葉 瑋

（福建省福州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建 福州 350001）

鴿新城疫是由鴿型Ⅰ型副粘病毒引起的一種高接觸性傳染病[1]，通過呼吸道和消化道傳播，發(fā)病率和死亡率均很高。近年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，肉鴿養(yǎng)殖量迅速增長，肉鴿感染新城疫也時(shí)有發(fā)生，并呈不斷擴(kuò)散蔓延的趨勢(shì)。本文詳細(xì)闡述了福州郊區(qū)某肉鴿場發(fā)生新城疫的發(fā)病情況、臨床癥狀、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室診斷及治療效果，并進(jìn)行了分析總結(jié)，供廣大養(yǎng)殖戶和研究人員參考。

1 發(fā)病情況

福州郊區(qū)幾家肉鴿場相繼創(chuàng)辦，肉鴿場之間的地理位置相距較近。創(chuàng)辦初期，肉鴿生長繁殖均屬正常，未發(fā)現(xiàn)疫病流行，也未進(jìn)行新城疫疫苗常規(guī)免疫。某肉鴿場飼養(yǎng)肉鴿3 000 羽左右，屬自繁自養(yǎng)。2022 年3 月下旬，該場發(fā)現(xiàn)乳鴿開始發(fā)病，隨后母鴿和其它成年鴿也開始發(fā)病，成年鴿死亡1 000 羽左右，剛出殼的乳鴿死亡150羽，處于孵化期的種蛋全部死亡。4 月份，附近肉鴿場也開始發(fā)病。

2 臨床癥狀

幼鴿快速死亡，成年鴿呈急性死亡或亞急性和慢性病程。病鴿的主要癥狀是多數(shù)出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，有的頭頸歪斜，有的頭頸下垂擱于地上，有的脖子扭曲、仰頭呈觀星姿勢(shì)，排綠色或黃白色稀糞，直至死亡（圖1）。有的病鴿起初飲水增加，但食欲減少，精神萎頓，羽毛蓬亂，腹瀉，排綠色或黃白色水樣稀糞，病鴿肛門附近羽毛常有糞便相粘連。有的病鴿出現(xiàn)呼吸困難，口腔、鼻腔有粘液，嗉囊有積液或積食，精神狀態(tài)萎頓。

圖1 病鴿臨床癥狀

3 病理剖檢

成年鴿消化道有大量充血出血，十二指腸、空腸、回腸、直腸和泄殖腔多呈出血點(diǎn)和卡他性炎癥變化，腺胃、肌胃有大量小出血點(diǎn)，脾臟淤血，肝腫大、淤血，腎腫大（圖2），心臟表面脂肪及心內(nèi)外膜常有不同程度的出血，腦膜充血，腦組織水腫，喉氣管有輕度充血、出血和炎性分泌物。幼鴿大部分皮下和肌間組織有淡黃色，膠凍樣物質(zhì)，頸部皮膚出血，有的腺胃、肌胃內(nèi)有出血點(diǎn)，腸道充血、出血和炎性分泌物。

圖2 病鴿剖檢臟器出血

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 病原診斷

4.1.1 病毒分離與鑒定 在發(fā)病鴿群中選取病變明顯的死鴿的腦、脾、腎組織進(jìn)行混合研磨后，用生理鹽水制成10 倍的稀釋懸液，離心取上清液，無菌處理，取0.2 mL 上清液接種于9 日齡的雞胚絨毛尿囊腔內(nèi)，連續(xù)孵化3 d，無菌方法收取第一代尿囊液，以第一代尿囊液按上述的劑量和方法進(jìn)行第二次、第三次接種，分別取上述第一二三代尿囊夜進(jìn)行微量血凝試驗(yàn)（HA）。

4.1.2 血凝試驗(yàn) 在96 孔Ⅴ型微量反應(yīng)板的1～12 孔均加入25 μL 的生理鹽水，用微量移液槍吸取25 μL 尿囊夜加入第一孔，混勻，再從第一孔倍比稀釋至第 11 孔，從第 11 孔棄去25 μL；每孔加入25 μL 生理鹽水，再加入25 μL l%雞紅細(xì)胞懸液，振蕩混勻，室溫30 min 后觀察結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果顯示，第一代和第二代的尿囊液沒有出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，第三代尿囊液的凝集效價(jià)大于4 log2。

4.1.3 血凝抑制試驗(yàn) 再將上述凝集效價(jià)≥4 log2 的尿囊懸液用新城疫標(biāo)準(zhǔn)陽性血清進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)（HⅠ）。先配制成4 單位混懸液，然后在微量反應(yīng)板上的第1～11 孔加入25 μL 生理鹽水，第12 孔加入50 μL 生理鹽水，吸取25 μL標(biāo)準(zhǔn)陽性血清加入第1 孔，逐一倍比稀釋至第10孔，從第10 孔吸取25 μL 棄去。第1～11 孔均加入25 μL 的4 HAU 混懸液，室溫靜置30 min，接著每孔加入25 μL 的1%雞紅細(xì)胞懸液，振蕩混勻，室溫靜置40 min 后判定。HⅠ實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示陽性。

4.1.4 熒光RT-PCR 通過病毒RNA 提取和熒光RT-PCR 擴(kuò)增，結(jié)果顯示Ct 值≤35，且出現(xiàn)S 型擴(kuò)增曲線，判定為新城疫陽性。

4.2 血清學(xué)診斷 在感染疾病的成年鴿群中，抽取20 份鴿子的血液，分離血清，進(jìn)行新城疫血凝抑制實(shí)驗(yàn)（HAⅠ），按照4.1.2 和4.1.3 方法操作。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示新城疫抗體滴度分布在2～10 log2 之間（表1），抗體滴度的離散度大。

表1 新城疫抗體滴度 （份、log2）

5 確診

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室診斷可以確診該肉鴿場發(fā)生鴿新城疫。

6 治療措施

緊急注射新城疫Ⅰ系疫苗，之后的兩周內(nèi)死亡800 余羽肉鴿，存活1 000 羽左右。在整個(gè)發(fā)病過程，共死亡 2 000 余羽肉鴿，占全群66.7%。剩余的母鴿康復(fù)之后陸續(xù)產(chǎn)蛋，孵出的幼鴿生長正常。

7 討論與分析

（1）鴿新城疫是危害養(yǎng)鴿業(yè)的重要疫病，發(fā)病廣泛，不同日齡的鴿均可發(fā)病，而且鴿群感染了新城疫病毒后易于繼發(fā)感染其它病原體，如大腸桿菌、沙門氏菌等[2]，造成較高的發(fā)病率和死亡率，給養(yǎng)鴿業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。對(duì)于鴿新城疫的防控，以“預(yù)防為主，養(yǎng)防結(jié)合”為原則，加強(qiáng)生物安全和飼養(yǎng)管理。鴿場應(yīng)采取封閉管理模式，避免外界傳染源被進(jìn)出人員或車輛帶入場區(qū)，進(jìn)出口處設(shè)置消毒措施，工作人員以及車輛均要先經(jīng)過系統(tǒng)且徹底的消毒，才能進(jìn)出場區(qū)。另外定期清理、消毒場區(qū)環(huán)境內(nèi)部衛(wèi)生，保證濕度、溫度適宜。引進(jìn)種鴿時(shí)，需采取嚴(yán)格的檢驗(yàn)和隔離措施，確保鴿群健康且不攜帶病毒后方可混群飼養(yǎng)，養(yǎng)鴿區(qū)域禁止飼喂其他禽類及狗貓等哺乳動(dòng)物。

（2）強(qiáng)化新城疫疫苗接種，并定期監(jiān)測鴿群抗體水平。在實(shí)際制定免疫程序的過程中，應(yīng)該依據(jù)場區(qū)自身規(guī)模、飼養(yǎng)方式的情況，以及鴿群年齡、母源抗體水平等[3]，制定相應(yīng)免疫程序，避免照搬其他養(yǎng)殖場的免疫程序，確保免疫程序的合理性、科學(xué)性以及有效性。

（3）應(yīng)正確操作和使用疫苗，確保免疫的有效性。鴿新城疫目前尚無特效治療藥物，故鴿場必須進(jìn)行新城疫疫苗的預(yù)防接種，以新城疫滅活苗和活苗免疫為主[4]。常見的疫苗包括以下4種：首先是Ⅰ系疫苗，該疫苗毒力適中，可保證接種雞在短時(shí)間內(nèi)對(duì)疫病產(chǎn)生一定免疫力，而且免疫抗體時(shí)間相對(duì)較長，通常能夠達(dá)到1 年。但是該疫苗僅適用于2 月齡以上或是接種過疫苗的雞群，注射方式為皮下注射、肌肉注射。少數(shù)種鴿會(huì)在接種疫苗后出現(xiàn)產(chǎn)蛋質(zhì)量下降或食欲減弱的反應(yīng)，因此狀況較差的鴿和幼鴿均不得接種該疫苗。其次是ⅠⅠ系疫苗，該疫苗毒力偏弱，產(chǎn)生免疫力較慢，接種對(duì)象以未達(dá)到1 月齡的幼鴿為主，可采用點(diǎn)眼滴鼻方式。然后是ⅠⅤ系疫苗，該疫苗免疫性、安全性均良好，可使用于多種年齡，接種方法較為多樣，包括飲水、滴鼻、點(diǎn)眼或肌注。最后一種是新城疫滅活苗，免疫期長，安全性好，可皮下注射或肌肉注射。至于使用哪種疫苗和何時(shí)免疫要根據(jù)鴿場的狀況和抗體水平來定[5]，不能一概而論。疫苗作為生物制品對(duì)于儲(chǔ)存環(huán)境的溫度條件有著嚴(yán)格的要求，凍干疫苗通常需要在 -15 °C 條件下保存，油苗則多保存在0～4 °C 的環(huán)境中。而且疫苗在稀釋之后，需要在2 h 內(nèi)使用完畢，2 h 之后尚未使用的部分應(yīng)做廢。正確進(jìn)行免疫操作也是至關(guān)重要，不同免疫接種方法有著不同的操作要求，為保障免疫的有效性，需要根據(jù)實(shí)際選擇合適的免疫方法，并進(jìn)行規(guī)范的免疫操作。

接種疫苗前，可將鴿群飲用水改為電解多維水，以免接種時(shí)出現(xiàn)應(yīng)激等情況。接種疫苗后通常在日糧中加入適量維生素，可使接種鴿的免疫系統(tǒng)以及抗應(yīng)激能力得到提高。