祝丹，李娟，周潔，殷毓，吳志洪

(江蘇省農(nóng)用激素工程技術(shù)研究中心有限公司，江蘇 常州 213022)

砜嘧磺隆(rimsulfuron)是由美國(guó)杜邦公司開(kāi)發(fā)的廣譜、高效、低毒磺酰脲除草劑，為乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制劑[1]，可有效防除玉米田中大多數(shù)一年生雜草，如田薊、鐵荸薺、香附子、野燕麥、馬唐等，芽前施藥效果好；防除多年生雜草在芽后早期、2～5 葉期施藥效果最好[2]。碘甲磺隆鈉鹽(iodosulfuron-methyl-sidium)和噻酮磺隆(thiencarbazonemethyl)是由德國(guó)拜耳作物科學(xué)有限公司開(kāi)發(fā)的磺酰脲類(lèi)除草劑，環(huán)丙磺酰胺(cyprosulfamide)是由其開(kāi)發(fā)的新型除草劑安全劑。碘甲磺隆鈉鹽主要用于防除闊葉雜草如豬殃殃和母菊等，以及部分禾本科雜草如風(fēng)草等[3-4]；噻酮磺隆主要用于防除闊葉雜草，在玉米田可與其他除草劑和安全劑混用[5-6]；環(huán)丙磺酰胺適用于玉米、水稻等谷類(lèi)，允許在任何土壤中使用，能促進(jìn)根系的生長(zhǎng)和保護(hù)植物健康[7]。

江蘇省農(nóng)用激素工程技術(shù)研究中心有限公司將上述幾種成分配制成新型的復(fù)配除草劑，在推薦使用劑量下，對(duì)玉米田一年生和多年生禾本科雜草及闊葉雜草有良好的防除效果；該制劑中加入安全劑環(huán)丙磺酰胺，作為玉米田除草劑的專(zhuān)用解毒劑，顯著提高了玉米降解除草劑速度，防護(hù)效果顯著[8]。目前，僅有砜嘧磺隆等部分單劑成分的分析方法報(bào)道[9-10]，未見(jiàn)任何復(fù)配劑型檢測(cè)方法的報(bào)道?；诖?，本文采用高效液相色譜法開(kāi)展了52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺水分散粒劑的分析方法研究，旨在為該產(chǎn)品生產(chǎn)和質(zhì)量控制提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 儀器

Agilent 1260 HPLC 型高效液相色譜儀配紫外檢測(cè)器(美國(guó)安捷倫科技有限公司)；TGL-16C 高速離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))；SK5200HP 超聲振蕩器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)；MS205DU/A電子天平(梅特勒-托利多貿(mào)易有限公司)。

1.2 藥劑和試劑

甲醇(99.9%)、乙腈(99.9%)(TEDIA)，色譜級(jí)；超純水(自制)；磷酸(85%，上海麥克林生化科技股份有限公司)，色譜級(jí)；砜嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品(≥99.1%) 、 噻酮磺隆標(biāo)準(zhǔn)品( ≥99.0%)(Chem service)；碘甲磺隆鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品(≥91.8%)、環(huán)丙磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品(≥99.5%)(Dr. Ehrenstorfer)；52%砜嘧·碘甲鈉鹽·噻酮·環(huán)丙磺酰胺WG(江蘇省農(nóng)用激素工程技術(shù)研究中心有限公司)。

1.3 色譜條件

Eclipse plus C18不銹鋼柱色譜柱為150 mm×4.6 mm(i.d.)，內(nèi)裝粒徑3.5 μm 填充物；流動(dòng)相：甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%磷酸水(C)(表1)；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm；進(jìn)樣體積：5 μL。在上述色譜條件下，噻酮磺隆、環(huán)丙磺酰胺、砜嘧磺隆和碘甲磺隆鈉鹽的保留時(shí)間約為12.9、14.4、19.5、27.1 min。圖1 為52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺WG 典型色譜圖。

圖1 52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺WG 樣品的高效液相色譜圖

表1 梯度洗脫程序

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別稱(chēng)取碘甲磺隆鈉鹽標(biāo)樣0.016 g、噻酮磺隆標(biāo)樣0.129 g、砜嘧磺隆標(biāo)樣0.125 g、環(huán)丙磺酰胺標(biāo)樣0.250 g(均精確至0.000 2 g)于100 mL 容量瓶中，加流動(dòng)相超聲溶解并稀釋至刻度，過(guò)濾搖勻備用。

1.4.2 試樣標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取試樣1.000 g (精確至0.000 2 g)，于100 mL 容量瓶中，加流動(dòng)相超聲溶解并稀釋至刻度，過(guò)濾搖勻備用。

1.4.3 樣品測(cè)定

在上述色譜條件下，待基線(xiàn)穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值，直至相鄰2針?lè)迕娣e變化小于0.5%時(shí)，按標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

1.4.4 計(jì)算

將測(cè)得的2 針試樣溶液及試樣前后2 針標(biāo)樣溶液中砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆和環(huán)丙磺酰胺的峰面積進(jìn)行平均，試樣中砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆和環(huán)丙磺酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)按式(1)計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中碘甲磺隆鈉鹽(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/環(huán)丙磺酰胺)峰面積的平均值；A2為試樣溶液中碘甲磺隆鈉鹽(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/環(huán)丙磺酰胺)峰面積的平均值；m1為碘甲磺隆鈉鹽(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/環(huán)丙磺酰胺)標(biāo)樣的質(zhì)量(g)；m2為試樣的質(zhì)量(g)；P為標(biāo)準(zhǔn)品中碘甲磺隆鈉鹽(或噻酮磺隆/砜嘧磺隆/環(huán)丙磺酰胺)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

分別對(duì)砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆和環(huán)丙磺酰胺進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描，得到最大吸收波長(zhǎng)分別在254、228 nm。綜合考慮各有效成分及安全劑的質(zhì)量比，選擇250 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)，此時(shí)各成分有較強(qiáng)的吸收，流動(dòng)相無(wú)吸收且助劑紫外吸收較弱。

2.2 流動(dòng)相的選擇

在對(duì)52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺WG 各成分檢測(cè)分析中，通過(guò)不斷調(diào)整流動(dòng)相中甲醇、乙腈和0.1%磷酸水的配制比例，觀(guān)察峰型變化和保留時(shí)間，依次進(jìn)行篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)流動(dòng)相為表1 中梯度洗脫程序時(shí)，分離效果最佳，色譜峰峰形尖銳，出峰時(shí)間合理，滿(mǎn)足分析要求。

2.3 線(xiàn)性相關(guān)性測(cè)定

分別配制不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照1.3 節(jié)色譜測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、以峰面積為縱坐標(biāo)繪制曲線(xiàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)待測(cè)各成分的質(zhì)量濃度與其響應(yīng)值之間呈現(xiàn)出良好的線(xiàn)性關(guān)系，即，砜嘧磺隆質(zhì)量濃度在89.91～164.30 mg/L之間，回歸方程為y=5.469 4x-7.612 3，相關(guān)系數(shù)為0.999 5；碘甲磺隆鈉鹽質(zhì)量濃度在15.23～35.30 mg/L之間，回歸方程為y=8.816 3x-3.779 3，相關(guān)系數(shù)為0.999 6；噻酮磺隆質(zhì)量濃度在88.42～159.64 mg/L 之間，回歸方程為y=5.897 9x+68.193，相關(guān)系數(shù)為0.999 5；環(huán)丙磺酰胺質(zhì)量濃度在158.62～317.53 mg/L之間，回歸方程為y=4.2405x-135.16，相關(guān)系數(shù)為0.999 7。

2.4 準(zhǔn)確度的測(cè)定

在已知含量的52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺WG 中，分別加入一定量的砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆和環(huán)丙磺酰胺標(biāo)樣，按1.3 節(jié)色譜測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算平均回收率，結(jié)果見(jiàn)表2?？梢?jiàn)，平均回收率為99.52%～99.91%，說(shuō)明測(cè)量結(jié)果與真實(shí)值之間一致程度高，準(zhǔn)確度較高。

表2 準(zhǔn)確度測(cè)定

2.5 精密度的測(cè)定

將各樣品在1.3節(jié)色譜測(cè)定條件下平行測(cè)定5次，結(jié)果見(jiàn)表3。砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆和環(huán)丙磺酰胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.04、0.01、0.04和0.03，變異系數(shù)分別為0.32%、0.69%、0.28%和0.12%。多次重復(fù)測(cè)定同一量時(shí)各測(cè)定值之間彼此相符合的程度較高、隨機(jī)誤差較小。

表3 精密度測(cè)定

3 結(jié)論

本文建立了可以同時(shí)檢測(cè)52%砜嘧磺隆·碘甲磺隆鈉鹽·噻酮磺隆·環(huán)丙磺酰胺WG 中有效成分砜嘧磺隆、碘甲磺隆鈉鹽、噻酮磺隆及安全劑環(huán)丙磺酰胺的高效液相色譜分析方法，具有線(xiàn)性關(guān)系良好、準(zhǔn)確度和精密度高且簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確、分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，可用于該復(fù)配劑型的快速準(zhǔn)確質(zhì)量控制檢測(cè)。