直徑為270 μm 的篩網(wǎng),粉末于干燥器中保存,待用。選取健康、體重相近、精神狀況良好的成年貓24 只,其中公貓8 只,母貓16 只,品種為英短、美短和暹羅貓。所有試驗貓飼養(yǎng)于上海福貝寵物用品股份有限公司動物房中,每只貓單獨(dú)飼養(yǎng)在3 m×1 m×2 m的貓籠中,試驗前按常規(guī)流程完成免疫和驅(qū)蟲。
試驗前,由上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院寵物醫(yī)院對24 只貓進(jìn)行健康評估,在適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d 后進(jìn)行稱重,并根據(jù)體重、性別和品種進(jìn)行分組,使各組間平均體重?zé)o顯著差異,共分為4組(每組公貓2只,母貓4只)。各組分別飼喂基礎(chǔ)日糧及在基礎(chǔ)日糧添加0.5%、1.0%、2.0%貓須草,試驗分組見表1。所有貓糧均由上海福貝寵物用品股份有限公司配制提供,日糧組成及營養(yǎng)成分含量如表2 所示。試驗期為42 d,適應(yīng)性喂養(yǎng)(適應(yīng)期)7 d,適應(yīng)性喂養(yǎng)期間飼喂基礎(chǔ)日糧。試驗期間貓自由采食和飲水,不投喂其他食物,貓舍環(huán)境溫度維持在(28±1.8) ℃,濕度維持在(66±10)%。試驗期間每天觀察貓的行為和精神狀態(tài),若長時間出現(xiàn)精神萎靡、腹瀉或嘔吐等不良反應(yīng)則終止試驗。每天更換一次貓砂,保證貓舍環(huán)境潔凈,通風(fēng)良好。
表1 試驗分組
表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ),%)
1.3.1 體重、采食量和消化率測定
于試驗期的第0、42 天,對每只貓進(jìn)行稱重,比較貓的體重變化情況。于每日早上08:00 給每只貓投喂60 g 貓糧,第2 天記錄貓糧剩余量。投喂量減去剩余量即為日采食量,計算整個試驗期間的平均日采食量。于試驗結(jié)束前7 d,每日采集每只貓排便15 min內(nèi)的新鮮糞便,收集時需加入10%鹽酸固碳。將收集到的糞便干燥、粉碎后用于粗蛋白和粗脂肪表觀消化率的測定(酸不溶灰分法),計算公式如下:
1.3.2 飲水量測定
于每日早上09:00 給貓飲水器中加滿水,第2 天加水前記錄剩余水量,其差值即為飲水量。適應(yīng)期和試驗期均記錄每日每只貓的飲水量,并計算每周平均日飲水量,比較飲水量的變化情況。
1.3.3 血清制備及抗氧化指標(biāo)測定
于試驗期的第0、42 天,對每只試驗貓進(jìn)行前肢靜脈采血,將血液收集在促凝管中,4 ℃、3 500 r/min離心10 min,取上清液用于指標(biāo)測定。
血清總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量均使用試劑盒測定,所用試劑盒購于南京建成生物工程研究所有限公司。
1.3.4 炎性指標(biāo)測定
采用酶聯(lián)免疫分析試劑盒測定試驗貓血清中腫瘤壞死因子(TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量,所用試劑盒購于南京建成生物工程研究所有限公司。
試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2017初步整理后,采用SPSS 21.0軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)對不同處理組進(jìn)行顯著性檢驗,用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,P<0.05為差異顯著,結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
由表3 可以看出,貓糧中添加貓須草對貓體重、平均日采食量及粗蛋白和粗脂肪消化率均無顯著影響(P>0.05)。
表3 飼糧中添加貓須草粉對貓體重、采食量及消化率的影響
由表4 可以看出,適應(yīng)性喂養(yǎng)期間,各組間貓的平均日飲水量無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比,0.5%、1.0%和2.0%貓須草組試驗第5、6 周貓的平均日飲水量顯著提高(P<0.05)。
表4 飼糧中添加貓須草粉對貓平均日飲水量的影響(g/d)
由表5 可以看出,試驗第0 天,各組間T-SOD 活性和MDA 含量無明顯差異(P>0.05)。試驗第42 天,與對照組相比,0.5%、1.0%貓須草組貓血清中T-SOD活性顯著提高(P<0.05),0.5%、1.0%和2.0%貓須草組貓MDA含量顯著降低(P<0.05)。
表5 飼糧中添加貓須草粉對貓血清抗氧化能力的影響
由表6 可知,試驗第0 天,各組間貓血清IL-6 和TNF-α含量無顯著差異(P>0.05)。試驗第42 天,與對照組相比,1.0%貓須草組血清IL-6含量顯著降低(P<0.05),各組間血清TNF-α含量無顯著差異(P>0.05)。
表6 飼糧中添加貓須草粉對貓血清炎性指標(biāo)的影響
本試驗中,添加貓須草對貓體重和采食量無明顯影響,這與楊帆等[13]的研究結(jié)果一致,表明貓對貓須草中的成分無明顯的厭惡情緒。同時,添加貓須草對貓粗蛋白和粗脂肪的表觀消化率無顯著影響,表明貓須草對貓糧養(yǎng)分的消化利用無明顯影響。以上結(jié)果為貓須草在貓糧中的應(yīng)用提供了可行性。
貓須草是一種天然的利尿劑,而利尿是治療泌尿道結(jié)石的重要手段。黃榮桂等[14]早在1999年就發(fā)現(xiàn),貓須草可顯著提高尿結(jié)石患者的痊愈率和總體效率,并認(rèn)為貓須草是一種治療尿路結(jié)石的無毒副作用藥物;張杰群等[15]研究了貓須草提取物對三聚氰胺所致腎結(jié)石的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),貓須草提取物可有效減少小鼠腎臟中三聚氰胺的含量,并抑制結(jié)晶的形成,說明貓須草提取物對三聚氰胺腎結(jié)石具有很好的治療作用;Zhong等[16]研究發(fā)現(xiàn),貓須草中的多糖等成分能增加尿草酸和鈣離子的排泄,從而抑制大鼠草酸鈣結(jié)石的形成。而貓須草的抗結(jié)石機(jī)制與其利尿作用密切相關(guān),本試驗中,由于直接測定排尿量易造成貓的損傷,因此采用計算飲水量的方式,間接反映貓的排尿量。試驗結(jié)果顯示,采食0.5%、1.0%、2.0%貓須草5 周后,貓的飲水量顯著增加,推測貓須草的攝入增加了貓的排尿量,從而促進(jìn)了貓的飲水,證實(shí)了貓須草用于貓糧中輔助治療泌尿道結(jié)石的可能。楊帆等[13]發(fā)現(xiàn),采食1.0%貓須草2周后,貓飲水量顯著上升,這與本試驗有一定差異,原因可能與貓須草的來源及活性成分含量不同等因素相關(guān)。
貓須草富含黃酮、皂苷等多酚類物質(zhì),是一種天然的抗氧化劑。體外研究已證實(shí),貓須草中的活性成分具有良好的抗氧化能力[17]。郭銀雪等[18]和藍(lán)倫禮[19]在大鼠上的研究發(fā)現(xiàn),貓須草提取物能顯著提高體內(nèi)T-SOD 活性,降低MDA 含量,提高機(jī)體抗氧化能力。本試驗中,添加一定量的貓須草可顯著提高TSOD 活性,降低MDA 含量,這與以上研究結(jié)果一致,表明貓糧中添加貓須草亦能提高貓的抗氧化能力。
貓須草中含有的多酚、黃酮和萜類等化合物亦具有抗炎活性,可通過多種途徑抑制炎癥的發(fā)生。甘典輝等[20]報道,貓須草黃酮能降低大鼠血清TNF-α和白細(xì)胞介素-8的水平。龍春莉等[21]研究發(fā)現(xiàn),用貓須草配制的血尿消1 號可顯著降低血液中TNF-α和IL-6的水平。本試驗研究結(jié)果顯示,貓須草可顯著降低血清IL-6 的水平,表明貓糧中添加貓須草亦可在一定程度上緩解貓的炎癥反應(yīng)。
綜上所述,貓糧中添加一定量的貓須草不會對貓采食量和養(yǎng)分消化率帶來負(fù)面影響,能一定程度上提高貓的飲水量、抗氧化能力和抗炎能力。說明貓須草可在貓糧中使用,添加量為1.0%時飼喂效果較好。