馬沛燃,馬建軍,付光宇,劉功成,渠海
(鄭州安圖生物工程股份有限公司,河南 鄭州 450000 )
在使用佳能系列全自動生化分析儀進(jìn)行臨床樣本生化指標(biāo)檢測時(shí),需要用配套酸、堿清洗液對比色杯進(jìn)行有效清洗,以減少樣本間的交叉污染,保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。清洗液作為佳能系列全自動生化分析儀各生化檢測項(xiàng)目的配套通用試劑,各大醫(yī)院在使用過程中,每日的消耗量巨大,而且原裝進(jìn)口清洗液價(jià)格昂貴。因此,為了降低佳能系列全自動生化分析儀的使用成本,筆者查閱文獻(xiàn)資料[1-3],進(jìn)行了相關(guān)技術(shù)調(diào)研。認(rèn)為要實(shí)現(xiàn)對比色杯的高效率清洗,清洗液必須能有效清除檢測過程比色杯內(nèi)可能殘留的無機(jī)質(zhì)、蛋白質(zhì)污漬、脂類污漬等。結(jié)合其清洗原理、程序,自制了相應(yīng)的酸、堿清洗液,并替換原裝清洗液進(jìn)行了應(yīng)用對比驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),取得了較好的應(yīng)用效果。
1.1.1 原裝清洗液 堿性清洗液(Maxpia B14)、酸性清洗液(Maxpia 3)。
1.1.2 自配清洗液 堿性清洗液:向容器中加入50.0 g 的Triton X-100、30.0 g 丙二醇,然后加入一定質(zhì)量的純化水?dāng)嚢璩浞秩芙?,再依次加?4.0 g的EDTA-2Na,18.0 g 氫氧化鈉充分?jǐn)嚢枋蛊渫耆芙?,最后加純化水? L,得到1 L 自配堿性清洗液,pH 值13.00~14.00。酸性清洗液:向容器里加入一定質(zhì)量的純化水,然后依次加入15.0 g 的Tween-20,15 mL 冰乙酸,3.0 g 氯乙酸,10 mL 甲醇攪拌混勻,最后加純化水至1 L,得到酸性清洗液,pH 值0.90~1.10。
1.1.3 檢測項(xiàng)目試劑 K、Na、Cl 測定試劑盒(佳能原裝試劑);谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、載脂蛋白A1(APOA1)、載脂蛋白B(APOB)、Ca、Mg、P 測定試劑盒(北京安圖生物工程有限公司生產(chǎn));低、中、高三種水平質(zhì)控品(鄭州標(biāo)源生物科技有限公司生產(chǎn))。
1.1.4 樣本 30 例臨床樣本;100 mL 質(zhì)控血清。
佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀。
1.3.1 對比試驗(yàn)及相關(guān)性 取30 例臨床樣本(被抽樣人空腹靜脈血)分離得到的血清分裝成兩份和低、中、高三種水平多項(xiàng)生化質(zhì)控品(兩份),在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上,分別用原裝酸、堿性清洗液和自配酸、堿性清洗液(實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序),對K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行測定。
1.3.2 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn) 分別用佳能原裝清洗液和自配酸、堿性清洗液(實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序),在K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目上,分別對低、中、高三種水平質(zhì)控品進(jìn)行測定,每個(gè)水平測試3 次,測試10 d 求得總平均值,并計(jì)算兩者之間的相對偏差。
1.3.3 精密度實(shí)驗(yàn) 分別使用佳能原裝清洗液和自配酸、堿性清洗液(實(shí)驗(yàn)前執(zhí)行清洗程序),選取同一份混合質(zhì)控血清,分別在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上對K、Na、Cl、ALB、TP、ALT、AST、TBIL、DBIL、APOA1、APOB、Ca、Mg、P 等14 個(gè)項(xiàng)目各重復(fù)測定25 次,又分別在連續(xù)20 d 內(nèi)對同一混合質(zhì)控血清進(jìn)行日間測定。對檢測結(jié)果進(jìn)行批內(nèi)精密度、日間精密度分析。
測定數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 25 進(jìn)行處理分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,對測得值作配對t檢驗(yàn)和線性回歸。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
對比實(shí)驗(yàn)及相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)見表1。由表1 分析可知,使用原裝酸、堿清洗液和自配酸、堿清洗液,分別對14 個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行檢測,各項(xiàng)目均值間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),相關(guān)性良好(r>0.99),表明自配酸、堿洗液可以實(shí)現(xiàn)對比色杯的有效清洗。替換原裝清洗液進(jìn)行樣本檢測,對臨床檢驗(yàn)結(jié)果無太大影響。
表1 原裝清洗液與自配清洗液對標(biāo)本檢測結(jié)果的影響及相關(guān)性(± s)
表1 原裝清洗液與自配清洗液對標(biāo)本檢測結(jié)果的影響及相關(guān)性(± s)
自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液測試低、中、高水平質(zhì)控結(jié)果見表2。由表2 分析可知,使用自配清洗液,在各檢測項(xiàng)目上,低、中、高三種水平質(zhì)控的檢測值,相對原裝清洗液檢測值的相對偏差均小于±2%,表明使用自配清洗液進(jìn)行檢測,對檢測結(jié)果無太大影響,檢測結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確度。
表2 自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液測試低、中、高水平質(zhì)控結(jié)果
自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液批內(nèi)、日間精密度實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果見表3。由表3 分析可知,在各檢測項(xiàng)目上,使用自配酸、堿性清洗液清洗后檢測結(jié)果的批內(nèi)精密度、日間精密度整體小于5%,不差于原裝清洗液,表明自配清洗液替換原裝清洗液進(jìn)行檢測,檢測結(jié)果具有較好的精密性。
表3 自配酸、堿性清洗液與原裝清洗液批內(nèi)、日間精密度實(shí)驗(yàn)測試結(jié)果
通過自配酸、堿清洗液與佳能原裝清洗液在佳能TBA-FX8 全自動生化分析儀上的應(yīng)用對比實(shí)驗(yàn)研究可知,自配酸、堿清洗液和原裝清洗相比,各項(xiàng)目的均值間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),檢測結(jié)果相關(guān)性好(r>0.99)。各項(xiàng)目的檢測準(zhǔn)確度高,與原裝清洗液檢測結(jié)果相對偏差<2%。檢測結(jié)果的精密度好,各項(xiàng)目檢測結(jié)果的批內(nèi)精密度和日間精密度整體<5%,不差于原裝清洗液。因此,自配原裝清洗液和佳能原裝進(jìn)口清洗液應(yīng)用性能一致,能有效替代原裝進(jìn)口清洗液,應(yīng)用于佳能系列全自動生化分析儀,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室臨床檢測實(shí)驗(yàn),減少進(jìn)口試劑的使用,降低臨床檢測成本。