張鈺祺 易徐航 顏干明 嚴(yán)軍 聶斌 龔千鋒 （.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 0004；.萍鄉(xiāng)市綜合檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證院 江西 萍鄉(xiāng) 7000；.江西古漢精制中藥飲片有限公司 南昌 0000）

沒(méi)藥為橄欖科植物地丁樹(shù)Commiphora myrrha Engl.或哈地丁樹(shù)Commiphora molmol Engl.的干燥樹(shù)脂，分為天然沒(méi)藥和膠質(zhì)沒(méi)藥，始載于宋代《開(kāi)寶本草》，性平，具有活血止痛﹑消腫生肌的功能［1］。沒(méi)藥應(yīng)用廣泛，藥用歷史悠久，主產(chǎn)于埃塞俄比亞﹑肯尼亞﹑索馬里等地，我國(guó)長(zhǎng)期依賴于進(jìn)口［2］。原沒(méi)藥由于產(chǎn)地和采收等因素，本身帶有大量的泥沙和樹(shù)皮，潔凈度極低且大小不一，需要經(jīng)過(guò)破碎﹑暴露雜質(zhì)﹑挑去雜質(zhì)﹑大小分檔等一系列凈制工藝流程后才能進(jìn)行下一步的炮制和入藥。但由于現(xiàn)行的藥品標(biāo)準(zhǔn)中，沒(méi)藥的炮制方法描述含糊，多描述為“除去雜質(zhì)，敲成小塊或搗碎”［3］或“取原藥，除去樹(shù)皮等雜質(zhì)。砸碎為黃豆大小”［4］等，對(duì)沒(méi)藥的破碎方式﹑破碎直徑范圍﹑破碎后是否需要篩分﹑如何篩分等凈制加工細(xì)節(jié)，歷版藥典與各地方炮制規(guī)范均未明確規(guī)定，市場(chǎng)上所見(jiàn)天然沒(méi)藥凈制方法均為各企業(yè)自行制定，有的企業(yè)對(duì)此要求并不嚴(yán)格，破碎程度不夠，雜質(zhì)暴露不完全，雜質(zhì)去除不到位，導(dǎo)致沒(méi)藥的雜質(zhì)含量﹑總灰分等普遍較高，品質(zhì)均一性差，摻假﹑摻雜﹑增重情況屢見(jiàn)不鮮。本實(shí)驗(yàn)旨在對(duì)天然沒(méi)藥的凈制方法進(jìn)行研究，探討天然沒(méi)藥凈制加工時(shí)的破碎直徑范圍和篩分方式，以期為天然沒(méi)藥的炮制加工規(guī)范化提供參考，從而更好地控制天然沒(méi)藥飲片質(zhì)量。

1 材料

1.1 試藥

天然沒(méi)藥由江西古漢精制中藥飲片有限公司提供，經(jīng)鑒定均為天然沒(méi)藥，樣品信息見(jiàn)表1。

表1 天然沒(méi)藥樣品信息

1.2 儀器

中藥破碎機(jī)（強(qiáng)力180 型，深圳市興匯力機(jī)械有限公司）；馬弗爐（TDW 型，天津市華北實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；電子天平（ME-204 型，梅特勒）；揮發(fā)油測(cè)定器；回流冷凝管；圓底燒瓶；干燥器；坩堝。

2 方法及結(jié)果

2.1 揮發(fā)油含量測(cè)定

根據(jù)《中國(guó)藥典》2020 年版一部沒(méi)藥項(xiàng)下含量測(cè)定方法：取本品20 g（去除雜質(zhì)），精密稱定，照揮發(fā)油測(cè)定法（通則2204 乙法）進(jìn)行測(cè)定。

2.2 雜質(zhì)

照《中國(guó)藥典》2020 年版一部通則2301 雜質(zhì)檢查法：取適量的供試品，攤開(kāi)，用肉眼或借助放大鏡觀察，將雜質(zhì)揀出。將各類雜質(zhì)分別稱重，計(jì)算其在供試品中的含量（%）。

2.3 總灰分、酸不溶性灰分

根據(jù)《中國(guó)藥典》2020 年版一部沒(méi)藥項(xiàng)下方法：照灰分測(cè)定法（通則2302）進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算供試品中總灰分和酸不溶性灰分的含量（%）。

2.4 外觀性狀

根據(jù)《中國(guó)藥典》2020 年版一部對(duì)天然沒(méi)藥的外觀性狀描述，以表面顏色﹑潔凈度等為標(biāo)準(zhǔn)，分別請(qǐng)10 位不同專業(yè)人員按照上述標(biāo)準(zhǔn)對(duì)供試品外觀性狀進(jìn)行評(píng)分，取平均值。

2.5 凈制加工方法

取供試品，去除雜質(zhì)，使用中藥材破碎機(jī)進(jìn)行破碎，使包裹在藥材內(nèi)部的雜質(zhì)充分暴露，以破碎機(jī)出料孔篩板的篩孔直徑大小作為破碎直徑的大小，篩板可更換，篩板尺寸可選擇。過(guò)篩后攤開(kāi)，再次人工去除雜質(zhì)，然后采用雙篩分法進(jìn)行篩分，按照上篩孔直徑必須大于下篩孔直徑的原則進(jìn)行篩分孔徑組合，保持水平狀態(tài)過(guò)篩，震動(dòng)篩子，未通過(guò)上篩的較大顆粒重復(fù)破碎﹑揀選雜質(zhì)，篩分直至全部通過(guò)上篩。取能過(guò)上篩并不能通過(guò)下篩的天然沒(méi)藥，數(shù)次合并，即得。根據(jù)破碎的直徑以及篩子的直徑大小，產(chǎn)生20 種凈制加工方法，樣品編號(hào)和加工方法見(jiàn)表2。

2.6 凈制方法優(yōu)選

為了客觀全面地評(píng)價(jià)不同凈制方法對(duì)沒(méi)藥質(zhì)量的影響，本文采用多指標(biāo)綜合評(píng)分法進(jìn)行工藝優(yōu)選［5-6］。雜質(zhì)﹑總灰分﹑酸不溶灰分是沒(méi)藥潔凈程度的指標(biāo)，均為越低越好；外觀和揮發(fā)油含量為沒(méi)藥品質(zhì)優(yōu)劣的指標(biāo)，越高越好。因此，在數(shù)據(jù)處理時(shí)引用了綜合指標(biāo)隸屬度，將各指標(biāo)進(jìn)行隸屬度的計(jì)算。其中，雜質(zhì)﹑總灰分和酸不溶灰分的指標(biāo)隸屬度=（指標(biāo)值-指標(biāo)最大值）/（指標(biāo)最小值-指標(biāo)最大值），外觀和揮發(fā)油含量的指標(biāo)隸屬度=（指標(biāo)值-指標(biāo)最小值）/（指標(biāo)最大值-指標(biāo)最小值），0 ≤指標(biāo)隸屬度≤1。根據(jù)《中國(guó)藥典》2020 年版中沒(méi)藥的相關(guān)質(zhì)控檢測(cè)指標(biāo)，將權(quán)重分配為外觀占10%，雜質(zhì)占20%，總灰分占20%，酸不溶性灰分占20%，揮發(fā)油含量占30%。

綜合分?jǐn)?shù)＝外觀隸屬度×10%+雜質(zhì)隸屬度×20%+總灰分隸屬度×20%+酸不溶性灰分隸屬度×20%+揮發(fā)油含量隸屬度×30%，滿分為1.00，計(jì)算各樣品的綜合評(píng)分值。取凈制加工后的沒(méi)藥按上述方法分別測(cè)定雜質(zhì)﹑總灰分﹑酸不溶性灰分和揮發(fā)油含量，根據(jù)綜合評(píng)分計(jì)算方法計(jì)算綜合評(píng)分值，評(píng)分結(jié)果以綜合評(píng)分分?jǐn)?shù)作為總指標(biāo)進(jìn)行直觀分析，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.7 單因素方差分析

采用SPSS 24.0 軟件對(duì)不同指標(biāo)進(jìn)行方差分析，判斷以上20 種凈制方式是否對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)有顯著性影響，當(dāng)P<0.001 時(shí)，說(shuō)明不同凈制方式對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)有極顯著影響；當(dāng)P<0.01 時(shí)，說(shuō)明不同凈制方式對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)有顯著影響，結(jié)果見(jiàn)表4﹑表5﹑表6﹑表7﹑表8，由結(jié)果可知，不同的凈制方法對(duì)外觀和揮發(fā)油具有極顯著性影響，對(duì)雜質(zhì)﹑總灰分和酸不溶性灰分具有顯著性影響。

表4 外觀評(píng)分方差分析表

表5 雜質(zhì)方差分析表

表6 總灰分方差分析表

表7 酸不溶性方差分析表

表8 揮發(fā)油方差分析表

2.8 結(jié)果

通過(guò)實(shí)驗(yàn)可知，凈制加工過(guò)程中破碎直徑和篩分直徑的選擇對(duì)天然沒(méi)藥飲片的品質(zhì)影響極大。20 種加工方法中，破碎直徑為1.5 cm，上篩孔直徑為1.0 cm，下篩孔直徑為0.5 cm 時(shí)，天然沒(méi)藥的綜合得分最高（0.828 1），表明此種加工方法較好。具體操作流程為：取天然沒(méi)藥，去除雜質(zhì)，破碎，過(guò)篩，使藥材直徑≤1.5 cm，使包裹在藥材內(nèi)部的雜質(zhì)進(jìn)一步充分暴露，再次去除雜質(zhì)后，采用雙篩分法再次過(guò)篩（上篩孔直徑為1.0 cm，下篩孔直徑為0.5 cm），未通過(guò)上篩的較大顆粒重復(fù)破碎﹑揀選雜質(zhì)，篩分直至全部通過(guò)上篩。取能過(guò)上篩并不通過(guò)下篩的天然沒(méi)藥，數(shù)次合并，即得。所得天然沒(méi)藥顆粒大小均勻，直徑1.0~0.5 cm，不影響外觀性狀鑒別，方便后續(xù)沒(méi)藥炮制，免去炮制者再次破碎和揀選，較符合實(shí)際生產(chǎn)和用藥需求，凈制前后的天然沒(méi)藥見(jiàn)圖1﹑圖2。

圖1 天然沒(méi)藥原藥材

圖2 凈制后的天然沒(méi)藥

2.9 工藝驗(yàn)證

為驗(yàn)證最佳凈制方法的可靠性，選取3 批天然沒(méi)藥樣品進(jìn)行驗(yàn)證，按優(yōu)選出的方法進(jìn)行炮制，分別測(cè)定雜質(zhì)﹑總灰分﹑酸不溶性灰分和揮發(fā)油含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表9。3 批樣品各測(cè)量值的RSD值均小于3.00%，由此可知，最佳炮制工藝方法穩(wěn)定可行，且重現(xiàn)性較好，可作為沒(méi)藥凈制的炮制工藝方法。

表9 沒(méi)藥最優(yōu)凈制工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)下篩孔直徑為0 cm 時(shí)，即破碎后的天然沒(méi)藥全部保留時(shí)，綜合評(píng)分除20 號(hào)加工方法之外全部小于0.500 0，得分均較低。表明天然沒(méi)藥經(jīng)過(guò)了破碎﹑去除雜質(zhì)﹑過(guò)篩等一系列凈制后，過(guò)于細(xì)小的顆粒中仍舊可能含有泥沙等小的雜質(zhì)，影響沒(méi)藥的品質(zhì)?？梢?jiàn)將過(guò)于細(xì)小的顆粒進(jìn)行篩分去除有助于提高沒(méi)藥的凈度和品質(zhì)，進(jìn)一步證明單純過(guò)篩不足以最大程度去除雜質(zhì)，應(yīng)采用雙篩分的方法較為科學(xué)。

研究還對(duì)通過(guò)下篩孔直徑≤0.5 cm 的沒(méi)藥小顆粒的雜質(zhì)﹑灰分﹑酸不溶性灰分以及揮發(fā)油含量等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)值均在藥典規(guī)定的限度以內(nèi)。但通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)這些細(xì)小的沒(méi)藥顆粒雜質(zhì)含量普遍略低于直徑＞0.5 cm 的顆粒（平均減少2.48%），灰分和酸不溶性灰分含量卻普遍高于直徑＞0.5 cm 的顆粒（灰分平均增加15.85%，酸不溶性灰分平均增加18.76%），而揮發(fā)油的含量則是顯著低于直徑＞0.5 cm 的顆粒（平均降低23.27%），表明凈制過(guò)程中通過(guò)0.5 cm 篩孔篩下的沒(méi)藥小顆粒主要含有無(wú)機(jī)物雜質(zhì)，即泥沙顆粒等。由于非常細(xì)小顆粒難以在前面反復(fù)揀選的環(huán)節(jié)中被除去，隨著小的篩孔一起被篩下，泥沙比重的增加也間接影響了揮發(fā)油的含量。這些凈制后篩選剩下的小顆粒沒(méi)藥，雖品質(zhì)略次一些，但仍符合藥典規(guī)定，且顆粒小，非常適合用來(lái)炮制醋沒(méi)藥﹑炒沒(méi)藥等，在生產(chǎn)應(yīng)用中也收到了良好的效果。

我國(guó)是沒(méi)藥進(jìn)口大國(guó)，但由于原沒(méi)藥的來(lái)源混雜﹑產(chǎn)地加工落后以及市場(chǎng)流通渠道混亂等原因，原沒(méi)藥的質(zhì)量參差不齊。又因?yàn)槿狈ο鄳?yīng)的凈制加工標(biāo)準(zhǔn)，市場(chǎng)上的沒(méi)藥普遍等級(jí)混亂，時(shí)有摻雜﹑摻假現(xiàn)象，品質(zhì)和價(jià)格也相差很大，存在許多質(zhì)量問(wèn)題，并且凈沒(méi)藥質(zhì)量的參差不齊還將直接影響其他炮制品種。本實(shí)驗(yàn)以外觀﹑雜質(zhì)﹑總灰分﹑酸不溶性灰分以及揮發(fā)油含量為指標(biāo)，采用綜合評(píng)分法對(duì)天然沒(méi)藥凈制加工方法進(jìn)行優(yōu)選，所篩選的加工方法操作簡(jiǎn)便，可直接應(yīng)用現(xiàn)代化的中藥材破碎﹑篩分設(shè)備操作，生產(chǎn)效率大大提高，加工后的天然沒(méi)藥飲片品相和質(zhì)量良好，綜合評(píng)分較高，符合實(shí)際生產(chǎn)和使用需求，對(duì)沒(méi)藥的炮制加工和生產(chǎn)的規(guī)范化﹑產(chǎn)業(yè)化具有重要指導(dǎo)意義。