楊丹嬌,張 敏,王俊偉,張 敏,劉怡雯,且華敏,田 維,趙光輝,葉忠明*,宋軍科*

(1.甘孜藏族自治州畜牧業(yè)科學(xué)研究所,四川康定 626000;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,陜西楊陵 712100;3.焦作市動物疫病預(yù)防控制中心,河南焦作 454003)

藏豬(Tibetan pig)主要分布在西藏、青海、云南、甘肅、四川甘孜州和阿壩州等海拔3 000 m以上的高山草地地區(qū)[1]。藏豬養(yǎng)殖多以散養(yǎng)放牧為主,且受養(yǎng)殖技術(shù)、飼養(yǎng)管理和疾病等因素的影響,藏豬養(yǎng)殖過程中疾病的發(fā)生率呈逐年上升趨勢[2]。對西藏林芝地區(qū)藏豬腸道寄生蟲感染情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)[3-4],藏豬存在線蟲、絳蟲、棘頭蟲、吸蟲、原蟲等寄生蟲感染,總感染率高達64.34%(460/715)。藏豬的寄生蟲感染可持續(xù)消耗豬營養(yǎng),造成豬營養(yǎng)不良、發(fā)育緩慢、降低飼料轉(zhuǎn)化率、增加養(yǎng)殖成本、降低養(yǎng)殖效益,感染還會引起繼發(fā)感染,嚴重者引起死亡,給當?shù)啬撩駧韲乐氐慕?jīng)濟損失[5]。藏豬養(yǎng)殖是甘孜州傳統(tǒng)優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)和農(nóng)民增收的支柱產(chǎn)業(yè),本文對甘孜州7個地區(qū)不同養(yǎng)殖場的藏豬新鮮糞便樣品中寄生蟲感染進行了調(diào)查,以期為當?shù)夭刎i寄生蟲病的有效防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 糞便樣本 2022年1月至2023年2月,共采集甘孜州7個地區(qū)藏豬養(yǎng)殖場176份新鮮藏豬糞便樣品(表1),其中腹瀉糞便68份, 非腹瀉糞便樣本108份。將采集到的新鮮糞便樣品逐一裝入干凈塑料袋內(nèi),詳細標注信息后立即帶回實驗室4℃保存?zhèn)錂z。

表1 臨床樣本信息

1.1.2 主要試劑 蒸餾水,實驗室自制;精制鹽,中鹽榆林鹽化有限公司產(chǎn)品。

1.1.3 主要儀器 改良麥克馬斯特計數(shù)板,河南農(nóng)業(yè)大學(xué)寄生蟲教研室提供;顯微鏡,重慶奧特光學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;立式壓力蒸汽滅菌器,上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品;冰箱,青島海爾股份有限公司產(chǎn)品;超純水制造儀,四川優(yōu)普超純科技有限公司產(chǎn)品;電磁爐,寧波奧克斯廚房電器有限公司產(chǎn)品;AUY220型電子天平,上海光學(xué)儀器一廠產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 飽和鹽水漂浮法 用潔凈玻璃棒挑取3～5 g藏豬糞便至50 mL離心管中,并加入適量飽和鹽水攪拌至勻漿狀,之后加飽和鹽水至50 mL,混勻后經(jīng)60目網(wǎng)篩過濾至燒杯中,倒入小玻璃瓶中,并確保液面微凸于瓶口且不溢出。靜置10 min,用載玻片輕觸糞液液面,翻轉(zhuǎn)載玻片并蓋上蓋玻片,于100×顯微鏡下進行鏡檢,仔細觀察蓋玻片覆蓋的所有區(qū)域,若發(fā)現(xiàn)卵囊/蟲卵,于400×顯微鏡下拍照記錄。

1.2.2 卵囊/蟲卵計數(shù)法 根據(jù)文獻[6]中報道的改良麥克馬斯特計數(shù)法統(tǒng)計每克糞便中的蟲卵數(shù)(eggs per gram,EPG)和卵囊數(shù)(oocysts per gram,OPG)。計算公式為:OPG/EPG=[(n1+n2)/(2×0.15)]×60/2,公式可簡化為OPG(EPG)=(n1+n2)/2×200。

1.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS 25.0軟件中的卡方(χ2)檢驗對不同因素下藏豬消化道寄生蟲的感染率進行統(tǒng)計學(xué)分析。P>0.05為差異不顯著;P<0.05為差異顯著;P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 藏豬消化道寄生蟲蟲卵/卵囊形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果

形態(tài)學(xué)鑒定發(fā)現(xiàn),樣本中有3種線蟲蟲卵和1種球蟲卵囊,分別為豬蛔蟲(Ascarissuum)蟲卵、豬毛尾線蟲(Trichurissuis)蟲卵、食道口線蟲(Oesophagostomumspp.)蟲卵和豬囊等孢球蟲(Cystoisosporasuis)卵囊。

2.2 甘孜州藏豬消化道寄生蟲感染情況

176份樣品中寄生蟲蟲卵/卵囊陽性率為75%(132/176),豬囊等孢球蟲卵囊陽性率為43.18%(76/176)、豬蛔蟲蟲卵為42.04%(74/176)、豬毛尾線蟲蟲卵為25.57%(45/176)、食道口線蟲蟲卵為5.11%(9/176)。不同地區(qū)藏豬糞便中消化道寄生蟲蟲卵/卵囊的陽性率差異顯著(P<0.05)(表2)。

表2 不同地區(qū)消化道寄生蟲感染情況

2.3 腹瀉和非腹瀉藏豬糞便樣品中寄生蟲感染情況

腹瀉糞便樣本寄生蟲感染率為80.88%(55/68),顯著高于健康糞便寄生蟲感染率71.29%(77/108)(P<0.05)。豬囊等孢球蟲卵囊在健康豬糞便樣本中感染率52.78%(57/108),極顯著高于腹瀉豬糞便樣本27.64%(19/68)(P<0.01),而豬毛尾線蟲蟲卵在腹瀉糞便樣本中感染率35.29%(24/68),顯著高于健康豬糞便19.44%(21/108)(P<0.05),但蛔蟲蟲卵和食道口線蟲蟲卵在健康豬糞便樣本中感染率與腹瀉糞便樣本中感染率差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 腹瀉和非腹瀉藏豬糞便中寄生蟲感染情況

2.4 不同飼養(yǎng)模式藏豬消化道寄生蟲感染情況

放牧藏豬感染率85.06%(74/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬65.17%(58/89)(P<0.05)。放牧藏豬糞便樣本中豬囊等孢球蟲卵囊感染率70.11%(61/87),極顯著高于圈養(yǎng)16.85%(15/89)(P<0.01),放牧藏豬糞便中食道口線蟲蟲卵感染率9.2%(8/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬1.12%(1/89)(P<0.05),但豬蛔蟲蟲卵和豬毛尾線蟲蟲卵在放牧和圈養(yǎng)藏豬糞便中的差異不顯著(P>0.05)(表4)。

表4 不同飼養(yǎng)模式藏豬消化道寄生蟲感染情況

3 討論

甘孜州藏豬養(yǎng)殖主要以放牧為主,圈養(yǎng)藏豬養(yǎng)殖技術(shù)落后,其中消化道寄生蟲病是藏豬最常見的疫病之一[7]。調(diào)查發(fā)現(xiàn),甘孜州部分地區(qū)藏豬消化道寄生蟲總感染率為75%,高于文獻[3]調(diào)查的感染率(64.34%),低于文獻[8-9]的調(diào)查結(jié)果(83.3%)。同時,甘孜州各地區(qū)之間消化道寄生蟲感染差異顯著(P<0.05),可能因各地區(qū)的氣候條件、飼養(yǎng)管理水平和驅(qū)蟲情況不同有相關(guān)。

寄生蟲是引起豬腹瀉的主要病原之一,寄生蟲主要導(dǎo)致腸上皮細胞壞死、脫落、腸黏膜形成異物并引起腹瀉[10]。本研究中腹瀉糞便樣本寄生蟲感染率為80.88%(55/68),顯著高于非腹瀉糞便樣本寄生蟲感染率71.29%(77/108)(P<0.05),藏豬雖然具有很強的抗病力和抗應(yīng)激能力[11],但寄生蟲感染易引起藏豬腹瀉,降低豬的抵抗力。甘孜州地處青藏高原,氣溫較低,寒冷和惡劣的環(huán)境可能是影響病原體傳播和感染的一個因素[11-13]。

前期報道發(fā)現(xiàn),不同飼養(yǎng)模式下藏豬消化道道寄生蟲感染情況不同,放牧養(yǎng)殖模式消化道寄生蟲感染種類、感染率與感染強度多于圈養(yǎng)豬群[3]。本次研究發(fā)現(xiàn),放牧藏豬糞便樣本寄生蟲感染率85.06%(74/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬糞便樣本寄生蟲感染率65.17%(58/89)(P<0.05),與西藏林芝地區(qū)放牧藏豬寄生蟲感染率顯著高于圈養(yǎng)結(jié)果一致。在甘孜州,藏豬、牦牛、藏羊混養(yǎng)放牧且密切接觸,致使放牧養(yǎng)殖藏豬寄生蟲感染率偏高[14]。