李 磊，劉欣苑，周榮攀，禹 猛，李 贊

（1.華電西藏能源有限公司大古水電分公司，西藏山南 856200；2.武漢中科瑞華生態(tài)科技股份有限公司，武漢 430061）

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.2 試驗方法

試驗設(shè)置9、12、15、18 ℃4 個溫度試驗組，每個溫度組設(shè)3 個平行，每組放入受精卵1 000 粒。每組的溫差為±0.5 ℃。為防止溫度突變對胚胎發(fā)育產(chǎn)生不良影響，采取逐步升、降溫的方法，升（降）溫速度為0.5 ℃/h，達(dá)到設(shè)計溫度后保持恒溫。定期觀察并記錄各組溫度及胚胎發(fā)育情況，仔魚半數(shù)孵出時，計算其孵化時數(shù)和積溫，全部孵化后計算孵化率。孵定每天觀察受精卵孵化情況，剔除死卵并記錄死亡數(shù)量。

1.3 數(shù)據(jù)計算與處理

采用Microsoft Excel 2013 和SPSS 19.0 對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，利用單因素方差分析和Ducan 多重比較來檢驗各組間的顯著性水平；采用OriginPro 9進(jìn)行繪圖。試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)一采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

式中，V=1/N，為發(fā)育所需時間的倒數(shù)；N為發(fā)育所需時間，h；T為孵化溫度平均值，℃；n為數(shù)據(jù)組數(shù)；C為生物學(xué)零度，℃。

K=N（T-C）

式中，K為有效積溫，℃·h。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑斑原胚胎孵化時間與溫度的關(guān)系

圖1 黑斑原胚胎孵化時間與溫度的關(guān)系

2.2 黑斑原胚胎孵化率與溫度的關(guān)系

圖2 黑斑原胚胎孵化率與溫度的關(guān)系

2.3 黑斑原胚胎發(fā)育的生物學(xué)零度與有效積溫

表1 不同孵化溫度下黑斑原胚胎發(fā)育的有效積溫

表1 不同孵化溫度下黑斑原胚胎發(fā)育的有效積溫

設(shè)計溫度//℃9 12 15 18實際平均溫度//℃9.2 12.5 14.6 18.2孵化時間//h 338.0 253.0 204.5 162.0有效積溫//℃·h 2 662.93 2 799.10 2 691.96 2 715.71

3 小結(jié)

外界環(huán)境因素對魚類胚胎發(fā)育有重要的影響，其中溫度是最主要的影響因素。不同魚類的生境不同，最適胚胎發(fā)育溫度也有區(qū)別。白斑狗魚的最適胚胎發(fā)育溫度在14～16 ℃［8］，海水青鳉的最適胚胎發(fā)育溫度為28 ℃左右［9］，松江鱸的最適胚胎發(fā)育溫度在10～11 ℃［10］。本研究表明，黑斑原的最適胚胎發(fā)育溫度在12～15 ℃，在此溫度條件下，黑斑原

胚胎的存活率最高，孵化時較短，初孵仔魚狀態(tài)最好。這與黑斑原自然產(chǎn)卵的環(huán)境因素有關(guān)，雅魯藏布江常年水溫在1～16 ℃，每年5—6 月水溫為11～15 ℃［1］，而5—6 月正是黑斑原的繁殖季節(jié)。9～18 ℃時黑斑原均能孵化出膜，在該溫度區(qū)間內(nèi)，黑斑原胚胎發(fā)育時間與溫度呈負(fù)相關(guān)，即隨著水溫升高，孵化時間變短。這與海水青鳉、黃姑魚、日本鰻鱺和白斑狗魚胚胎發(fā)育時間與溫度的研究結(jié)果一致［8，9，11-13］。溫度對胚胎孵化的進(jìn)程進(jìn)行影響主要是通過影響孵化酶的分泌與活性，而魚類受精卵的孵化主要依靠胚胎扭動及孵化酶催化［14，15］。在溫度為9.2～14.6 ℃，隨著溫度升高，黑斑原胚胎的孵化率逐漸升高，孵化時間降低，這表明孵化水溫逐漸接近黑斑原孵化酶的最適溫度。雖然提高溫度可以縮短胚胎發(fā)育時間，但可能對魚類的生長發(fā)育產(chǎn)生一定的副作用［16］。因此，在人工繁殖過程中，應(yīng)遵循自然規(guī)律，將黑斑原的繁殖孵化水溫保持在12～15 ℃。