廖崇皓,徐岸楠,李世瑤,肖宗麗

(重慶市開(kāi)州區(qū)人民醫(yī)院新生兒科,重慶 405400)

新生兒膿毒癥是新生兒期細(xì)菌感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征,若不及時(shí)治療可進(jìn)展為多器官衰竭甚至死亡[1-2]。據(jù)統(tǒng)計(jì),新生兒膿毒癥全球發(fā)病率為2202/10萬(wàn)活產(chǎn)兒,病死率為11%～19%[3-4]。受產(chǎn)后醫(yī)院或社區(qū)環(huán)境暴露時(shí)間、免疫接種量、嬰兒免疫狀態(tài)和致病微生物毒力等因素影響,新生兒膿毒癥病情嚴(yán)重程度從亞臨床感染到局灶性或全身性疾病輕重不一,預(yù)后也不盡相同。識(shí)別潛在的預(yù)后生物學(xué)標(biāo)志物,有助于對(duì)膿毒癥新生兒進(jìn)行危險(xiǎn)分層和個(gè)體化治療,提高膿毒癥新生兒的整體管理水平,改善患兒預(yù)后。殼多糖酶3樣蛋白1(Chitosinase 3-like protein 1,CHI3L1)是一種幾丁質(zhì)結(jié)合凝集素,屬于糖苷水解酶家族18成員,在感染和全身炎癥反應(yīng)下,可由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞產(chǎn)生并參與炎癥反應(yīng),與炎癥性疾病密切相關(guān)[5]。幾丁質(zhì)酶1(Chitinase 1,CHIT1)是一種先天性免疫介質(zhì),主要表達(dá)于分化和極化的巨噬細(xì)胞中并參與巨噬細(xì)胞分化和活化,在感染、炎癥反應(yīng)性疾病中發(fā)揮重要作用[6]。目前,關(guān)于CHI3L1和CHIT1與新生兒膿毒癥關(guān)系的研究較少。因此,本研究探討膿毒癥新生兒血清CHI3L1和CHIT1表達(dá)水平及其臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年3月至2023年3月我院新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房收治的新生兒膿毒癥95例為膿毒癥組,其中男性57例,女性38例;日齡1～6 d,平均(4.29±1.13)d;體重2763～3715 g,平均(3151.79±209.58)g;胎齡37～42周,平均(39.21±1.05)周。病例納入標(biāo)準(zhǔn):具有典型臨床特征(發(fā)熱、神經(jīng)狀態(tài)改變、進(jìn)食減少等),病原學(xué)培養(yǎng)陽(yáng)性,符合《新生兒敗血癥診療方案》[7]診斷標(biāo)準(zhǔn);日齡0～30 d;監(jiān)護(hù)人知情并同意本研究。排除標(biāo)準(zhǔn):先天性代謝異常;染色體異常;免疫缺陷。另選取年齡、性別相匹配的健康新生兒65例為對(duì)照組,其中男性40例,女性25例;日齡1～6 d,平均(4.16±1.26)d;體重2785～3769 g,平均(3201.86±208.63)g;胎齡38～42周,平均(39.59±1.12)周。膿毒癥組和對(duì)照組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 生化指標(biāo)檢測(cè):所有患兒入組后次日晨采集外周靜脈血檢測(cè)血常規(guī)(白細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù))、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、降鈣素原(PCT)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、CHI3L1和CHIT1。血常規(guī)采用UniCel DxH 600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢查。TNF-α、IL-4、CHI3L1和CHIT1采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定,試劑盒(貨號(hào):ml077385、ml058093、ml058707、ml026109)購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。PCT采用Access 2電化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)。CRP采用DxC 800全自動(dòng)生化儀系統(tǒng)應(yīng)用速率散射免疫比濁法檢測(cè)。對(duì)照組僅檢測(cè)血清CHI3L1、CHIT1水平。

1.2.2 預(yù)后情況:記錄所有膿毒癥新生兒住院期間存活情況,根據(jù)存活情況分為病死組和存活組。

2 結(jié) 果

2.1 膿毒癥組與對(duì)照組血清CHI3L1、CHIT1水平比較 見(jiàn)表1。膿毒癥組血清CHI3L1、CHIT1水平高于對(duì)照組(均P<0.05)。

表1 膿毒癥組與對(duì)照組血清CHI3L1、CHIT1水平比較(ng/ml)

2.2 不同病情嚴(yán)重程度患兒生化指標(biāo)比較 見(jiàn)表2。根據(jù)膿毒癥病情嚴(yán)重程度將患兒分為嚴(yán)重膿毒癥組(60例)和膿毒癥休克組(35例)。膿毒癥休克定義為膿毒癥發(fā)病后出現(xiàn)持續(xù)性低血壓,需用血管活性藥維持平均動(dòng)脈壓在65 mmHg及以上[8]。膿毒癥休克組血清CHI3L1和CHIT1水平、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-4、PCT、CRP高于嚴(yán)重膿毒癥組(均P<0.05)。

表2 不同病情嚴(yán)重程度患兒生化指標(biāo)比較

2.3 膿毒癥患兒血清CHI3L1、CHIT1水平與其他生化指標(biāo)相關(guān)性分析 見(jiàn)表3。膿毒癥患兒血清CHI3L1、CHIT1水平與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-4、PCT及CRP呈正相關(guān)(均P<0.05)。

表3 膿毒癥患兒血清CHI3L1、CHIT1水平與其他生化指標(biāo)的相關(guān)性

2.4 不同預(yù)后患兒血清CHI3L1、CHIT1水平比較 見(jiàn)表4。95例膿毒癥新生兒中病死15例,病死率15.79%。病死組血清CHI3L1、CHIT1水平高于存活組(均P<0.05)。

表4 不同預(yù)后患兒血清CHI3L1、CHIT1水平比較(ng/ml)

2.5 血清CHI3L1、CHIT1水平對(duì)膿毒癥患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 見(jiàn)表5。血清CHI3L1、CHIT1水平對(duì)膿毒癥患兒預(yù)后均有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值,且兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)價(jià)值更高(Z=2.373、2.491,均P<0.05)。

表5 血清CHI3L1、CHIT1水平對(duì)膿毒癥患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討 論

膿毒癥是導(dǎo)致新生兒殘疾和病死的主要原因之一,由于新生兒自身免疫功能發(fā)育尚不成熟,病情往往較成人嚴(yán)重,極易導(dǎo)致危及生命的器官功能障礙[9-10]。因此,尋找高效敏感的生物學(xué)標(biāo)志物作為新生兒膿毒癥不良預(yù)后的早期預(yù)警指標(biāo),對(duì)病情監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷均十分重要[11]。炎癥反應(yīng)在新生兒膿毒癥的發(fā)病機(jī)制中扮演重要角色。細(xì)菌釋放的產(chǎn)物,如脂質(zhì)膽酸和細(xì)菌脂多糖以及缺血再灌注后受損細(xì)胞釋放的產(chǎn)物,激活Toll樣受體4信號(hào)通路,促使吞噬細(xì)胞產(chǎn)生多種促炎因子,誘導(dǎo)機(jī)體級(jí)聯(lián)反應(yīng),導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征和多臟器損害[12-15]。

CHI3L1由巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生,感染和炎癥刺激可促使CHI3L1的產(chǎn)生。CHI3L1能增強(qiáng)細(xì)菌對(duì)上皮細(xì)胞的黏附和入侵,并促使輔助性T細(xì)胞2(Th2)活化,上調(diào)Th2細(xì)胞因子的表達(dá),誘導(dǎo)和加劇炎癥反應(yīng)[16]。因此,CHI3L1被認(rèn)為是感染和炎癥性疾病的標(biāo)志物。研究[17]顯示,新型冠狀病毒感染患者血清CHI3L1水平明顯增高,病死患者血清CHI3L1水平高于存活患者,CHI3L1水平可獨(dú)立預(yù)測(cè)新型冠狀病毒感染患者臨床結(jié)局。哮喘患者血清CHI3L1水平顯著高于正常組,且隨病情嚴(yán)重程度和急性加重而升高[18]。膿毒癥小鼠模型中也發(fā)現(xiàn)CHI3L1表達(dá)顯著增高,通過(guò)沉默CHI3L1可降低血清TNF-α、IL-1β、干擾素-γ、IL-10和IL-6的水平[19]。本研究發(fā)現(xiàn),膿毒癥新生兒血清CHI3L1水平顯著升高,且膿毒癥休克組更高,CHI3L1水平與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-4、PCT、CRP呈正相關(guān),病死組血清CHI3L1水平高于存活組,表明血清CHI3L1水平升高與膿毒癥新生兒機(jī)體炎癥反應(yīng)水平增高以及病情嚴(yán)重程度有關(guān)。CHI3L1參與新生兒膿毒癥的機(jī)制尚不清楚。既往研究[20-21]發(fā)現(xiàn),膿毒癥患者外周血Th2水平明顯升高,在病死患者中可觀察到Th1向Th2偏移,嚴(yán)重膿毒癥患者入院時(shí)Th2/Th1比值、Th2細(xì)胞占比高于健康對(duì)照組和無(wú)嚴(yán)重膿毒癥的危重患者,病死患者Th2/Th1比值高于存活者,可見(jiàn)Th2主導(dǎo)的炎癥反應(yīng)與膿毒癥發(fā)生和進(jìn)展有關(guān)。研究[22]發(fā)現(xiàn),CHI3L1在活化的T細(xì)胞尤其在Th2細(xì)胞中升高,作為Th2炎癥的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,CHI3L1過(guò)表達(dá)可促使Th2細(xì)胞活化和炎癥反應(yīng)。由此推測(cè)在膿毒癥感染過(guò)程中,CHI3L1可能通過(guò)Th2免疫應(yīng)答誘導(dǎo)Th2炎癥反應(yīng),導(dǎo)致膿毒癥新生兒全身炎癥反應(yīng)、病情進(jìn)展和院內(nèi)不良結(jié)局的發(fā)生。

CHIT1是結(jié)合和降解幾丁質(zhì)的活性酶,在中性粒細(xì)胞、成熟單核細(xì)胞來(lái)源的巨噬細(xì)胞、肺巨噬細(xì)胞和其他特定組織巨噬細(xì)胞亞群以及肺和腸上皮細(xì)胞中表達(dá),參與機(jī)體免疫炎癥反應(yīng),與炎癥、感染、組織損傷和重塑過(guò)程有關(guān)。CHIT1在Toll樣受體信號(hào)通路激活后經(jīng)巨噬細(xì)胞釋放至體液和外周血液中,血清CHIT1水平在肺纖維化、支氣管哮喘、慢性阻塞性肺病和肺部感染中升高,被用于監(jiān)測(cè)病情進(jìn)展或治療效果評(píng)估[23]。本研究發(fā)現(xiàn),膿毒癥新生兒血清CHIT1水平也顯著升高,且血清CHIT1水平與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-4、PCT、CRP水平呈正相關(guān),病死組血清CHIT1水平高于存活組,表明CHIT1水平增高與新生兒膿毒癥病情加重、不良結(jié)局有關(guān)。巨噬細(xì)胞是先天免疫和適應(yīng)性免疫的重要組成部分。對(duì)于特定組織微環(huán)境變化,巨噬細(xì)胞M1極化可釋放大量促炎介質(zhì)(如IL-1β、IL-12、IL-6和TNF-α等),而M2極化則釋放大量抗炎介質(zhì),M1/M2極化失衡可誘導(dǎo)膿毒癥的發(fā)生,加快病情進(jìn)展[24-25]。CHIT1作為巨噬細(xì)胞分化和活化的效應(yīng)分子,可募集單核細(xì)胞源性巨噬細(xì)胞并促使M1極化,加劇全身炎癥反應(yīng),促使新生兒膿毒癥病情惡化,與不良預(yù)后有關(guān)[26]。此外,本研究發(fā)現(xiàn),血清CHI3L1、CHIT1對(duì)新生兒膿毒癥預(yù)后有預(yù)測(cè)價(jià)值,且兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)價(jià)值更高,表明聯(lián)合檢測(cè)血清CHI3L1和CHIT1水平有助于識(shí)別高?；純旱牟涣碱A(yù)后。

綜上所述,膿毒癥新生兒血清CHI3L1和CHIT1水平升高,與病情嚴(yán)重程度及不良預(yù)后有關(guān),兩者聯(lián)合對(duì)膿毒癥新生兒的預(yù)后預(yù)測(cè)價(jià)值更高。