馬沛燃，馬建軍，付光宇，劉功成，渠海

（鄭州安圖生物工程股份有限公司，河南 鄭州 450000 ）

在使用佳能系列全自動生化分析儀進(jìn)行臨床樣本生化指標(biāo)檢測時(shí)，需要用配套酸、堿清洗液對比色杯進(jìn)行有效清洗，以減少樣本間的交叉污染，保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。清洗液作為佳能系列全自動生化分析儀各生化檢測項(xiàng)目的配套通用試劑，各大醫(yī)院在使用過程中，每日的消耗量巨大，而且原裝進(jìn)口清洗液價(jià)格昂貴。因此，為了降低佳能系列全自動生化分析儀的使用成本，筆者查閱文獻(xiàn)資料［1-3］，進(jìn)行了相關(guān)技術(shù)調(diào)研。認(rèn)為要實(shí)現(xiàn)對比色杯的高效率清洗，清洗液必須能有效清除檢測過程比色杯內(nèi)可能殘留的無機(jī)質(zhì)、蛋白質(zhì)污漬、脂類污漬等。結(jié)合其清洗原理、程序，自制了相應(yīng)的酸、堿清洗液，并替換原裝清洗液進(jìn)行了應(yīng)用對比驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，取得了較好的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 原裝清洗液 堿性清洗液（Maxpia B14）、酸性清洗液（Maxpia 3）。

1.1.2 自配清洗液 堿性清洗液：向容器中加入50.0 g 的Triton X-100、30.0 g 丙二醇，然后加入一定質(zhì)量的純化水?dāng)嚢璩浞秩芙?，再依次加?4.0 g的EDTA-2Na，18.0 g 氫氧化鈉充分?jǐn)嚢枋蛊渫耆芙?，最后加純化水? L，得到1 L 自配堿性清洗液，pH 值13.00～14.00。酸性清洗液：向容器里加入一定質(zhì)量的純化水，然后依次加入15.0 g 的Tween-20，15 mL 冰乙酸，3.0 g 氯乙酸，10 mL 甲醇攪拌混勻，最后加純化水至1 L，得到酸性清洗液，pH 值0.90～1.10。

1.1.3 檢測項(xiàng)目試劑 K、Na、Cl 測定試劑盒（佳能原裝試劑）；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、載脂蛋白A1（APOA1）、載脂蛋白B（APOB）、Ca、Mg、P 測定試劑盒（北京安圖生物工程有限公司生產(chǎn)）；低、中、高三種水平質(zhì)控品（鄭州標(biāo)源生物科技有限公司生產(chǎn)）。

1.1.4 樣本 30 例臨床樣本；100 mL 質(zhì)控血清。

1.2 儀器與設(shè)備

佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 對比試驗(yàn)及相關(guān)性 取30 例臨床樣本（被抽樣人空腹靜脈血）分離得到的血清分裝成兩份和低、中、高三種水平多項(xiàng)生化質(zhì)控品（兩份），在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上，分別用原裝酸、堿性清洗液和自配酸、堿性清洗液（實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序），對K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行測定。

1.3.2 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn) 分別用佳能原裝清洗液和自配酸、堿性清洗液（實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序），在K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目上，分別對低、中、高三種水平質(zhì)控品進(jìn)行測定，每個(gè)水平測試3 次，測試10 d 求得總平均值，并計(jì)算兩者之間的相對偏差。

1.3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 分別使用佳能原裝清洗液和自配酸、堿性清洗液（實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序），選取同一份混合質(zhì)控血清，分別在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上對K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目各重復(fù)測定25 次，又分別在連續(xù)20 d 內(nèi)對同一混合質(zhì)控血清進(jìn)行日間測定。對檢測結(jié)果進(jìn)行批內(nèi)精密度、日間精密度分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

測定數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 25 進(jìn)行處理分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，對測得值作配對t檢驗(yàn)和線性回歸。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩清洗液對比試驗(yàn)及相關(guān)性

對比實(shí)驗(yàn)及相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)見表1。由表1 分析可知，使用原裝酸、堿清洗液和自配酸、堿清洗液，分別對14 個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行檢測，各項(xiàng)目均值間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），相關(guān)性良好（r＞0.99），表明自配酸、堿洗液可以實(shí)現(xiàn)對比色杯的有效清洗。替換原裝清洗液進(jìn)行樣本檢測，對臨床檢驗(yàn)結(jié)果無太大影響。

表1 原裝清洗液與自配清洗液對標(biāo)本檢測結(jié)果的影響及相關(guān)性（± s）

表1 原裝清洗液與自配清洗液對標(biāo)本檢測結(jié)果的影響及相關(guān)性（± s）

2.2 準(zhǔn)確度分析

自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液測試低、中、高水平質(zhì)控結(jié)果見表2。由表2 分析可知，使用自配清洗液，在各檢測項(xiàng)目上，低、中、高三種水平質(zhì)控的檢測值，相對原裝清洗液檢測值的相對偏差均小于±2%，表明使用自配清洗液進(jìn)行檢測，對檢測結(jié)果無太大影響，檢測結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確度。

表2 自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液測試低、中、高水平質(zhì)控結(jié)果

2.3 精密度性試驗(yàn)

自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液批內(nèi)、日間精密度實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果見表3。由表3 分析可知，在各檢測項(xiàng)目上，使用自配酸、堿性清洗液清洗后檢測結(jié)果的批內(nèi)精密度、日間精密度整體小于5%，不差于原裝清洗液，表明自配清洗液替換原裝清洗液進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果具有較好的精密性。

表3 自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液批內(nèi)、日間精密度實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果

3 討論

通過自配酸、堿清洗液與佳能原裝清洗液在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上的應(yīng)用對比實(shí)驗(yàn)研究可知，自配酸、堿清洗液和原裝清洗相比，各項(xiàng)目的均值間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），檢測結(jié)果相關(guān)性好（r＞0.99）。各項(xiàng)目的檢測準(zhǔn)確度高，與原裝清洗液檢測結(jié)果相對偏差＜2%。檢測結(jié)果的精密度好，各項(xiàng)目檢測結(jié)果的批內(nèi)精密度和日間精密度整體＜5%，不差于原裝清洗液。因此，自配原裝清洗液和佳能原裝進(jìn)口清洗液應(yīng)用性能一致，能有效替代原裝進(jìn)口清洗液，應(yīng)用于佳能系列全自動生化分析儀，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室臨床檢測實(shí)驗(yàn)，減少進(jìn)口試劑的使用，降低臨床檢測成本。